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基于芘的蛋白质荧光探针对的构筑及应用

提要第1-10页
第一章 前言第10-44页
   ·化学生物学及超分子识别第10-13页
   ·荧光标记技术在蛋白质检测中的应用第13-26页
     ·荧光光谱第13-15页
     ·蛋白质的内源性荧光第15-17页
     ·蛋白质的荧光标记技术及新进展第17-26页
       ·蛋白质荧光标记技术第17-19页
       ·“识别对”荧光探针第19-21页
       ·基于生物活性的荧光探针第21-22页
       ·常用的荧光生色团及应用第22-24页
       ·量子点(QDs)第24-25页
       ·荧光标记技术发展近况及展望第25-26页
   ·蜂毒素第26-29页
     ·蜂毒素简介第26-27页
     ·蜂毒素与质膜的作用第27-28页
     ·蜂毒素的生物功能第28-29页
     ·蜂毒素的检测方法第29页
   ·本论文的选题思路第29-31页
 参考文献第31-44页
第二章 含芘氨基酸荧光探针对蜂毒素的识别及机理揭示第44-66页
   ·引言第44页
   ·材料与方法第44-46页
     ·实验仪器第44-45页
     ·实验药品第45页
     ·样品的制备与检测第45-46页
   ·结果与讨论第46-61页
     ·芘丁酰基色氨酸对蜂毒素的荧光响应第46-48页
     ·芘丁酰基色氨酸对蜂毒素的浓度的定量检测第48页
     ·芘丁酰基色氨酸同蜂毒素的作用模式及结合比的计算第48-52页
     ·酸碱度对芘丁酰基色氨酸识别蜂毒素的影响第52-53页
     ·芘丁酰基色氨酸对其它蛋白质的荧光响应第53-56页
     ·芘丁酰基苯丙氨酸、芘丁酰基谷氨酸和芘丁酸对蜂毒素的荧光响应第56-57页
     ·蜂毒素对芘丁酰基色氨酸荧光激发光谱及紫外-可见吸收光谱的影响第57页
     ·蜂毒素对芘丁酰基苯丙氨酸、芘丁酰基谷氨酸的荧光激发光谱及紫外-可见吸收光谱的影响第57-59页
     ·芘丁酰基色氨酸与蜂毒素结合前后二级结构变化的圆二色谱的研究第59页
     ·本章小结第59-61页
 参考文献第61-66页
第三章 芘丁酰基色氨酸对蜂毒素中不同肽链段的识别第66-76页
   ·引言第66页
   ·材料与方法第66-67页
     ·实验仪器第66页
     ·实验药品第66页
     ·样品的制备与检测第66-67页
   ·结果与讨论第67-73页
     ·类蜂毒素小肽的设计、合成与表征第67-69页
     ·类蜂毒素小肽与芘丁酰基色氨酸荧光探针的识别研究第69-72页
     ·类蜂毒素小肽与芘丁酰基色氨酸结合前后二级结构变化的圆二色谱的研究第72-73页
   ·本章小结第73-75页
 参考文献第75-76页
第四章 以类蜂毒素小肽/探针识别对作为标签的融合蛋白研究第76-92页
   ·引言第76页
   ·实验材料第76-77页
     ·质粒和菌种第76页
     ·基因工程工具酶及主要化学试剂第76-77页
     ·主要仪器第77页
     ·试剂、溶液配制第77页
   ·实验方法第77-81页
     ·质粒的小量提取第77页
     ·限制性内切酶的酶切第77页
     ·DNA 分子的连接反应第77-78页
     ·大肠杆菌感受态的制备第78页
     ·转化大肠杆菌感受态细胞第78页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第78页
     ·大肠杆菌表达的预实验第78-79页
     ·PCR 鉴定第79页
     ·融合蛋白质大量表达第79页
     ·蛋白质样品纯化前处理第79-80页
     ·GST 柱亲和层析法纯化目标蛋白第80页
     ·BCA 法定量检测蛋白质浓度第80-81页
   ·结果与讨论第81-90页
     ·大肠杆菌的偏爱密码子第81-82页
     ·pGEX-6P1 的质粒图谱第82-83页
     ·pGEX-6P1-mlt 质粒的构建及鉴定第83-86页
     ·GST-Mlt-C-13 融合蛋白诱导温度的优化第86-87页
     ·GST-Mlt-C-13 融合蛋白诱导时间的优化第87-88页
     ·GST-Mlt-C-13 的大量表达及分离纯化第88页
     ·GST 蛋白的大量表达及分离纯化第88-89页
     ·GST 及GST-Mlt-C-13 蛋白与芘丁酰基色氨酸的识别研究.第89-90页
   ·本章小结第90-91页
 参考文献第91-92页
第五章 芘丁酰基色氨酸对类HPV 小肽的识别研究第92-102页
   ·引言第92-93页
   ·材料与方法第93-94页
     ·实验仪器第93页
     ·实验药品第93-94页
     ·样品的制备与检测第94页
   ·结果与讨论第94-99页
     ·类HPV16-L1/L2 小肽的设计、合成与表征第94-96页
     ·类HPV16-L1/L2 小肽与芘丁酰基色氨酸的荧光识别第96-98页
     ·HPV-16 L2CtW 与芘丁酰基色氨酸结合的圆二色谱的研究第98-99页
   ·本章小结第99-100页
 参考文献第100-102页
附录一 小肽的表征(HPLC、MS)第102-110页
附录二 HPV 几种亚型的L1、L2 蛋白的序列对比图第110-112页
附录三 pGEX-6P1-mlt 测序结果第112-113页
作者简历第113-114页
博士学位论文期间发表论文及其它成果第114-115页
致谢第115-117页
摘要第117-121页
Abstract第121-124页

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