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穿膜肽标记的荧光素酶的构建及其在肿瘤体外药敏检测中的应用

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
引言第10-12页
第一章 文献研究第12-20页
    1.1 肿瘤体外药敏检测第12-13页
    1.2 荧光素与荧光素酶第13-16页
        1.2.1 虫荧光素的结构与功能第13-14页
        1.2.2 荧光素酶的结构第14-15页
        1.2.3 萤火虫荧光素酶的应用第15-16页
    1.3 细胞穿膜肽第16-19页
        1.3.1 细胞穿膜肽的简介第16页
        1.3.2 细胞穿膜肽TAT的穿膜机制第16-17页
        1.3.3 细胞穿膜肽TAT递送活性物质的研究进展第17-19页
    1.4 小结与展望第19-20页
第二章 穿膜肽标记的荧光素酶载体的构建及在大肠杆菌中的表达第20-31页
    2.1 引言第20页
    2.2 材料与方法第20-25页
        2.2.1 菌株与质粒第20-21页
        2.2.2 引物与工具酶及试剂盒第21页
        2.2.3 主要仪器及设备第21页
        2.2.4 细菌培养及电泳相关试剂第21-22页
        2.2.5 穿膜肽标记的荧光素酶载体的构建第22-24页
        2.2.6 重组蛋白表达方式第24-25页
        2.2.7 诱导表达条件的优化第25页
    2.3 结果与讨论第25-30页
        2.3.1 TAT-LUCPCR扩增第25-26页
        2.3.2 重组质粒pET28a-TAT-LUC的构建及表达第26-28页
        2.3.3 不同诱导表达条件对TAT-LUC表达量和活性的影响第28-30页
    2.4 本章小结第30-31页
第三章 穿膜肽标记的荧光素酶的纯化及其活性验证第31-36页
    3.1 引言第31页
    3.2 材料与方法第31-33页
        3.2.1 主要试剂及溶液第31页
        3.2.2 主要仪器第31-32页
        3.2.3 穿膜肽标记的荧光素酶的纯化第32页
        3.2.4 蛋白浓度测定第32页
        3.2.5 穿膜肽标记的荧光素酶活性的测定第32-33页
    3.3 结果与讨论第33-35页
        3.3.1 穿膜肽标记的荧光素酶的纯化第33页
        3.3.2 TAT-LUC蛋白浓度的测定第33-34页
        3.3.3 穿膜肽标记的荧光素酶活力的鉴定第34-35页
    3.4 本章小结第35-36页
第四章 穿膜肽标记的荧光素酶的肿瘤细胞荧光药敏检测第36-43页
    4.1 引言第36页
    4.2 材料方法第36-39页
        4.2.1 细胞株第36页
        4.2.2 培养基及主要试剂第36页
        4.2.3 主要仪器第36页
        4.2.4 化疗药物第36-37页
        4.2.5 细胞培养及细胞传代、计数、冻存与复苏第37-38页
        4.2.6 肿瘤细胞药敏检测第38-39页
        4.2.7 结果评估第39页
    4.3 结果与讨论第39-42页
        4.3.1 肿瘤细胞的化疗药物灵敏度指数第40页
        4.3.2 肿瘤细胞的化疗药物敏感性第40-42页
    4.4 本章小结第42-43页
结语第43-44页
参考文献第44-50页
附录第50-52页
在校期间发表论文情况第52-53页
致谢第53-54页
附件第54页

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