摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
引言 | 第10-12页 |
第一章 文献研究 | 第12-20页 |
1.1 肿瘤体外药敏检测 | 第12-13页 |
1.2 荧光素与荧光素酶 | 第13-16页 |
1.2.1 虫荧光素的结构与功能 | 第13-14页 |
1.2.2 荧光素酶的结构 | 第14-15页 |
1.2.3 萤火虫荧光素酶的应用 | 第15-16页 |
1.3 细胞穿膜肽 | 第16-19页 |
1.3.1 细胞穿膜肽的简介 | 第16页 |
1.3.2 细胞穿膜肽TAT的穿膜机制 | 第16-17页 |
1.3.3 细胞穿膜肽TAT递送活性物质的研究进展 | 第17-19页 |
1.4 小结与展望 | 第19-20页 |
第二章 穿膜肽标记的荧光素酶载体的构建及在大肠杆菌中的表达 | 第20-31页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 材料与方法 | 第20-25页 |
2.2.1 菌株与质粒 | 第20-21页 |
2.2.2 引物与工具酶及试剂盒 | 第21页 |
2.2.3 主要仪器及设备 | 第21页 |
2.2.4 细菌培养及电泳相关试剂 | 第21-22页 |
2.2.5 穿膜肽标记的荧光素酶载体的构建 | 第22-24页 |
2.2.6 重组蛋白表达方式 | 第24-25页 |
2.2.7 诱导表达条件的优化 | 第25页 |
2.3 结果与讨论 | 第25-30页 |
2.3.1 TAT-LUCPCR扩增 | 第25-26页 |
2.3.2 重组质粒pET28a-TAT-LUC的构建及表达 | 第26-28页 |
2.3.3 不同诱导表达条件对TAT-LUC表达量和活性的影响 | 第28-30页 |
2.4 本章小结 | 第30-31页 |
第三章 穿膜肽标记的荧光素酶的纯化及其活性验证 | 第31-36页 |
3.1 引言 | 第31页 |
3.2 材料与方法 | 第31-33页 |
3.2.1 主要试剂及溶液 | 第31页 |
3.2.2 主要仪器 | 第31-32页 |
3.2.3 穿膜肽标记的荧光素酶的纯化 | 第32页 |
3.2.4 蛋白浓度测定 | 第32页 |
3.2.5 穿膜肽标记的荧光素酶活性的测定 | 第32-33页 |
3.3 结果与讨论 | 第33-35页 |
3.3.1 穿膜肽标记的荧光素酶的纯化 | 第33页 |
3.3.2 TAT-LUC蛋白浓度的测定 | 第33-34页 |
3.3.3 穿膜肽标记的荧光素酶活力的鉴定 | 第34-35页 |
3.4 本章小结 | 第35-36页 |
第四章 穿膜肽标记的荧光素酶的肿瘤细胞荧光药敏检测 | 第36-43页 |
4.1 引言 | 第36页 |
4.2 材料方法 | 第36-39页 |
4.2.1 细胞株 | 第36页 |
4.2.2 培养基及主要试剂 | 第36页 |
4.2.3 主要仪器 | 第36页 |
4.2.4 化疗药物 | 第36-37页 |
4.2.5 细胞培养及细胞传代、计数、冻存与复苏 | 第37-38页 |
4.2.6 肿瘤细胞药敏检测 | 第38-39页 |
4.2.7 结果评估 | 第39页 |
4.3 结果与讨论 | 第39-42页 |
4.3.1 肿瘤细胞的化疗药物灵敏度指数 | 第40页 |
4.3.2 肿瘤细胞的化疗药物敏感性 | 第40-42页 |
4.4 本章小结 | 第42-43页 |
结语 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
附录 | 第50-52页 |
在校期间发表论文情况 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
附件 | 第54页 |