| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略名词表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-31页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第13页 |
| 1.2 文献综述 | 第13-30页 |
| 1.2.1 植物在非生物逆境胁迫下的应答反应 | 第13-18页 |
| 1.2.2 植物非生物逆境胁迫与叶片衰老 | 第18-26页 |
| 1.2.3 CO-like家族基因研究进展 | 第26-30页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-42页 |
| 2.1 水稻材料 | 第31页 |
| 2.2 菌株和载体 | 第31页 |
| 2.3 载体构建和遗传转化 | 第31-33页 |
| 2.4 DNA抽提和Southern杂交 | 第33页 |
| 2.5 CRISPR植株基因型检测 | 第33-34页 |
| 2.6 RNA抽提、反转录、qRT-PCR(Quantitative reverse transcription PCR)和Northern杂交 | 第34页 |
| 2.7 基因表达谱分析 | 第34-35页 |
| 2.8 水稻材料的表型鉴定 | 第35-36页 |
| 2.8.1 苗期抗旱性鉴定 | 第35页 |
| 2.8.2 成株期抗旱性鉴定 | 第35页 |
| 2.8.3 黑暗处理 | 第35-36页 |
| 2.9 光周期处理 | 第36页 |
| 2.10 水稻离体叶片失水速率的测定 | 第36页 |
| 2.11 代谢物测定 | 第36-37页 |
| 2.12 二氨基联苯氨(3,3'-diaminobenzidine,DAB)染色和H_2O_2含量定量测定 | 第37页 |
| 2.13 扫描电镜和透射电镜观察 | 第37页 |
| 2.14 基因芯片分析 | 第37-38页 |
| 2.15 RNA-seq分析 | 第38页 |
| 2.16 水稻原生质体相关实验 | 第38-39页 |
| 2.16.1 亚细胞定位 | 第38页 |
| 2.16.2 BiFC | 第38页 |
| 2.16.3 水稻原生质体瞬时表达系统分析蛋白的转录激活活性 | 第38-39页 |
| 2.17 酵母相关实验 | 第39-40页 |
| 2.17.1 反式激活检测 | 第39页 |
| 2.17.2 酵母双杂交(Yeast two-hybrid,Y2H)文库筛选 | 第39-40页 |
| 2.17.3 点对点验证 | 第40页 |
| 2.18 蛋白抽提和Western Blot | 第40页 |
| 2.19 蛋白原核表达 | 第40-41页 |
| 2.20 染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-77页 |
| 3.1 候选基因Ghd2的表型鉴定 | 第42-47页 |
| 3.1.1 候选基因超量表达载体的构建和遗传转化 | 第42-43页 |
| 3.1.2 转基因材料的田间表型观察 | 第43-44页 |
| 3.1.3 转基因材料的表达量检测 | 第44-45页 |
| 3.1.4 转基因材料S4H的非生物逆境表型鉴定 | 第45-47页 |
| 3.2 Ghd2的功能鉴定 | 第47-77页 |
| 3.2.1 Ghd2的表达模式分析 | 第47-48页 |
| 3.2.2 Ghd2超量表达植株的干旱敏感性表型不归因于气孔 | 第48-50页 |
| 3.2.3 Ghd2超量表达植株在干旱胁迫下呈现衰老加快的特征 | 第50-52页 |
| 3.2.4 Ghd2的超量表达导致很多SAGs在干旱胁迫时上调表达 | 第52-54页 |
| 3.2.5 Ghd2-CRISPR突变体的抗旱性增强 | 第54-56页 |
| 3.2.6 Ghd2促进水稻发育过程中的叶片衰老 | 第56-58页 |
| 3.2.7 Ghd2促进黑暗处理诱导的衰老 | 第58-60页 |
| 3.2.8 Ghd2在原生质体系统中激活一些SAGs的表达 | 第60-62页 |
| 3.2.9 Ghd2的互作蛋白研究 | 第62-66页 |
| 3.2.10 Ghd2对RCA的调控 | 第66-77页 |
| 4 讨论 | 第77-85页 |
| 4.1 Ghd2在最适生长条件和干旱胁迫条件下发挥不同的功能 | 第77页 |
| 4.2 Ghd2通过促进干旱诱导的叶片衰老使植株的干旱敏感性增加 | 第77-78页 |
| 4.3 Ghd2促进发育进程中的叶片衰老 | 第78-79页 |
| 4.4 Ghd2互作蛋白可能的功能 | 第79-80页 |
| 4.5 RCA对于Ghd2行使功能的重要性 | 第80-83页 |
| 4.6 后续工作的设想 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-101页 |
| 附录 | 第101-169页 |
| 附录Ⅰ. 附图 | 第101-107页 |
| 附录Ⅱ. 附表 | 第107-158页 |
| 附录Ⅲ. 部分实验的详细操作程序 | 第158-168页 |
| 附录Ⅴ. 作者简介 | 第168-169页 |
| 致谢 | 第169-171页 |
