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一种新型日本刺沙蚕纤溶酶的分离、特性及质量标准

内容提要第1-9页
英文缩写词表第9-11页
第1章 绪 论第11-34页
 1 血栓性疾病第11页
 2 血栓形成及溶解第11-18页
   ·血液凝固第12-14页
   ·抗凝系统的作用第14-15页
   ·纤维蛋白的溶解第15-18页
 3 药物治疗血栓性疾病的现状及进展第18-26页
   ·抗血小板药物第18-19页
   ·抗凝药物第19-23页
   ·溶栓药物第23-26页
 4 潜在临床应用的溶栓药物及研究进展第26-31页
   ·人纤溶酶第27页
   ·动物来源第27-30页
   ·植物来源第30页
   ·微生物来源第30-31页
 5 日本刺沙蚕的研究概况第31-32页
 6 立题依据及意义第32-34页
   ·立题依据第32-33页
   ·研究意义第33-34页
第2章 日本刺沙蚕纤溶酶的分离纯化研究第34-58页
 1 材料与方法第34-43页
   ·材料第34-36页
     ·日本刺沙蚕(Neanthes japonica (Iznka))第34页
     ·主要仪器设备第34-35页
     ·主要材料与试剂第35-36页
   ·方法第36-43页
     ·蛋白浓度测定第36-37页
     ·蛋白酶活性测定第37页
     ·纤溶活性测定第37-38页
     ·日本刺沙蚕纤溶酶的分离纯化第38-40页
     ·各步纯化产物的纯度检测第40-43页
 2 结果与分析第43-53页
   ·日本刺沙蚕纤溶酶的分离纯化第43-47页
     ·酶的初提和制备第43-44页
     ·硫酸铵分级盐析第44-45页
     ·柱层析纯化第45-47页
     ·纤溶酶活性回收率的测定第47页
   ·各分离步骤的纤溶酶纯度鉴定第47-53页
     ·常规PAGE电泳检测第47-49页
     ·SDS-PAGE电泳检测第49-51页
     ·高效液相凝胶过滤色谱法(HPLC gel-filtration)分析第51-53页
 3 讨论第53-57页
   ·日本刺沙蚕纤溶酶的分离纯化工艺的建立第53-55页
     ·酶的初提第53-54页
     ·硫酸铵分级盐析第54页
     ·柱层析第54-55页
   ·纯度检测方法的应用第55-56页
   ·日本刺沙蚕体内纤溶酶的含量丰富,含有多种不同的纤溶酶第56-57页
 4 小结第57-58页
第3章 日本刺沙蚕纤溶酶的分子特性与酶学性质研究第58-86页
 1 材料与方法第58-67页
   ·材料第58-60页
     ·日本刺沙蚕纤溶酶第58页
     ·主要仪器设备第58-59页
     ·主要材料与试剂第59-60页
   ·方法第60-67页
     ·分子量的测定第60-61页
     ·等电点的测定第61-62页
     ·日本刺沙蚕纤溶酶的氨基酸序列分析第62-64页
     ·酶抑制剂对酶活性的影响第64-65页
     ·金属离子对酶活性的影响第65页
     ·温度对酶活性的影响第65页
     ·pH对酶活性的影响第65页
     ·底物浓度对酶反应速度的影响及动力学参数测定第65-66页
     ·特异性底物的研究第66页
     ·激酶活性检测第66页
     ·纤维蛋白原水解活性分析第66-67页
 2 结果与分析第67-81页
   ·分子量第67-68页
   ·日本刺沙蚕纤溶酶的等电点第68-69页
   ·氨基酸序列分析第69-74页
     ·N端氨基酸序列分析第69-72页
     ·De Novo测序第72-74页
   ·酶抑制剂对酶活性的影响第74-75页
   ·金属离子对酶活性的影响第75页
   ·温度对酶活性的影响第75-76页
   ·pH对酶活性的影响第76-77页
   ·底物浓度对酶反应速度的影响及动力学参数测定第77-78页
   ·特异性底物的研究第78页
   ·激酶活性检测第78-80页
   ·纤维蛋白原水解活性分析第80-81页
 3 讨论第81-84页
   ·日本刺沙蚕纤溶酶的分子特性第81-82页
   ·日本刺沙蚕纤溶酶的酶学性质第82-84页
 4 小结第84-86页
第4章 日本刺沙蚕纤溶酶的质量标准第86-97页
 1 材料与方法第86-90页
   ·材料第86-87页
     ·日本刺沙蚕纤溶酶第86页
     ·实验动物第86页
     ·主要仪器设备第86页
     ·主要材料与试剂第86-87页
   ·方法第87-90页
     ·蛋白质含量测定第87-88页
     ·纯度分析第88页
     ·细菌内毒素检测第88-89页
     ·家兔法热原检测第89-90页
     ·比活力测定第90页
 2 结果与分析第90-94页
   ·纯度分析第90-92页
   ·细菌内毒素的检测第92页
   ·热原检测第92-93页
   ·比活力测定第93-94页
 3 讨论第94-96页
   ·日本刺沙蚕纤溶酶的纯度第94-95页
   ·细菌内毒素和热原的检测第95-96页
   ·比活力测定第96页
 4 小结第96-97页
结论第97-99页
 1 本项目研究的主要结论第97页
 2 本研究创新性第97-98页
 3 本研究的不足及今后研究方向第98-99页
参考文献第99-113页
攻读博士学位期间已发表的学术论文第113-114页
致谢第114-115页
中文摘要第115-118页
Abstract第118-121页

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