| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-36页 |
| 第一节 白念珠菌的生物学特性简介 | 第16-17页 |
| 第二节 白念珠菌RIM101途径与环境pH的应答反应 | 第17-19页 |
| 第三节 微生物铁吸收和储存 | 第19-23页 |
| ·非还原性铁吸收系统-铁载体吸收系统 | 第20-21页 |
| ·还原性铁吸收系统 | 第21-22页 |
| ·铁离子的储存 | 第22-23页 |
| 第四节 微生物高铁还原酶的研究进展 | 第23-31页 |
| ·古生菌高铁还原酶的研究 | 第23页 |
| ·细菌高铁还原酶的研究 | 第23-24页 |
| ·真菌高铁还原酶的研究 | 第24-27页 |
| ·酿酒酵母高铁还原酶表达调控的研究 | 第27-29页 |
| ·粟酒裂殖酵母高铁还原酶表达调控的研究 | 第29页 |
| ·白念珠菌高铁还原酶表达调控的研究 | 第29-31页 |
| 第五节 白念珠菌形态转换的调控机制 | 第31-34页 |
| ·促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)途径 | 第31-32页 |
| ·cAMP/PKA途径 | 第32页 |
| ·pH应答途径 | 第32-33页 |
| ·转录抑制因子Tup1p介导菌丝形成的负调控途径 | 第33页 |
| ·调控形态转换的其它途径和转录因子 | 第33-34页 |
| 第六节 选题依据 | 第34-36页 |
| 第二章 白念珠菌高铁还原酶缺失突变株构建及功能分析 | 第36-62页 |
| 第一节 实验材料 | 第36-39页 |
| ·菌株 | 第36-37页 |
| ·质粒 | 第37页 |
| ·引物 | 第37-39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| 第二节 实验方法 | 第39-45页 |
| ·培养基的配制 | 第39-41页 |
| ·主要试剂溶液的配制 | 第41-42页 |
| ·白念珠菌基因组的提取 | 第42页 |
| ·白念珠菌的转化(醋酸锂方法) | 第42-43页 |
| ·白念珠菌总RNA的提取 | 第43页 |
| ·Southern杂交 | 第43-44页 |
| ·Northern杂交 | 第44页 |
| ·细胞高铁还原酶活性的测定 | 第44-45页 |
| 第三节 结果与分析 | 第45-56页 |
| ·白念珠菌高铁还原酶基因不同条件下的表达 | 第45-47页 |
| ·白念珠菌高铁还原酶单基因缺失突变株的构建 | 第47-49页 |
| ·白念珠菌高铁还原酶双基因缺失突变株的构建 | 第49-51页 |
| ·白念珠菌高铁还原酶缺失突变株对细胞高铁还原酶活性的影响 | 第51-54页 |
| ·白念珠菌高铁还原酶缺失突变株在低铁条件下的生长差异 | 第54-56页 |
| 第四节 讨论 | 第56-60页 |
| ·高铁还原酶基因同源分析 | 第56-57页 |
| ·高铁还原酶基因的表达差异 | 第57-58页 |
| ·高铁还原酶缺失突变株的构建 | 第58-59页 |
| ·高铁还原酶基因的缺失对细胞高铁还原酶活性的影响 | 第59页 |
| ·高铁还原酶缺失突变株在低铁条件下的生长差异比较 | 第59-60页 |
| 第五节 小结 | 第60-62页 |
| 第三章 高铁还原酶FRP1基因的表达调控及蛋白定位分析 | 第62-93页 |
| 第一节 实验材料 | 第62-65页 |
| ·菌株 | 第62-63页 |
| ·质粒 | 第63页 |
| ·引物 | 第63-64页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·主要仪器 | 第64-65页 |
| 第二节 实验方法 | 第65-74页 |
| ·培养基和试剂的配制 | 第65-66页 |
| ·PCR反应体系 | 第66页 |
| ·酶切体系 | 第66-67页 |
| ·DNA连接体系 | 第67页 |
| ·大肠杆菌中质粒的提取 | 第67页 |
| ·大肠杆菌CaCl_2法转化 | 第67-68页 |
| ·大肠杆菌的电转化 | 第68-69页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性的测定 | 第69页 |
| ·白念珠菌核蛋白的制备 | 第69-70页 |
| ·EMSA(electrophoretic mobility shift assay)实验 | 第70-72页 |
| ·定点突变 | 第72-73页 |
| ·PCR介导的目的基因与GFP融合结构的构建 | 第73-74页 |
| 第三节 结果与分析 | 第74-89页 |
| ·高铁还原酶FRP1基因启动子的克隆 | 第74-75页 |
| ·Rim101p转录因子对FRP1基因表达的影响 | 第75-79页 |
| ·FRP1基因启动子调节元件与Rim101p的结合 | 第79-82页 |
| ·Rim101p结合元件对FRP1基因启动子活性的影响 | 第82-87页 |
| ·Frp1蛋白的细胞学定位 | 第87-89页 |
| 第四节 讨论 | 第89-91页 |
| ·高铁还原酶FRP1基因的表达调控 | 第89-90页 |
| ·Frp1蛋白的细胞学定位 | 第90-91页 |
| 第五节 小结 | 第91-93页 |
| 第四章 白念珠菌转录因子Aft2p功能的初步研究 | 第93-121页 |
| 第一节 实验材料 | 第93-96页 |
| ·菌株 | 第93-94页 |
| ·质粒 | 第94页 |
| ·引物 | 第94-95页 |
| ·主要试剂 | 第95-96页 |
| ·主要仪器 | 第96页 |
| 第二节 实验方法 | 第96-100页 |
| ·培养基和试剂的配制 | 第96页 |
| ·白念珠菌基因组的提取 | 第96页 |
| ·白念珠菌的转化(醋酸锂方法) | 第96页 |
| ·酿酒酵母基因组的提取 | 第96-97页 |
| ·酿酒酵母的转化 | 第97页 |
| ·Real-time PCR方法 | 第97-99页 |
| ·白念珠菌毒力检测分析 | 第99页 |
| ·病理切片的制作 | 第99-100页 |
| 第三节 结果与分析 | 第100-116页 |
| ·白念珠菌AFT2基因的克隆 | 第100页 |
| ·白念珠菌AFT2在酿酒酵母中的功能验证 | 第100-106页 |
| ·白念珠菌AFT2基因缺失突变株Caaft2△/△的构建 | 第106-107页 |
| ·白念珠菌AFT2基因回补突变株Caaft2△/△+AFT2的构建 | 第107-109页 |
| ·AFT2基因的缺失对白念珠菌表型的影响 | 第109-111页 |
| ·AFT2基因的缺失对细胞高铁还原酶活力的影响 | 第111-112页 |
| ·CaAft2p转录因子对铁代谢基因的表达调控 | 第112-113页 |
| ·AFT2基因的缺失对菌株毒力的影响 | 第113-116页 |
| 第四节 讨论 | 第116-119页 |
| ·Aft类型转录因子的进化分析 | 第116-118页 |
| ·白念珠菌Aft2p在形态发生和毒力中的作用 | 第118-119页 |
| ·白念珠菌Aft2p转录因子对铁代谢基因的调控 | 第119页 |
| 第五节 小结 | 第119-121页 |
| 第五章 结论与展望 | 第121-124页 |
| ·结论 | 第121-123页 |
| ·主要创新点 | 第123页 |
| ·相关工作的前景展望 | 第123-124页 |
| 参考文献 | 第124-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第135页 |
