| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-37页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的生物学特性 | 第14-15页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白 | 第15-26页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因 | 第15-17页 |
| ·杀虫晶体蛋白的命名与分类研究 | 第17-19页 |
| ·杀虫晶体蛋白的结构和功能 | 第19-26页 |
| ·杀虫晶体蛋白与DNA分子的相互作用 | 第26-29页 |
| ·伴胞晶体和原毒素中存在DNA分子的依据 | 第26-27页 |
| ·DNA分子在激活原毒素中的作用 | 第27-29页 |
| ·蛋白质结构预测的研究 | 第29-31页 |
| ·蛋白质与DNA相互作用荧光光谱研究 | 第31-33页 |
| ·荧光猝灭技术概述 | 第31-32页 |
| ·猝灭类型 | 第32-33页 |
| ·蛋白质-DNA分子对接 | 第33-35页 |
| ·立题依据和意义 | 第35-37页 |
| 第二章 Bt Cry1Ac5蛋白的三维结构与功能 | 第37-55页 |
| ·材料和方法 | 第37-39页 |
| ·目标蛋白序列 | 第37-38页 |
| ·软件和数据库 | 第38页 |
| ·序列联配和同源蛋白的确定 | 第38页 |
| ·Cry1Ac5三维结构模建和分子力学能量优化 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-51页 |
| ·基本参数的比较 | 第39-40页 |
| ·Blastp对Brookhaven PDB蛋白结构数据库搜索的结果 | 第40-41页 |
| ·序列比对 | 第41-42页 |
| ·三维结构特征 | 第42-44页 |
| ·Cry1Ac5与几种毒素蛋白的结构与功能比较 | 第44-49页 |
| ·模型的验证 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| ·小结 | 第53-55页 |
| 第三章 20-kb DNA和Cry1Ac5蛋白的分离纯化 | 第55-75页 |
| ·材料和方法 | 第55-65页 |
| ·材料 | 第55-59页 |
| ·试验方法 | 第59-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-73页 |
| ·Bt4.0178菌株质粒的提取及cry1Ac5基因的鉴定 | 第65-66页 |
| ·全长序列的cry1Ac5基因的PCR扩增 | 第66页 |
| ·中间重组质粒pUAc19的构建 | 第66-67页 |
| ·表达载体pHTAc35的构建 | 第67-69页 |
| ·表达载体pHTAc35电转化无晶体突变株cry~-B和鉴定 | 第69-70页 |
| ·Cry1Ac5的表达 | 第70-71页 |
| ·晶体中20-kb DNA的分离和回收 | 第71-72页 |
| ·Cry1Ac5蛋白的分子筛凝胶层析分离纯化 | 第72页 |
| ·Cry1Ac5蛋白的阴离子交换层析纯化 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 第四章 Cry1Ac5蛋白与20-kb DNA结合特性研究 | 第75-89页 |
| ·材料和方法 | 第76-78页 |
| ·材料 | 第76页 |
| ·试验方法 | 第76-78页 |
| ·结果 | 第78-85页 |
| ·20-kb DNA结合部位 | 第78-80页 |
| ·20-kb DNA的酶切结果 | 第80-81页 |
| ·中肠液对回收的20-kb DNA和Cry1Ac5晶体蛋白的降解 | 第81页 |
| ·Cry1Ac5晶体蛋白溶液Zeta电位分析 | 第81-83页 |
| ·纯化Cry1Ac5蛋白和体外重新结合物对胰蛋白酶的敏感性 | 第83-84页 |
| ·纯化Cry1Ac5蛋白和体外重新结合物对UV的敏感性 | 第84-85页 |
| ·室内生物测定 | 第85页 |
| ·讨论 | 第85-87页 |
| ·20-kb DNA在晶体蛋白中的存在 | 第85-86页 |
| ·20-kb DNA对Cry1Ac5蛋白的稳定性影响 | 第86-87页 |
| ·20-kb DNA对Cry1Ac5蛋白毒力的影响 | 第87页 |
| ·小结 | 第87-89页 |
| 第五章 Cry1Ac5与20-kb DNA结合的荧光光谱分析 | 第89-101页 |
| ·材料与方法 | 第89-92页 |
| ·材料 | 第89-90页 |
| ·试验方法 | 第90-92页 |
| ·结果与分析 | 第92-98页 |
| ·Cry1Ac5活化蛋白的进一步纯化 | 第92-93页 |
| ·Cry1Ac5活化蛋白内源性荧光光谱的测定 | 第93-94页 |
| ·20-kb DNA和ct DNA对Cry1Ac5活化蛋白内源性的荧光猝灭光谱 | 第94-96页 |
| ·20-kbDNA与Cry1Ac5活化蛋白作用的结合常数和结合位点数 | 第96页 |
| ·溶液离子强度对20-kbDNA和Cry1Ac5活化蛋白体系荧光强度 的影响 | 第96-97页 |
| ·Cry1Ac5活化蛋白对EB-20-kbDNA体系荧光光谱的影响 | 第97-98页 |
| ·讨论 | 第98-99页 |
| ·小结 | 第99-101页 |
| 第六章 Cry1Ac5与DNA的结合模式 | 第101-113页 |
| ·材料和方法 | 第101-103页 |
| ·材料 | 第101-102页 |
| ·试验方法 | 第102-103页 |
| ·结果与分析 | 第103-109页 |
| ·Cry1Ac5结合DNA的位点 | 第103-104页 |
| ·模型的分子动力学优化 | 第104-105页 |
| ·Cry1Ac5和20-bp DNA分子对接结果 | 第105-109页 |
| ·讨论 | 第109-112页 |
| ·Cry1Ac5蛋白上结合20-bp DNA位点 | 第109-111页 |
| ·复合物中Cry1Ac5和20-bp DNA相互作用力 | 第111页 |
| ·晶体蛋白与20-kbDNA结合的新模式 | 第111-112页 |
| ·小结 | 第112-113页 |
| 第七章 主要结论和今后的研究设想 | 第113-116页 |
| ·本研究的主要结论 | 第113-114页 |
| ·本研究的创新点和科学意义 | 第114页 |
| ·今后的研究设想 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-130页 |
| 攻读博士学位期间撰写和发表的论文 | 第130-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
