提要 | 第1-10页 |
第一章 前言 | 第10-44页 |
·化学生物学及超分子识别 | 第10-13页 |
·荧光标记技术在蛋白质检测中的应用 | 第13-26页 |
·荧光光谱 | 第13-15页 |
·蛋白质的内源性荧光 | 第15-17页 |
·蛋白质的荧光标记技术及新进展 | 第17-26页 |
·蛋白质荧光标记技术 | 第17-19页 |
·“识别对”荧光探针 | 第19-21页 |
·基于生物活性的荧光探针 | 第21-22页 |
·常用的荧光生色团及应用 | 第22-24页 |
·量子点(QDs) | 第24-25页 |
·荧光标记技术发展近况及展望 | 第25-26页 |
·蜂毒素 | 第26-29页 |
·蜂毒素简介 | 第26-27页 |
·蜂毒素与质膜的作用 | 第27-28页 |
·蜂毒素的生物功能 | 第28-29页 |
·蜂毒素的检测方法 | 第29页 |
·本论文的选题思路 | 第29-31页 |
参考文献 | 第31-44页 |
第二章 含芘氨基酸荧光探针对蜂毒素的识别及机理揭示 | 第44-66页 |
·引言 | 第44页 |
·材料与方法 | 第44-46页 |
·实验仪器 | 第44-45页 |
·实验药品 | 第45页 |
·样品的制备与检测 | 第45-46页 |
·结果与讨论 | 第46-61页 |
·芘丁酰基色氨酸对蜂毒素的荧光响应 | 第46-48页 |
·芘丁酰基色氨酸对蜂毒素的浓度的定量检测 | 第48页 |
·芘丁酰基色氨酸同蜂毒素的作用模式及结合比的计算 | 第48-52页 |
·酸碱度对芘丁酰基色氨酸识别蜂毒素的影响 | 第52-53页 |
·芘丁酰基色氨酸对其它蛋白质的荧光响应 | 第53-56页 |
·芘丁酰基苯丙氨酸、芘丁酰基谷氨酸和芘丁酸对蜂毒素的荧光响应 | 第56-57页 |
·蜂毒素对芘丁酰基色氨酸荧光激发光谱及紫外-可见吸收光谱的影响 | 第57页 |
·蜂毒素对芘丁酰基苯丙氨酸、芘丁酰基谷氨酸的荧光激发光谱及紫外-可见吸收光谱的影响 | 第57-59页 |
·芘丁酰基色氨酸与蜂毒素结合前后二级结构变化的圆二色谱的研究 | 第59页 |
·本章小结 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
第三章 芘丁酰基色氨酸对蜂毒素中不同肽链段的识别 | 第66-76页 |
·引言 | 第66页 |
·材料与方法 | 第66-67页 |
·实验仪器 | 第66页 |
·实验药品 | 第66页 |
·样品的制备与检测 | 第66-67页 |
·结果与讨论 | 第67-73页 |
·类蜂毒素小肽的设计、合成与表征 | 第67-69页 |
·类蜂毒素小肽与芘丁酰基色氨酸荧光探针的识别研究 | 第69-72页 |
·类蜂毒素小肽与芘丁酰基色氨酸结合前后二级结构变化的圆二色谱的研究 | 第72-73页 |
·本章小结 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-76页 |
第四章 以类蜂毒素小肽/探针识别对作为标签的融合蛋白研究 | 第76-92页 |
·引言 | 第76页 |
·实验材料 | 第76-77页 |
·质粒和菌种 | 第76页 |
·基因工程工具酶及主要化学试剂 | 第76-77页 |
·主要仪器 | 第77页 |
·试剂、溶液配制 | 第77页 |
·实验方法 | 第77-81页 |
·质粒的小量提取 | 第77页 |
·限制性内切酶的酶切 | 第77页 |
·DNA 分子的连接反应 | 第77-78页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第78页 |
·转化大肠杆菌感受态细胞 | 第78页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第78页 |
·大肠杆菌表达的预实验 | 第78-79页 |
·PCR 鉴定 | 第79页 |
·融合蛋白质大量表达 | 第79页 |
·蛋白质样品纯化前处理 | 第79-80页 |
·GST 柱亲和层析法纯化目标蛋白 | 第80页 |
·BCA 法定量检测蛋白质浓度 | 第80-81页 |
·结果与讨论 | 第81-90页 |
·大肠杆菌的偏爱密码子 | 第81-82页 |
·pGEX-6P1 的质粒图谱 | 第82-83页 |
·pGEX-6P1-mlt 质粒的构建及鉴定 | 第83-86页 |
·GST-Mlt-C-13 融合蛋白诱导温度的优化 | 第86-87页 |
·GST-Mlt-C-13 融合蛋白诱导时间的优化 | 第87-88页 |
·GST-Mlt-C-13 的大量表达及分离纯化 | 第88页 |
·GST 蛋白的大量表达及分离纯化 | 第88-89页 |
·GST 及GST-Mlt-C-13 蛋白与芘丁酰基色氨酸的识别研究. | 第89-90页 |
·本章小结 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-92页 |
第五章 芘丁酰基色氨酸对类HPV 小肽的识别研究 | 第92-102页 |
·引言 | 第92-93页 |
·材料与方法 | 第93-94页 |
·实验仪器 | 第93页 |
·实验药品 | 第93-94页 |
·样品的制备与检测 | 第94页 |
·结果与讨论 | 第94-99页 |
·类HPV16-L1/L2 小肽的设计、合成与表征 | 第94-96页 |
·类HPV16-L1/L2 小肽与芘丁酰基色氨酸的荧光识别 | 第96-98页 |
·HPV-16 L2CtW 与芘丁酰基色氨酸结合的圆二色谱的研究 | 第98-99页 |
·本章小结 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-102页 |
附录一 小肽的表征(HPLC、MS) | 第102-110页 |
附录二 HPV 几种亚型的L1、L2 蛋白的序列对比图 | 第110-112页 |
附录三 pGEX-6P1-mlt 测序结果 | 第112-113页 |
作者简历 | 第113-114页 |
博士学位论文期间发表论文及其它成果 | 第114-115页 |
致谢 | 第115-117页 |
摘要 | 第117-121页 |
Abstract | 第121-124页 |