中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 引言 | 第11-26页 |
·研究的目的与意义 | 第11页 |
·文献综述 | 第11-24页 |
·过敏性反应致病性基因及其应用 | 第11-14页 |
·花粉管通道导入法 | 第14-19页 |
·白菜基因工程研究进展 | 第19-24页 |
·研究内容 | 第24-25页 |
·技术路线 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-39页 |
·hrpN_(Ecc)基因的克隆与植物表达载体的构建 | 第26-32页 |
·实验材料 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-32页 |
·花粉管通道法转化大白菜 | 第32-34页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-34页 |
·花序渗透法转化 | 第34-35页 |
·实验材料 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-35页 |
·抗性苗的筛选 | 第35页 |
·除草剂浓度的确定 | 第35页 |
·转化株的筛选 | 第35页 |
·抗性株的分子生物学鉴定 | 第35-39页 |
·用SDS法提取白菜基因组DNA | 第35-36页 |
·PCR鉴定 | 第36-37页 |
·PCR-Southern杂交鉴定 | 第37-39页 |
3 结果与分析 | 第39-51页 |
·hrpN_(Ecc)基因的克隆与植物表达载体的构建 | 第39-46页 |
·胡萝卜软腐欧文氏菌基因组DNA的提取 | 第39-40页 |
·hrpN_(Ecc)基因的扩增 | 第40页 |
·hrpN_(Ecc)基因与克隆载体PMD19-T simple vector的连接 | 第40-41页 |
·目的基因序列的测定和验证 | 第41-42页 |
·植物表达载体的构建 | 第42-45页 |
·重组子转化农杆菌的验证 | 第45-46页 |
·花粉管通道法和花序渗透法介导hrpN_(Ecc)基因转入白菜 | 第46-51页 |
·种子收获 | 第46页 |
·Basta筛选浓度的确定 | 第46页 |
·抗性植株的筛选 | 第46-47页 |
·转基因植株的分子检测 | 第47-51页 |
4 讨论 | 第51-55页 |
·目的基因的选择 | 第51页 |
·花粉管通道法转化白菜的方法 | 第51-53页 |
·外源DNA对转化效果的影响 | 第51-52页 |
·外源DNA导入方式的选择 | 第52页 |
·外源DNA导入时间的选择及其对转化率的影响 | 第52-53页 |
·假阳性率较高的原因分析 | 第53页 |
·与其它花粉管通道法的转化率的比较 | 第53页 |
·本实验的创新点 | 第53页 |
·今后研究方向与展望 | 第53-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
图版 | 第65-69页 |
附录 | 第69-70页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文 | 第70页 |