| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 文献综述 | 第15-36页 |
| 第一章 捻转血矛线虫和捻转血矛线虫病 | 第16-20页 |
| 1 病原形态结构 | 第16页 |
| 2 生活史 | 第16页 |
| 3 流行病学 | 第16-17页 |
| 4 临床症状和病理变化 | 第17页 |
| 5 防治进展 | 第17-19页 |
| ·化学药物研究进展 | 第17-18页 |
| ·生物防治研究进展 | 第18页 |
| ·捻转血矛线虫疫苗研究进展 | 第18-19页 |
| 6 小结 | 第19-20页 |
| 第二章 捻转血矛线虫天然抗原的研究现状及其对宿主的免疫调制作用 | 第20-28页 |
| 1 捻转血矛线虫天然抗原研究进展 | 第20-23页 |
| ·三期幼虫表面抗原(Hc.sL3) | 第20页 |
| ·成虫15和24kDa分泌排泄抗原(ES15/24) | 第20-21页 |
| ·成虫66 kDa ES抗原 | 第21页 |
| ·肠表面膜蛋白p46,p52 | 第21-22页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶 | 第22页 |
| ·gp55 | 第22-23页 |
| ·其他 | 第23页 |
| 2 捻转血矛线虫的分泌排泄产物 | 第23-24页 |
| 3 分泌排泄抗原对宿主的免疫调制作用 | 第24页 |
| 4 蠕虫分泌产物的分子和免疫功能分析 | 第24-26页 |
| ·吸虫:曼蚊属和肝片吸虫(Trematodes:S.mansoni and Fasciola hepatica) | 第24-25页 |
| ·丝虫:马来布鲁线虫(B.malayi) | 第25页 |
| ·人类和犬科钩虫:犬钩(口线)虫和美洲板口线虫(Ancylostoma caninum and Necator americanus) | 第25页 |
| ·反刍动物毛圆线虫:捻转血矛线虫(Haemonchus contortus) | 第25-26页 |
| ·犬弓首蛔虫和旋毛(线)虫(Toxocara canis and Trichinella spiralis) | 第26页 |
| ·绦虫属和棘球绦虫(Taenia andEchinococcus) | 第26页 |
| 5 ES抗原在捻转血矛线虫病疫苗研制中的作用 | 第26-27页 |
| 6 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 秀丽隐杆线虫在寄生性线虫抗原研究中的应用 | 第28-36页 |
| 1 秀丽隐杆线虫简介 | 第28-29页 |
| ·秀丽隐杆线虫生物学特征 | 第28页 |
| ·生命周期 | 第28-29页 |
| ·细胞学特征 | 第29页 |
| ·应用价值 | 第29页 |
| 2 秀丽隐杆线虫在寄生性线虫基因功能研究中的应用 | 第29-32页 |
| ·利用RNA干涉进行基因功能分析 | 第29-30页 |
| ·表达序列标签法(EST) | 第30-31页 |
| ·秀丽隐杆线虫在寄生性线虫抗药性研究中的应用 | 第31页 |
| ·秀丽隐杆线虫在寄生虫酶活性研究中的应用 | 第31-32页 |
| ·秀丽隐杆线虫在寄生虫蛋白酶抑制剂功能研究中的应用 | 第32页 |
| 3 利用秀丽隐杆线虫表达寄生性线虫疫苗候选抗原的转基因研究 | 第32-35页 |
| ·秀丽隐杆线虫作为表达系统的优势 | 第33页 |
| ·秀丽隐杆线虫在寄生性线虫疫苗候选抗原基因表达中的应用 | 第33-35页 |
| 4 小结 | 第35-36页 |
| 研究内容 | 第36-96页 |
| 第一章 利用秀丽隐杆线虫表达ES蛋白的启动子筛选 | 第37-53页 |
| 1 材料和方法 | 第38-45页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·试验方法 | 第39-45页 |
| 2 结果 | 第45-52页 |
| ·候选基因5’侧翼区序列主要启动子基序分析 | 第45-48页 |
| ·阳性克隆的筛选及鉴定 | 第48页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第48-49页 |
| ·转基因线虫后代的荧光观察 | 第49-52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 第二章 利用秀丽隐杆线虫表达捻转血矛线虫分泌排泄抗原ES24的转基因研究 | 第53-71页 |
| 1 材料和方法 | 第54-62页 |
| ·主要材料和试剂 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-62页 |
| 2 结果 | 第62-69页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第62-63页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第63页 |
| ·测序结果 | 第63-64页 |
| ·cpr1-ES24-pPD-95.77真核表达载体的鉴定 | 第64-65页 |
| ·cpr-1核心启动子转录的ES24基因在C.elegans体内的表达 | 第65页 |
| ·转基因C.elegans单虫PCR检测结果 | 第65-66页 |
| ·ES24转基因虫株的RT-PCR分析 | 第66-67页 |
| ·western-blot分析Es24在C.elegans体内的表达情况结果 | 第67页 |
| ·生物信息学角度分析ES24抗原难以在C.elegans体内表达的原因 | 第67-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 第三章 利用秀丽隐杆线虫表达捻转血矛线虫分泌排泄抗原ES15的转基因研究 | 第71-84页 |
| 1 材料和方法 | 第72-75页 |
| ·主要材料和试剂 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-75页 |
| 2 结果 | 第75-83页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第75-76页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第76-77页 |
| ·测序结果 | 第77页 |
| ·cpr1-ES15-pPD-95.77真核表达载体的鉴定 | 第77-78页 |
| ·cpr-1核心启动子转录的ES15基因在C.elegans体内的表达 | 第78-81页 |
| ·转基因C.elegans单虫PCR检测结果 | 第81页 |
| ·转基因虫株的RT-PCR分析 | 第81-82页 |
| ·Western-blot分析ES15在C. elegans体内的表达情况结果 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-84页 |
| 第四章 利用秀丽隐杆线虫表达ES15重组蛋白的纯化研究 | 第84-96页 |
| 1 材料和方法 | 第85-88页 |
| ·主要材料和试剂 | 第85-86页 |
| ·实验方法 | 第86-88页 |
| 2 结果 | 第88-94页 |
| ·cpr-ES15N-His-pPD95.77/cpr-ES15C-His-pPD95.77重组载体的鉴定 | 第88-89页 |
| ·改造后的ES15基因在C.elegans体内的荧光表达情况 | 第89-91页 |
| ·携带有His标签的转基因C.elegans单虫PCR检测结果 | 第91页 |
| ·RT-PCR鉴定结果 | 第91-92页 |
| ·转基因蛋白的Western-Blot分析 | 第92-93页 |
| ·利用镍琼脂糖凝胶柱纯化转基因蛋白的尝试 | 第93-94页 |
| 3 讨论 | 第94-96页 |
| 结论 | 第96-97页 |
| 附录1 溶液配制 | 第97-99页 |
| 附录2 英文缩写注释 | 第99-100页 |
| 攻读硕士学位期间的主要成果 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
