摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-14页 |
1 引言 | 第14-36页 |
·绒山羊毛特点 | 第14-19页 |
·皮肤和毛囊的基本结构 | 第15-16页 |
·毛囊形态发生主要相关的信号分子 | 第16-17页 |
·毛囊生长的周期性变化 | 第17-18页 |
·毛囊周期性变化过程的相关信号分子 | 第18-19页 |
·褪黑激素及其受体 | 第19-34页 |
·褪黑激素的研究进展 | 第19-25页 |
·褪黑激素受体的研究进展 | 第25-34页 |
·本研究的目的、意义及研究方法 | 第34-35页 |
·技术路线 | 第35-36页 |
2 研究一 内蒙古绒山羊MTNR1a外显子克隆及序列分析 | 第36-50页 |
·实验材料 | 第36-37页 |
·实验动物及组织 | 第36页 |
·主要药品和仪器 | 第36页 |
·引物设计 | 第36-37页 |
·方法 | 第37-41页 |
·基因组DNA的提取 | 第37页 |
·基因片段PCR扩增 | 第37-38页 |
·基因片段克隆 | 第38-41页 |
·主要分子生物学软件及相关网站 | 第41页 |
·实验结果与分析 | 第41-48页 |
·基因组DNA的提取与检测结果 | 第41-42页 |
·PCR扩增结果 | 第42-43页 |
·重组质粒的筛选和鉴定 | 第43-44页 |
·内蒙古绒山羊MTNR1a基因外显子序列分析 | 第44-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·小结 | 第49-50页 |
3 研究二 褪黑激素受体基因在内蒙古绒山羊皮肤中的表达 | 第50-68页 |
·实验材料 | 第50-52页 |
·实验动物及组织 | 第50页 |
·主要药品和仪器 | 第50-51页 |
·引物设计 | 第51-52页 |
·实验方法 | 第52-55页 |
·内蒙古绒山羊皮肤、下丘脑组织总RNA提取 | 第52页 |
·总RNA的纯化 | 第52-53页 |
·RT-PCR反应 | 第53-54页 |
·基因片段克隆 | 第54-55页 |
·实验结果与分析 | 第55-63页 |
·RNA提取结果 | 第55页 |
·内蒙古绒山羊皮肤及下丘脑组织总RNA的mRNA纯化结果 | 第55-56页 |
·RT-PCR扩增结果 | 第56-58页 |
·重组质粒的鉴定 | 第58-59页 |
·内蒙古绒山羊MTNR1a、RORα基因片段克隆的测序结果 | 第59-63页 |
·讨论 | 第63-66页 |
·关于MTNR1a基因部分序列的分析 | 第63-64页 |
·关于RORα基因部分序列的分析 | 第64页 |
·MTNR1a、MTNR1b基因在哺乳动物中的表达 | 第64-65页 |
·关于褪黑激素核受体RORα的表达及与褪黑激素的相互作用 | 第65-66页 |
·在RT-PCR检测基因mRNA水平表达中引物的作用 | 第66页 |
·小结 | 第66-68页 |
4 研究三 MTNR1a及RORα基因在内蒙古绒山羊皮肤毛囊中表达分布 | 第68-88页 |
·实验材料 | 第68-70页 |
·实验动物及组织 | 第68页 |
·主要药品和仪器 | 第68-69页 |
·主要试剂配制 | 第69-70页 |
·MNTR1a探针模板引物设计 | 第70页 |
·实验方法 | 第70-77页 |
·实验仪器与溶液的预处理 | 第70页 |
·组织切片的制备 | 第70-71页 |
·载玻片的预处理 | 第71页 |
·探针制备 | 第71-75页 |
·内蒙古绒山羊皮肤组织Sacpic染色 | 第75-76页 |
·原位杂交 | 第76-77页 |
·结果与分析 | 第77-84页 |
·PCR扩增结果 | 第77-79页 |
·探针转录结果 | 第79-80页 |
·内蒙古绒山羊皮肤组织Sacpic染色结果 | 第80-81页 |
·原位杂交结果 | 第81-84页 |
·讨论 | 第84-87页 |
·关于原位杂交探针 | 第84-85页 |
·关于影响原位杂交效果的因素 | 第85页 |
·内蒙古绒山羊皮肤毛囊结构 | 第85-86页 |
·MTNR1a在羊不同组织的表达 | 第86页 |
·RORα在羊不同组织的表达 | 第86-87页 |
·小结 | 第87-88页 |
5 研究四 内蒙古绒山羊不同月份皮肤组织RORα基因的表达变化 | 第88-100页 |
·实验材料 | 第88-89页 |
·实验动物及组织 | 第88页 |
·仪器与试剂 | 第88页 |
·引物设计与合成 | 第88-89页 |
·实验方法 | 第89-92页 |
·皮肤组织总RNA的提取 | 第89页 |
·实时荧光定量RT-PCR | 第89-90页 |
·实时荧光定量RT-PCR检测RORα表达的原理 | 第90-92页 |
·结果与分析 | 第92-97页 |
·总RNA的电泳检测 | 第92页 |
·实时荧光定量PCR检测RORα mRNA方法的确定 | 第92-97页 |
·讨论 | 第97-99页 |
·关于实时定量PCR(RQ-PCR) | 第97页 |
·RORα的表达与功能 | 第97-98页 |
·关于实验结果的讨论 | 第98-99页 |
·小结 | 第99-100页 |
6 结论 | 第100页 |
7 展望 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-115页 |
附录 | 第115-119页 |
作者简介 | 第119页 |