| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| 一 HSP70 基因家族研究概述 | 第11-16页 |
| 1 HSP70 基因家族的结构特征 | 第11-12页 |
| 2 HSP70 的分子伴侣活性 | 第12-16页 |
| 二 AtFes1p 蛋白概述 | 第16-20页 |
| 1 拟南芥中HSPBP1/Fes1p 同源体的发现 | 第16-17页 |
| 2 Armadillo 蛋白 | 第17-18页 |
| 3 Armadillo 蛋白的进化与功能 | 第18-20页 |
| 三蛋白质互作技术研究概述 | 第20-26页 |
| 1 GST-Pull down 技术 | 第20-24页 |
| 2 免疫沉淀（Immunoprecipitation）的介绍 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-41页 |
| 1 实验材料 | 第26-28页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌种与质粒 | 第26页 |
| ·酶及生化试剂 | 第26页 |
| ·培养基、常用生化及分子生物学试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·引物序列 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-41页 |
| ·基本分子生物学方法 | 第28-31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·质粒DNA 向大肠杆菌中转化 | 第31-32页 |
| ·突变体的T-DNA 插入子鉴定 | 第32页 |
| ·GST-AtFes1p 融合蛋白的多克隆抗体的制备 | 第32-34页 |
| ·6×His 标记的AtFes1p 蛋白的制备 | 第34-35页 |
| ·植物叶片全蛋白的提取 | 第35页 |
| ·DnaJ 蛋白的制备 | 第35-36页 |
| ·HSP70 蛋白的制备 | 第36-38页 |
| ·GST-AtFes1p- truncate 蛋白纯化 | 第38-39页 |
| ·蛋白质-蛋白质的相互作用 | 第39-40页 |
| ·变性萤光素酶复性活性测定 | 第40页 |
| ·GST 标签蛋白酶切去除GST 标签 | 第40-41页 |
| 第三章 结果及分析 | 第41-67页 |
| 1 突变体的 T-DNA 插入子分析 | 第41-46页 |
| ·At3g09350 突变体T-DNA 插入子分析 | 第41-43页 |
| ·At3g53800 突变体分析 | 第43-45页 |
| ·突变体的表型分析 | 第45-46页 |
| 2 AtFes1p 特异性抗体的制备 | 第46-48页 |
| ·GST-AtFes1p 融合蛋白重组载体的构建 | 第46-47页 |
| ·GST-AtFes1p 融合蛋白的表达 | 第47页 |
| ·GST-AtFes1p 抗体效价的测定 | 第47-48页 |
| ·野生型和突变体拟南芥中AtFes1p 的表达水平分析 | 第48页 |
| 3 6×His 标记的 AtFes1p 蛋白的纯化 | 第48-49页 |
| ·pET-27(b)-AtFes1p 重组载体的构建 | 第48-49页 |
| ·6×His 标记的 AtFes1p 蛋白的表达 | 第49页 |
| 4 DnaJ 蛋白的纯化 | 第49-52页 |
| ·DnaJ 蛋白重组载体的构建 | 第49-51页 |
| ·DnaJ 蛋白的表达 | 第51-52页 |
| 5 HSP70 蛋白的纯化 | 第52-58页 |
| ·HSP70 蛋白的原核表达 | 第52-57页 |
| ·玉米 HSP70 蛋白 | 第57-58页 |
| 6 GST-AtFes1p- truncate 蛋白的纯化 | 第58-61页 |
| ·GST-AtFes1p- truncate 蛋白重组载体构建 | 第58-60页 |
| ·GST-AtFes1p- truncate 蛋白的表达 | 第60-61页 |
| 7 免疫共沉分析 | 第61-62页 |
| 8 GST-Pull down 分析 | 第62-65页 |
| ·ATP/ADP 对 AtFes1p 和 HSP70 体外相互作用影响的分析 | 第62-63页 |
| ·各种因子对 AtFes1p 和 HSP70 体外相互作用的影响的分析 | 第63页 |
| ·GST-AtFes1p和GST-AtFes1p-truncate蛋白与HSP70体外相互作用的分析 | 第63-64页 |
| ·AtFes1p 和 DnaK 的体外互作分析 | 第64-65页 |
| 9 萤光酶复性实验结果分析 | 第65页 |
| 10 GST-AtFes1p 蛋白去除 GST 标签 | 第65-67页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
