| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| ·古菌的概述 | 第9-11页 |
| ·冰岛硫化叶菌 | 第11-12页 |
| ·同源重组修复 | 第12-19页 |
| ·细菌中DNA的同源重组 | 第14-15页 |
| ·真核生物中DNA的同源重组 | 第15-16页 |
| ·古菌中DNA的同源重组 | 第16-19页 |
| ·研究目的与内容 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-32页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·主要的化学药品 | 第20-22页 |
| ·主要的化学试剂 | 第22页 |
| ·主要的分子操作试剂盒 | 第22-23页 |
| ·培养基及成分 | 第23页 |
| ·实验仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法及原理 | 第24-32页 |
| ·敲除载体的构建及基因敲除原理 | 第24-29页 |
| ·敲除载体的线性化及电转化S. islandicus E233s | 第29-30页 |
| ·双交换转化子的筛选、验证及纯化 | 第30页 |
| ·目的基因缺失突变株的筛选 | 第30-31页 |
| ·radA基因功能互补型缺失突变株的筛选 | 第31-32页 |
| ·双交换转化子在不同碳源培养基中的培养 | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-41页 |
| ·用于构建敲除载体的目的片段的PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·敲除载体的酶切验证 | 第33-34页 |
| ·双交换转化子的PCR验证 | 第34-35页 |
| ·目的基因缺失突变株的筛选 | 第35页 |
| ·功能互补型缺失突变株的筛选 | 第35-38页 |
| ·反筛选富集实验 | 第35-37页 |
| ·PCR验证及radA基因的半定量分析 | 第37-38页 |
| ·双交换转化子在不同碳源培养基中的生长曲线 | 第38-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| ·基因敲除方法的建立 | 第41-42页 |
| ·radA基因缺失突变体的筛选 | 第42页 |
| ·radA基因的表达对细胞生长的影响 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 致谢 | 第50页 |