| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表(ABBREVIATIONS) | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| ·研究问题的由来 | 第12页 |
| ·文献综述 | 第12-19页 |
| ·猪抗病性状的相关候选基因研究 | 第12-13页 |
| ·FUT1基因与抗病性 | 第12页 |
| ·MHC与抗病性 | 第12页 |
| ·IFN基因与抗病性 | 第12-13页 |
| ·Hal和NRAMP1基因与抗病性 | 第13页 |
| ·Mx基因与抗病性 | 第13页 |
| ·拟分离基因的研究进展 | 第13-19页 |
| ·TIM基因的定位 | 第13-14页 |
| ·TIM基因的结构 | 第14-16页 |
| ·TIM基因的功能 | 第16页 |
| ·TIM1的功能 | 第16-17页 |
| ·TIM3的功能 | 第17-18页 |
| ·TIM2和TIM4的功能 | 第18页 |
| ·TIM基因多态与疾病的关系 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-32页 |
| ·材料 | 第20-24页 |
| ·DNA样和组织样 | 第20页 |
| ·载体和菌株 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·常规试剂的配置 | 第22-23页 |
| ·主要分子生物学软件 | 第23-24页 |
| ·主要数据库 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-32页 |
| ·总RNA提取、完整性检测、DNase Ⅰ处理以及cDNA的合成 | 第24-25页 |
| ·采用TRIZOL提取组织样RNA | 第24页 |
| ·试剂盒提取RNA | 第24-25页 |
| ·RNA的完整性检测 | 第25页 |
| ·总RNA的DNase-Ⅰ处理及其纯化 | 第25页 |
| ·RNA的反转录 | 第25页 |
| ·猪TIM1和TIM3基因CDS的克隆、组织表达谱 | 第25-29页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·PCR扩增条件 | 第26页 |
| ·PCR产物回收、克隆和测序 | 第26-28页 |
| ·猪TIM1和TIM3的组织表达谱 | 第28-29页 |
| ·猪TIM3蛋白的亚细胞定位 | 第29-30页 |
| ·猪TIM3基因亚细胞定位载体的构建 | 第29页 |
| ·细胞培养以及转染 | 第29-30页 |
| ·猪TIM3基因SNP鉴定、分型和关联分析 | 第30-31页 |
| ·引物设计 | 第30页 |
| ·SNP检测鉴定 | 第30页 |
| ·PCR-RFLP | 第30页 |
| ·试验资源猪群性状测定 | 第30-31页 |
| ·数据统计分析 | 第31页 |
| ·猪TIM3基因5′侧翼区的克隆和报告载体的构建 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-47页 |
| ·猪TIM1和TIM3基因的基本特征 | 第32-36页 |
| ·猪TIM1和TIM3的mRNA序列 | 第32页 |
| ·TIM1和TIM3基因的系统进化树 | 第32-33页 |
| ·猪TIM1和TIM3蛋白信号肽的预测图 | 第33-34页 |
| ·猪TIM1和TIM3蛋白的跨膜预测 | 第34-35页 |
| ·猪TIM1和TIM3功能域分析 | 第35-36页 |
| ·部分活性位点预测 | 第36页 |
| ·猪TIM1蛋白部分活性位点预测 | 第36页 |
| ·猪TIM3蛋白部分活性位点预测 | 第36页 |
| ·猪TIM1和TIM3的组织表达谱 | 第36-41页 |
| ·猪TIM1的组织表达谱 | 第36-37页 |
| ·人TIM1的组织表达情况 | 第37-38页 |
| ·猪TIM3的组织表达谱 | 第38-40页 |
| ·人TIM3基因的组织表达情况 | 第40-41页 |
| ·猪TIM3蛋白的亚细胞定位 | 第41-42页 |
| ·空载体pEGFP-N1亚细胞定位 | 第41页 |
| ·猪TIM3-GFP融合蛋白的亚细胞分布 | 第41-42页 |
| ·猪TIM3的SNP检测和关联分析 | 第42-45页 |
| ·猪TIM3外显子和启动子的多态位点检测结果 | 第42页 |
| ·关联分析 | 第42-45页 |
| ·猪TIM3基因5′侧翼区的序列和报告载体的酶切图谱 | 第45-47页 |
| ·猪TIM3基因5′侧翼区的序列 | 第45-46页 |
| ·猪TIM3基因5′侧翼区报告载体的酶切图 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| ·猪TIM1和TIM3的基本特征 | 第47页 |
| ·猪TIM1和TIM3基因的组织表达谱分析 | 第47页 |
| ·猪TIM3蛋白的亚细胞定位 | 第47-48页 |
| ·猪TIM3的多态位点与性状关联分析 | 第48-50页 |
| 5 小结 | 第50-52页 |
| ·本研究获得的主要结果 | 第50页 |
| ·本研究的创新点与特色 | 第50页 |
| ·本研究的不足之处 | 第50-51页 |
| ·下一步研究的思路 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第61-62页 |
| 附录一 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
