摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-18页 |
1. 仔猪腹泻对养猪业的影响 | 第11页 |
2. 主要产肠毒素性大肠杆菌病的致病机理 | 第11-12页 |
3. MUC4及MUC13基因的研究进展 | 第12-14页 |
4. 一般抗病力的评价指标 | 第14-16页 |
5. 苏太猪产肠毒素性大肠杆菌F18抗性与敏感型个体的筛选 | 第16页 |
6. 梅山猪产肠毒素性大肠杆菌F18抗性与敏感型资源群体的制备 | 第16-17页 |
7. 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
第二章 猪MUC4基因第17内含子243位点的遗传效应分析 | 第18-37页 |
1. 试验材料 | 第18-21页 |
1.1 试验动物 | 第18-19页 |
1.2 主要仪器 | 第19页 |
1.3 主要试剂 | 第19-20页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第20-21页 |
2. 试验方法 | 第21-27页 |
2.1 基因多态性分析 | 第21-23页 |
2.1.1 DNA提取方法 | 第21-22页 |
2.1.2 引物设计 | 第22页 |
2.1.3 PCR扩增 | 第22页 |
2.1.4 琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 | 第22-23页 |
2.1.5 酶切反应体系 | 第23页 |
2.1.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23页 |
2.1.7 PCR产物测序 | 第23页 |
2.2 基因表达分析 | 第23-25页 |
2.2.1 提取RNA的前期准备工作 | 第23-24页 |
2.2.2 采用Trizol法提取组织总RNA | 第24页 |
2.2.3 RNA甲醛变性电泳检测 | 第24-25页 |
2.2.4 总RNA反转录为cDNA | 第25页 |
2.2.5 目的基因和内参基因引物PCR检测 | 第25页 |
2.2.6 实时荧光定量PCR | 第25页 |
2.3 细胞因子的测定 | 第25-27页 |
2.3.1 样本的采集与血清的分离 | 第25-26页 |
2.3.2 操作流程 | 第26-27页 |
2.4 生产性状及繁殖性能的测定 | 第27页 |
2.5 统计分析 | 第27页 |
3. 结果与分析 | 第27-34页 |
3.1 PCR引物的扩增效果检测 | 第27-28页 |
3.2 MUC4基因第17内含子多态性PCR-RFLP分析 | 第28页 |
3.3 序列分析结果 | 第28-29页 |
3.4 大白猪MUC4基因第17内含子基因型及等位基因频率分析 | 第29页 |
3.5 大白猪MUC4基因第17内含子多态性与部分细胞因子水平的关联分析 | 第29页 |
3.6 大白猪MUC4基因第17内含子多态性与生产性状以及不同胎次繁殖性能的关系 | 第29-30页 |
3.7 总RNA纯度与完整性 | 第30-31页 |
3.8 实时荧光定量引物常规PCR检测结果 | 第31页 |
3.9 实时荧光定量PCR的溶解曲线 | 第31-32页 |
3.10 大白猪MUC4基因第17内含子A243G位点3种基因型个体间的表达规律 | 第32页 |
3.11 苏太猪MUC4基因不同发育时期个体间的表达分析 | 第32-33页 |
3.12 苏太猪抗性与敏感型个体间MUC4基因的表达分析 | 第33-34页 |
3.13 梅山猪抗性与敏感型个体间MUC4基因的表达分析 | 第34页 |
4. 讨论 | 第34-37页 |
第三章 猪MUC13基因第2内含子插入突变的遗传效应分析 | 第37-46页 |
1. 试验材料 | 第37页 |
2. 试验方法 | 第37页 |
2.1 引物设计 | 第37页 |
2.2 PCR扩增 | 第37页 |
3. 结果与分析 | 第37-43页 |
3.1 PCR产物直接电泳分析 | 第37-38页 |
3.2 大白猪MUC13基因第2内含子基因型及等位基因频率分析 | 第38页 |
3.3 大白猪MUC13基因第2内含子多态性与免疫指标的关系 | 第38-39页 |
3.4 大白猪MUC13基因第2内含子多态性与生产性状以及不同胎次繁殖性能的关系 | 第39-40页 |
3.5 总RNA纯度与完整性 | 第40页 |
3.6 实时荧光定量引物常规PCR检测结果 | 第40页 |
3.7 实时荧光定量PCR的溶解曲线 | 第40-41页 |
3.8 大白猪MUC13第2内含子插入缺失突变3种基因型个体间的表达规律 | 第41页 |
3.9 苏太猪MUC13基因不同发育时期不同组织的表达分析 | 第41-42页 |
3.10 苏太猪抗性与敏感型个体间MUC13基因的表达分析 | 第42-43页 |
3.11 梅山猪抗性与敏感型个体间MUC13基因的表达分析 | 第43页 |
4. 讨论 | 第43-46页 |
全文结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
攻读学位期间发表学术论文 | 第56-57页 |