| 中文摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写词表 | 第12-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 酸性土壤和植物Al毒害 | 第13-14页 |
| 1.1.1 酸性土壤 | 第13页 |
| 1.1.2 植物的Al毒害 | 第13-14页 |
| 1.2 植物的耐Al机制 | 第14-15页 |
| 1.2.1 内部忍耐机制 | 第14页 |
| 1.2.2 外部排斥机制 | 第14-15页 |
| 1.3 植物重要抗Al基因/蛋白介绍 | 第15-16页 |
| 1.4 泛素蛋白酶体途径及其参与的植物逆境调控 | 第16-20页 |
| 1.4.1 泛素途径组成元件 | 第16-18页 |
| 1.4.2 泛素化反应机制 | 第18-19页 |
| 1.4.3 泛素连接酶E3参与植物逆境响应 | 第19-20页 |
| 1.5 大豆抗Al机制研究进展 | 第20-23页 |
| 1.6 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第2章 大豆GmUPL1和GmUPL2基因的生物信息学及表达模式分析 | 第24-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 实验材料及所用菌种、载体 | 第24页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第24页 |
| 2.1.4 实验软件 | 第24页 |
| 2.1.5 营养液配制 | 第24-25页 |
| 2.2 研究方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1 GmUPL1和GmUPL2基因的生物信息学分析 | 第25页 |
| 2.2.2 大豆培养 | 第25-26页 |
| 2.2.3 大豆根尖RNA提取 | 第26页 |
| 2.2.4 cDNA第一条链合成 | 第26-27页 |
| 2.2.5 设计实时荧光定量PCR引物 | 第27-28页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR扩增 | 第28页 |
| 2.2.7 GmUPL1和GmUPL2基因的亚细胞定位 | 第28-30页 |
| 2.2.8 原生质体转化及观察 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 2.3.1 GmUPL1和GmUPL2基因序列及蛋白基本性质分析 | 第30-31页 |
| 2.3.2 GmUPL1和GmUPL2编码蛋白功能结构预测 | 第31页 |
| 2.3.3 GmUPL1和GmUPL2基因进化树分析 | 第31-32页 |
| 2.3.4 GmUPL1和GmUPL2基因同源性分析 | 第32-33页 |
| 2.3.6 GmUPL1和GmUPL2基因表达模式分析 | 第33-35页 |
| 2.3.7 GmUPL1和GmUPL2基因亚细胞定位 | 第35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-38页 |
| 第3章 GmUPL1和GmUPL2基因的克隆及其对拟南芥与大豆发根中的超表达 | 第38-60页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 验材料及所用菌种、载体 | 第38页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第38页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第38-39页 |
| 3.2 研究方法 | 第39-50页 |
| 3.2.1 基因克隆 | 第39-40页 |
| 3.2.2 大豆培养 | 第40页 |
| 3.2.3 PCR扩增体系 | 第40-41页 |
| 3.2.4 目的基因片段回收 | 第41页 |
| 3.2.5 载体构建及线性化 | 第41-43页 |
| 3.2.6 目的基因与载体连接 | 第43-44页 |
| 3.2.7 热激转化DH5α感受态细胞 | 第44页 |
| 3.2.8 菌液PCR与测序 | 第44-45页 |
| 3.2.9 拟南芥培养 | 第45页 |
| 3.2.10 质粒提取 | 第45-46页 |
| 3.2.11 电击转化农杆菌AgL | 第46页 |
| 3.2.12 大豆培养 | 第46页 |
| 3.2.13 质粒提取与发根农杆菌K599转化 | 第46页 |
| 3.2.14 大豆发根制备 | 第46-47页 |
| 3.2.15 苏木精染色 | 第47页 |
| 3.2.16 相关耐Al基因实时定量荧光PCR | 第47-48页 |
| 3.2.17 农杆菌花粉杆法侵染拟南芥 | 第48页 |
| 3.2.18 转基因拟南芥筛选 | 第48-49页 |
| 3.2.19 T3代拟南芥过表达植株Al胁迫下表型分析 | 第49页 |
| 3.2.20 T3代拟南芥过表达植株盐胁迫及甘露醇胁迫下表型分析 | 第49-50页 |
| 3.4 结果与分析 | 第50-57页 |
| 3.4.1 大豆GmUPL1和GmUPL2基因的克隆 | 第50页 |
| 3.4.2 目的基因PCR | 第50-51页 |
| 3.4.3 载体线性化 | 第51页 |
| 3.4.4 菌液PCR验证阳性克隆及基因测序 | 第51-52页 |
| 3.4.5 质粒转化农杆菌菌液PCR | 第52-53页 |
| 3.4.6 GmUPL1和GmUPL2大豆发根转化及相关实验 | 第53-56页 |
| 3.4.7 GmUPL2异源表达拟南芥表型分析 | 第56页 |
| 3.4.8 甘露醇胁迫与盐胁迫 | 第56-57页 |
| 3.5 讨论 | 第57-60页 |
| 第四章 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 作者简介 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
