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褪黑激素受体基因在内蒙古绒山羊皮肤毛囊中的表达

摘要第1-5页
Abstract第5-14页
1 引言第14-36页
   ·绒山羊毛特点第14-19页
     ·皮肤和毛囊的基本结构第15-16页
     ·毛囊形态发生主要相关的信号分子第16-17页
     ·毛囊生长的周期性变化第17-18页
     ·毛囊周期性变化过程的相关信号分子第18-19页
   ·褪黑激素及其受体第19-34页
     ·褪黑激素的研究进展第19-25页
     ·褪黑激素受体的研究进展第25-34页
   ·本研究的目的、意义及研究方法第34-35页
   ·技术路线第35-36页
2 研究一 内蒙古绒山羊MTNR1a外显子克隆及序列分析第36-50页
   ·实验材料第36-37页
     ·实验动物及组织第36页
     ·主要药品和仪器第36页
     ·引物设计第36-37页
   ·方法第37-41页
     ·基因组DNA的提取第37页
     ·基因片段PCR扩增第37-38页
     ·基因片段克隆第38-41页
     ·主要分子生物学软件及相关网站第41页
   ·实验结果与分析第41-48页
     ·基因组DNA的提取与检测结果第41-42页
     ·PCR扩增结果第42-43页
     ·重组质粒的筛选和鉴定第43-44页
     ·内蒙古绒山羊MTNR1a基因外显子序列分析第44-48页
   ·讨论第48-49页
   ·小结第49-50页
3 研究二 褪黑激素受体基因在内蒙古绒山羊皮肤中的表达第50-68页
   ·实验材料第50-52页
     ·实验动物及组织第50页
     ·主要药品和仪器第50-51页
     ·引物设计第51-52页
   ·实验方法第52-55页
     ·内蒙古绒山羊皮肤、下丘脑组织总RNA提取第52页
     ·总RNA的纯化第52-53页
     ·RT-PCR反应第53-54页
     ·基因片段克隆第54-55页
   ·实验结果与分析第55-63页
     ·RNA提取结果第55页
     ·内蒙古绒山羊皮肤及下丘脑组织总RNA的mRNA纯化结果第55-56页
     ·RT-PCR扩增结果第56-58页
     ·重组质粒的鉴定第58-59页
     ·内蒙古绒山羊MTNR1a、RORα基因片段克隆的测序结果第59-63页
     ·讨论第63-66页
     ·关于MTNR1a基因部分序列的分析第63-64页
     ·关于RORα基因部分序列的分析第64页
     ·MTNR1a、MTNR1b基因在哺乳动物中的表达第64-65页
     ·关于褪黑激素核受体RORα的表达及与褪黑激素的相互作用第65-66页
     ·在RT-PCR检测基因mRNA水平表达中引物的作用第66页
   ·小结第66-68页
4 研究三 MTNR1a及RORα基因在内蒙古绒山羊皮肤毛囊中表达分布第68-88页
   ·实验材料第68-70页
     ·实验动物及组织第68页
     ·主要药品和仪器第68-69页
     ·主要试剂配制第69-70页
     ·MNTR1a探针模板引物设计第70页
   ·实验方法第70-77页
     ·实验仪器与溶液的预处理第70页
     ·组织切片的制备第70-71页
     ·载玻片的预处理第71页
     ·探针制备第71-75页
     ·内蒙古绒山羊皮肤组织Sacpic染色第75-76页
     ·原位杂交第76-77页
   ·结果与分析第77-84页
     ·PCR扩增结果第77-79页
     ·探针转录结果第79-80页
     ·内蒙古绒山羊皮肤组织Sacpic染色结果第80-81页
     ·原位杂交结果第81-84页
   ·讨论第84-87页
     ·关于原位杂交探针第84-85页
     ·关于影响原位杂交效果的因素第85页
     ·内蒙古绒山羊皮肤毛囊结构第85-86页
     ·MTNR1a在羊不同组织的表达第86页
     ·RORα在羊不同组织的表达第86-87页
   ·小结第87-88页
5 研究四 内蒙古绒山羊不同月份皮肤组织RORα基因的表达变化第88-100页
   ·实验材料第88-89页
     ·实验动物及组织第88页
     ·仪器与试剂第88页
     ·引物设计与合成第88-89页
   ·实验方法第89-92页
     ·皮肤组织总RNA的提取第89页
     ·实时荧光定量RT-PCR第89-90页
     ·实时荧光定量RT-PCR检测RORα表达的原理第90-92页
   ·结果与分析第92-97页
     ·总RNA的电泳检测第92页
     ·实时荧光定量PCR检测RORα mRNA方法的确定第92-97页
     ·讨论第97-99页
     ·关于实时定量PCR(RQ-PCR)第97页
     ·RORα的表达与功能第97-98页
     ·关于实验结果的讨论第98-99页
   ·小结第99-100页
6 结论第100页
7 展望第100-101页
致谢第101-102页
参考文献第102-115页
附录第115-119页
作者简介第119页

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