| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 第1章 前言 | 第8-20页 |
| 1.1 神经干细胞简介 | 第8-9页 |
| 1.2 成年哺乳动物大脑中静息态和激活态的神经干细胞 | 第9-12页 |
| 1.2.1 海马中静息态和激活态的神经干细胞 | 第9-10页 |
| 1.2.2 侧脑室室管膜下区中静息态和激活态的神经干细胞 | 第10-11页 |
| 1.2.3 嗅球上皮中静息态和激活态的神经干细胞 | 第11页 |
| 1.2.4 第四脑室中静息态和激活态的神经干细胞 | 第11-12页 |
| 1.3 静息态神经干细胞激活的调控 | 第12-14页 |
| 1.3.1 肿瘤基因对NSC激活的调控 | 第12页 |
| 1.3.2 表观遗传修饰对NSC激活的调节 | 第12-13页 |
| 1.3.3 微环境对NSCs激活的影响 | 第13-14页 |
| 1.4 CD133简介 | 第14-15页 |
| 1.4.1 CD133、AC133和Prominin1的来源 | 第14页 |
| 1.4.2 CD133的结构 | 第14-15页 |
| 1.4.3 CD133的功能 | 第15页 |
| 1.5 Cre/loxP重组系统 | 第15-18页 |
| 1.5.1 Cre/loxP系统的基本原理 | 第15-16页 |
| 1.5.2 Cre/loxP系统诱导基因重组的方式 | 第16-17页 |
| 1.5.3 Cre/loxP系统的优点 | 第17页 |
| 1.5.4 他莫昔芬诱导Cre/loxP系统基因敲出 | 第17-18页 |
| 1.6 脑损伤 | 第18页 |
| 1.7 本文研究意义 | 第18-20页 |
| 第2章 实验设备与试剂耗材 | 第20-25页 |
| 2.1 实验设备 | 第20-21页 |
| 2.2 试剂耗材 | 第21-22页 |
| 2.3 实验抗体信息 | 第22页 |
| 2.4 引物信息 | 第22-23页 |
| 2.5 实验动物 | 第23-25页 |
| 第3章 实验方法 | 第25-35页 |
| 3.1 小鼠基因型鉴定 | 第25-26页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第25页 |
| 3.1.2 PCR鉴定基因型 | 第25-26页 |
| 3.2 CD133-CreERT2:R26R-zSGreen小鼠注射Tamoxifen | 第26-27页 |
| 3.2.1 主要试剂和耗材 | 第26-27页 |
| 3.2.2 配制10mg/mlTamoxifen溶液 | 第27页 |
| 3.2.3 CD133-CreERT2:R26R-zSGreen小鼠注射Tamoxifen | 第27页 |
| 3.3 小鼠灌注取脑 | 第27-29页 |
| 3.3.1 主要试剂、器械和耗材 | 第27-28页 |
| 3.3.2 小鼠心脏灌注 | 第28页 |
| 3.3.3 小鼠大脑取材 | 第28-29页 |
| 3.4 立体定位损伤 | 第29-30页 |
| 3.4.1 主要试剂、器械和仪器 | 第29页 |
| 3.4.2 配制麻药三溴乙醇 | 第29页 |
| 3.4.3 小鼠第四脑室立体定位 | 第29-30页 |
| 3.4.4 小鼠自体取血注射 | 第30页 |
| 3.5 组织冰冻切片 | 第30-31页 |
| 3.5.1 主要器材 | 第30-31页 |
| 3.5.2 冰冻切片机的使用 | 第31页 |
| 3.6 组织免疫荧光 | 第31-33页 |
| 3.6.1 主要器材和试剂 | 第31-32页 |
| 3.6.2 试剂配制 | 第32页 |
| 3.6.3 组织免疫荧光步骤 | 第32-33页 |
| 3.7 共聚焦显微镜成像 | 第33-35页 |
| 3.7.1 激光共聚焦显微镜(LeicaTCSSP5II)使用说明 | 第33-34页 |
| 3.7.2 激光共聚焦显微镜(NikonA1R)使用说明 | 第34-35页 |
| 第4章 实验结果 | 第35-56页 |
| 4.1 小鼠基因型鉴定结果 | 第35-36页 |
| 4.1.1 纯合CD133-CreERT2小鼠鉴定结果 | 第35页 |
| 4.1.2 纯合Rosa26-CAG-LSL-zSGreen小鼠鉴定结果 | 第35-36页 |
| 4.2 生理状况下第四脑室存在的细胞类型 | 第36-42页 |
| 4.2.1 生理状况下第四脑室存在着CD133+的神经干细胞 | 第36-37页 |
| 4.2.2 生理状况下第四脑室存在着星形胶质细胞 | 第37-38页 |
| 4.2.3 生理状况下第四脑室存在着CD133+/GFAP+B细胞 | 第38页 |
| 4.2.4 生理状况下第四脑室存在着Nestin+的神经干细胞 | 第38-39页 |
| 4.2.5 生理状况下第四脑室存在着神经元 | 第39-40页 |
| 4.2.6 生理状况下第四脑室存在着少突胶质细胞 | 第40-42页 |
| 4.3 生理状况下第四脑室CD133+神经干细胞的分布 | 第42-44页 |
| 4.3.1 第四脑室CD133+神经干细胞分布 | 第42-44页 |
| 4.4 示踪小鼠注射Tamoxifen后最佳收获时间的探究 | 第44-46页 |
| 4.4.1 示踪小鼠注射Tamoxifen后不同时间免疫荧光结果 | 第44-45页 |
| 4.4.2 示踪小鼠注射Tamoxifen后不同时间zSGreen统计分析 | 第45-46页 |
| 4.5 第四脑室的损伤修复实验设计 | 第46页 |
| 4.5.1 损伤修复实验设计图 | 第46页 |
| 4.6 第四脑室损伤模型的建立 | 第46-48页 |
| 4.6.1 第四脑室损伤模型示意图 | 第46-47页 |
| 4.6.2 第四脑室损伤后的细胞变化 | 第47-48页 |
| 4.7 第四脑室中CD133+神经干细胞对损伤的修复 | 第48-56页 |
| 4.7.1 第四脑室损伤后不同时间点CD133的表达 | 第48-50页 |
| 4.7.2 第四脑室损伤后不同时间点GFAP的表达 | 第50-52页 |
| 4.7.3 第四脑室损伤后血管内皮细胞的变化 | 第52-54页 |
| 4.7.4 第四脑室损伤后血管系统干性细胞的修复 | 第54-56页 |
| 第5章 结论与讨论 | 第56-58页 |
| 5.1 结论 | 第56页 |
| 5.2 讨论 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
