| 摘要 | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第7-13页 |
| 1 CTCF的结构与功能的研究 | 第7-11页 |
| 1.1 CTCF的结构 | 第7页 |
| 1.2 CTCF的功能研究 | 第7-11页 |
| 2 CTCF结合motif的研究 | 第11-13页 |
| 第二章 GST-CTCF-ZFs表达载体的构建及融合蛋白诱导表达与纯化 | 第13-25页 |
| 1 试验材料 | 第13-14页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第13页 |
| 1.2 主要试剂及试剂盒 | 第13页 |
| 1.3 主要设备 | 第13-14页 |
| 2 试验方法 | 第14-21页 |
| 2.1 pGEX-4T-2-CTCF-ZFs原核表达载体的构建 | 第14-17页 |
| 2.2 pFlag-CMV-4载体的构建 | 第17-18页 |
| 2.3 GST-CTCF-ZFs原核表达及诱导条件优化 | 第18-20页 |
| 2.4 GST标签融合蛋白纯化 | 第20-21页 |
| 3 试验结果 | 第21-25页 |
| 3.1 pGEX-4T-2-CTCF-ZFs融合蛋白表达载体载体构建成功 | 第21-22页 |
| 3.2 蛋白诱导和条件优化 | 第22页 |
| 3.3 蛋白纯化和定量 | 第22-25页 |
| 第三章 M1和M2与CTCF结合能力对比及关键结合位点的定位 | 第25-43页 |
| 1 材料与方法设备 | 第25页 |
| 1.1 主要试剂和试剂盒 | 第25页 |
| 1.2 主要设备 | 第25页 |
| 2 试验方法 | 第25-31页 |
| 2.1 EMSA探针3'末端标记生物素 | 第25-27页 |
| 2.2 凝胶阻滞实验(EMSA) | 第27-29页 |
| 2.3 细胞培养 | 第29页 |
| 2.4 PEI转染 | 第29-30页 |
| 2.5 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第30-31页 |
| 3 试验结果 | 第31-43页 |
| 3.1 CTCF与M1的结合能力强于M2 | 第31-36页 |
| 3.2 M1和M2关键结合位点的定位 | 第36-43页 |
| 第四章 讨论 | 第43-46页 |
| 1 M1和M2核心序列两侧的序列有助于结合 | 第43-44页 |
| 2 M1、M2位点突变与疾病 | 第44-46页 |
| 第五章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| Abstract | 第52页 |
| 硕士期间科研成果 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
