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大肠杆菌粘附素亚基FaeG在Lactococcus lactis中的表达及免疫原性研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-7页
英文缩略语对照表第7-12页
第一章 绪论第12-31页
   ·养猪生产背景第12页
   ·产肠毒素大肠杆菌黏附素第12-18页
     ·产肠毒素大肠杆菌的概况第12-13页
     ·ETEC的致病机制第13页
     ·肠毒素(enterotoxin)第13-14页
     ·菌毛粘附素第14-15页
     ·F4 ETEC的受体第15页
     ·F4 ETEC致腹泻的免疫预防第15-18页
   ·乳酸乳球菌的概况第18-22页
     ·L.lactis表达外源蛋白的优势第18页
     ·L.lactis表达异源蛋白的调控系统第18-20页
     ·L.lactis表达外源抗原诱导免疫反应研究第20-22页
   ·本研究目的意义第22页
 参考文献第22-31页
第二章 ETEC K88粘附素蛋白亚基FaeG在L.lactis中的表达第31-44页
   ·引言第31页
   ·材料与方法第31-35页
     ·菌株和质粒第31页
     ·主要试剂第31-32页
     ·常用缓冲液及培养基配制第32页
     ·主要仪器第32页
     ·Fae G基因的克隆与测序第32-33页
     ·L.lactis表达载体的构建第33-34页
     ·重组FaeG的表达第34-35页
     ·Western blot检测重组蛋白第35页
   ·结果第35-40页
     ·fae G基因片段的克隆与测序第35-36页
     ·FaeG表达载体的构建第36-37页
     ·重组FaeG的表达第37-38页
     ·Western blot检测重组蛋白第38-40页
   ·小结第40-41页
 参考文献第41-44页
第三章 表达FaeG重组L.lactis免疫小鼠的研究第44-57页
   ·引言第44页
   ·材料与方法第44-47页
     ·菌株第44页
     ·主要试剂第44页
     ·常用缓冲液及培养基配制第44页
     ·主要仪器第44-45页
     ·F4菌毛提取第45页
     ·重组L.lactis免疫抗原的制备第45页
     ·实验动物分组与免疫第45-46页
     ·样品的采集与处理第46页
     ·小鼠血清及粪样中抗体水平的检测第46页
     ·Elispot检测组织中抗F4菌毛特异性抗体分泌细胞第46-47页
     ·数据统计第47页
   ·结果第47-51页
     ·L.lactis NZ9000(pNZ8148-faeG)免疫小鼠血清和粪中特异性抗体的测定第47-49页
     ·L.lactis NZ9000(pNZ8148-faeG)免疫小鼠组织中特异性抗体分泌细胞的测定第49页
     ·L.lactis NZ9000(pNZ8112-faeG)免疫小鼠特异性抗体的测定第49-50页
     ·L.lactis NZ9000(pNZ8112-faeG)免疫小鼠组织中特异性抗体分泌细胞的测定第50-51页
   ·讨论第51-53页
   ·小结第53-54页
 参考文献第54-57页
第四章 重组L.lactis注射接种仔猪诱导免疫反应的研究第57-73页
   ·引言第57页
   ·材料与方法第57-60页
     ·菌株第57页
     ·主要试剂及其配制第57页
     ·主要仪器第57页
     ·F4菌毛的提取第57-58页
     ·免疫抗原的制备第58页
     ·试验动物选择、分组与免疫第58页
     ·样品采集与处理第58-59页
     ·血清、粪样及肠黏膜组织浸提物中抗F4菌毛特异性抗体检测第59页
     ·免疫组化法检测组织中抗体分泌细胞第59页
     ·统计学分析第59-60页
   ·结果第60-68页
     ·肌肉注射免疫重组L.lactis对仔猪体重的影响第60页
     ·仔猪血清中抗F4菌毛特异性抗体水平检测第60-62页
     ·仔猪肠道粘膜组织中抗F4菌毛特异性抗体水平检测第62-63页
     ·组织中抗体分泌细胞和抗体的检测第63-68页
   ·讨论第68-70页
   ·小结第70页
 参考文献第70-73页
第五章 重组L.lactis口服免疫断奶仔猪诱导免疫反应研究第73-89页
   ·引言第73页
   ·材料与方法第73-75页
     ·菌株第73页
     ·主要试剂及其配制第73页
     ·主要仪器第73页
     ·免疫抗原的准备第73页
     ·试验动物选择、分组与免疫第73-74页
     ·样品采集与处理第74页
     ·血清、粪样及肠黏膜组织浸提物中抗F4菌毛特异性抗体检测第74-75页
     ·免疫组化方法检测仔猪组织中抗体分泌细胞第75页
     ·统计学分析第75页
   ·结果第75-85页
     ·口服免疫重组L.lactis对仔猪体重的影响第75页
     ·仔猪血清中抗F4菌毛特异性抗体水平检测第75-77页
     ·仔猪粪便浸提物中抗F4菌毛特异性抗体水平检测第77-78页
     ·仔猪肠道粘膜组织中抗F4菌毛特异性抗体水平检测第78-79页
     ·仔猪脾脏及肠道黏膜组织中抗体分泌细胞和抗体的检测第79-85页
   ·讨论第85-86页
   ·小结第86-87页
 参考文献第87-89页
论文主要结论第89-90页
论文创新点第90-91页
致谢第91-92页
作者在攻读博士学位期间发表的论文第92-93页
附录:溶液配制第93-94页

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