| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| ·云斑天牛 | 第11-17页 |
| ·云斑天牛的形态特征及生物学特性 | 第11-12页 |
| ·云斑天牛的危害 | 第12-13页 |
| ·云斑天牛的寄主范围及地域分布 | 第13-14页 |
| ·云斑天牛的防治措施 | 第14-17页 |
| ·改造杨树种植方式和培育新品种 | 第14-15页 |
| ·物理防治方法 | 第15页 |
| ·化学防治方法 | 第15页 |
| ·生物防治方法 | 第15-17页 |
| ·苏云金芽胞杆菌 | 第17-24页 |
| ·苏云金芽胞杆菌生物学特性 | 第17-18页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的杀虫活性成分 | 第18-19页 |
| ·苏云金芽胞杆菌晶体蛋白及其编码基因 | 第19-20页 |
| ·苏云金芽胞杆菌晶体蛋白基因的命名和分类 | 第20-22页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白作用机制 | 第22-23页 |
| ·苏云金芽胞杆菌防治鞘翅目害虫的研究状况 | 第23-24页 |
| ·研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 2 材料和方法 | 第25-46页 |
| ·材料 | 第25-29页 |
| ·菌株、质粒与供试昆虫 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·溶液 | 第25-27页 |
| ·常用溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE相关溶液的配制 | 第26-27页 |
| ·所用试剂 | 第27页 |
| ·抗生素 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·试剂盒 | 第27页 |
| ·仪器 | 第27-29页 |
| ·方法 | 第29-46页 |
| ·云斑天牛成虫采集和饲养 | 第29-30页 |
| ·云斑天牛成虫的采集 | 第29-30页 |
| ·室内饲养方法 | 第30页 |
| ·生物测定 | 第30-35页 |
| ·苏云金芽胞杆菌菌悬剂的制备 | 第30-31页 |
| ·晶体蛋白粉剂、芽胞粉剂、胞晶混合物粉剂的制备 | 第31页 |
| ·初筛 | 第31-32页 |
| ·复筛 | 第32页 |
| ·从云斑天牛体内重新分离苏云金芽胞杆菌 | 第32-33页 |
| ·云斑天牛肠道分离菌株的生测验证和16SrDNA鉴定 | 第33页 |
| ·ZQ-89菌株杀虫活性成份的分析 | 第33-34页 |
| ·生测结果的分析方法 | 第34-35页 |
| ·ZQ-89菌株形态观察及晶体蛋白的分析 | 第35-36页 |
| ·ZQ-89菌株形态观察 | 第35页 |
| ·ZQ-89菌株晶体蛋白的分析 | 第35-36页 |
| ·ZQ-89菌株质粒和总DNA的制备 | 第36-37页 |
| ·ZQ-89菌株质粒的抽提 | 第36页 |
| ·ZQ-89菌株总DNA的抽提 | 第36-37页 |
| ·ZQ-89菌株抗虫基因的克隆及序列分析 | 第37-39页 |
| ·Cry1Ac-89基因的克隆 | 第37-38页 |
| ·抗虫基因cry1Ac-89的TA克隆及测序 | 第38页 |
| ·Cry1Ac-89基因和蛋白质氨基酸序列的分析 | 第38-39页 |
| ·ZQ-89菌株中含启动子cry1Ac-89基因片段的扩增 | 第39-41页 |
| ·反向PCR(inversePCR)法扩增cry1Ac-89基因的启动子 | 第39-40页 |
| ·含启动子的cry1Ac-89基因片段的扩增 | 第40-41页 |
| ·pHT304-Ac89载体的构建 | 第41-43页 |
| ·大肠杆菌E. coli DH5 α的质粒抽提 | 第41-42页 |
| ·含启动子cry1Ac-89基因片段和质粒pHT304的双酶切与连接 | 第42-43页 |
| ·pHT304-Ac89转化大肠杆菌E. coli DH5 α并验证 | 第43页 |
| ·工程菌ZAC-89构建 | 第43-44页 |
| ·pHT304-Ac89载体DNA去盐 | 第43-44页 |
| ·pHT304-Ac89转化BMB171 | 第44页 |
| ·工程菌ZAC-89的基本特征 | 第44-46页 |
| ·ZAC-89菌体和伴胞晶体形态观察 | 第44页 |
| ·ZAC-89伴胞晶体产生过程观察 | 第44-45页 |
| ·ZAC-89晶体蛋白SDS-PAGE检测 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-70页 |
| ·生物测定结果 | 第46-61页 |
| ·初筛结果 | 第46-50页 |
| ·复筛结果及分析 | 第50-54页 |
| ·第一次复筛 | 第50-52页 |
| ·第二次复筛 | 第52-54页 |
| ·FZQ-89的分离、生测验证和16SrDNA鉴定 | 第54-57页 |
| ·FZQ-89的分离与形态观察 | 第54-56页 |
| ·FZQ-89菌株的生测验证 | 第56-57页 |
| ·FZQ-89菌株的16SrDNA鉴定 | 第57页 |
| ·ZQ-89抗虫活性成分分析 | 第57-61页 |
| ·ZQ-89菌株抗虫活性成分确定 | 第57-59页 |
| ·ZQ-89菌株晶体蛋白抗虫活性分析 | 第59-61页 |
| ·ZQ-89菌株晶体蛋白的分析 | 第61-63页 |
| ·ZQ-89菌株晶体蛋白SDS-PAGE检测 | 第61-62页 |
| ·ZQ-89菌株晶体蛋白的肽指纹图谱分析 | 第62-63页 |
| ·ZQ-89菌株质粒和基因组DNA的提取 | 第63-64页 |
| ·ZQ-89抗虫基因的克隆及分析 | 第64-65页 |
| ·Cry1Ac-89基因的克隆 | 第64页 |
| ·ZQ-89菌株cry1Ac-89基因及蛋白序列的分析 | 第64-65页 |
| ·工程菌ZAC-89的构建 | 第65-66页 |
| ·工程菌ZAC-89基本特征 | 第66-70页 |
| ·ZAC-89菌体及伴胞晶体形态观察 | 第66-67页 |
| ·ZAC-89伴胞晶体产生过程观察 | 第67-68页 |
| ·ZAC-89晶体蛋白SDS-PAGE检测 | 第68-70页 |
| 4 讨论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附录Ⅰ | 第80-85页 |
| 附录Ⅱ | 第85-86页 |
| 附录Ⅲ | 第86页 |
