首页--农业科学论文--畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂论文--家畜论文--牛论文

METTL3调节奶牛乳腺乳蛋白和乳脂肪合成的分子机制

摘要第10-11页
英文摘要第11-12页
1 前言第13-19页
    1.1 奶牛乳腺发育与泌乳第13-15页
        1.1.1 乳蛋白和乳脂肪的合成代谢第13-14页
        1.1.2 奶牛乳蛋白和乳脂肪合成主要信号转导途径研究第14-15页
    1.2 RNAN~6-甲基腺苷(m~6A)研究进展第15-16页
        1.2.1 M~6A甲基化概述第15页
        1.2.2 M~6A功能的研究第15-16页
    1.3 METTL3的研究进展第16-17页
        1.3.1 METTL3概述第16页
        1.3.2 METTL3生物学功能研究第16-17页
    1.4 氨酰tRNA合成酶的相关研究第17页
        1.4.1 氨酰tRNA合成酶的结构与功能第17页
        1.4.2 甘氨酰tRNA合成酶的相关研究第17页
    1.5 实验目的与意义第17-19页
2 材料与方法第19-37页
    2.1 实验材料第19-22页
        2.1.1 主要实验试剂第19-20页
        2.1.2 主要实验仪器第20页
        2.1.3 实验动物与细胞第20页
        2.1.4 试剂的配制第20-22页
    2.2 奶牛乳腺上皮细胞的培养纯化与鉴定第22-25页
        2.2.1 奶牛乳腺上皮细胞的原代培养与纯化第22-23页
        2.2.2 奶牛乳腺上皮细胞的鉴定第23-25页
        2.2.3 奶牛乳腺上皮细胞的冻存第25页
    2.3 METTL3对BMECs乳蛋白及乳脂肪合成的影响第25-29页
        2.3.1 METTL3过表达对BMECs乳蛋白及乳脂肪合成的影响第25-29页
        2.3.2 METTL3抑制对BMECs乳蛋白及乳脂肪的影响第29页
    2.4 METTL3对BMECs中mRNAm~6A水平的影响第29-32页
        2.4.1 METTL3过表达对BMECs中mRNAm~6A水平的影响第29-30页
        2.4.2 METTL3抑制对BMECs中mRNAm~6A水平的影响第30页
        2.4.3 METTL3对其靶基因mRNAm~6A水平的影响第30-32页
    2.5 p-GlyRs与METTL3相互作用的机理研究第32-33页
        2.5.1 激光共聚焦共定位分析p-GlyRs与METTL3的相互作用第32页
        2.5.2 FRET验证p-GlyRs与METTL3的相互作用第32-33页
    2.6 GlyRS对METTL3的体外激活第33-36页
        2.6.1 METTL3的原核表达与纯化第33-34页
        2.6.2 体外激酶实验检测p-GlyRS对METTL3的磷酸化作用第34-36页
    2.7 数据分析第36-37页
3 结果与分析第37-52页
    3.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养与鉴定第37-39页
        3.1.1 奶牛乳腺上皮细胞的原代培养与纯化第37-38页
        3.1.2 奶牛乳腺上皮细胞的鉴定第38-39页
    3.2 METTL3过表达对BMECs乳蛋白及乳脂肪合成的影响第39-42页
        3.2.1 METTL3过表达载体的构建第39-40页
        3.2.2 METTL3过表达对BMECs乳蛋白相关蛋白表达变化第40-41页
        3.2.3 METTL3过表达对BMECs乳脂肪合成的影响第41-42页
    3.3 METTL3抑制对BMECs乳蛋白及乳脂肪合成的影响第42-44页
        3.3.1 METTL3干扰片段的转染第42页
        3.3.2 METTL3抑制对BMECs乳合成相关蛋白表达变化第42-43页
        3.3.3 METTL3抑制对BMECs乳脂肪合成的影响第43-44页
    3.4 METTL3对BMECs中mRNAm~6A水平的影响第44-45页
        3.4.1 METTL3过表达对BMECs中mRNAm~6A水平的影响第44页
        3.4.2 METTL3抑制对BMECs中mRNAm~6A水平的影响第44-45页
        3.4.3 METTL3对其靶基因mRNAm~6A水平的影响第45页
    3.5 p-GlyRS与METTL3相互作用的研究第45-48页
        3.5.1 相关载体的构建第45-46页
        3.5.2 METTL3基因在乳腺上皮细胞中的定位第46页
        3.5.3 激光共聚焦共定位分析p-GlyRS与METTL3的相互作用第46-47页
        3.5.4 FRET验证p-GlyRS与METTL3的相互作用第47-48页
    3.6 p-GlyRS对METTL3的体外激活第48-52页
        3.6.1 METTL3的原核表达与纯化第48-50页
        3.6.2 体外激酶实验检测p-GlyRS对METTL3的磷酸化作用第50-52页
4 讨论第52-56页
    4.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养与鉴定第52页
    4.2 METTL3对乳蛋白及乳脂肪合成的影响及其机理第52-53页
        4.2.1 METTL3对乳蛋白及乳脂肪合成的影响第52-53页
        4.2.2 METTL3对BMECs中mRNAm~6A水平的影响第53页
    4.3 p-GlyRS调节METTL3的分子机理第53-55页
        4.3.1 p-GlyRS与METTL3的相互作用第53页
        4.3.2 纯化后的p-GlyRS蛋白与METTL3激酶反应第53-55页
    4.4 蛋氨酸、雌激素对METTL3的调节作用第55-56页
5 结论第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-65页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第65页

论文共65页,点击 下载论文
上一篇:镉对蛋鸡生产性能和卵巢的影响及硒对镉的缓解作用
下一篇:GlyRS及其下游蛋白NFκB1和METTL3对牛乳腺上皮细胞自噬的调控作用