| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 绪论 | 第12-18页 |
| 1 甘蔗概述 | 第12-13页 |
| 1.1 甘蔗 | 第12页 |
| 1.2 能源甘蔗研究进展 | 第12-13页 |
| 2 纤维素概述 | 第13-16页 |
| 2.1 纤维素 | 第13-14页 |
| 2.2 纤维素合成酶特征概述 | 第14-15页 |
| 2.3 纤维素合成酶基因功能研究 | 第15-16页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 第一章 甘蔗CesA基因家族的鉴定及演化分析 | 第18-26页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第18-19页 |
| 1.1 实验材料 | 第18页 |
| 1.2 试剂 | 第18-19页 |
| 1.3 仪器 | 第19页 |
| 2 实验方法 | 第19-20页 |
| 2.1 甘蔗割手密BAC文库的测序 | 第19页 |
| 2.2 甘蔗CesA基因家族的预测 | 第19-20页 |
| 2.3 CesA基因家族的注释 | 第20页 |
| 2.4 纤维素合成酶A家族系统进化树的建立 | 第20页 |
| 3 结果分析 | 第20-24页 |
| 3.1 CesA家族成员 | 第20页 |
| 3.2 甘蔗CesA家族的系统发育分析 | 第20-21页 |
| 3.3 甘蔗CesA家族的基因结构分析 | 第21-23页 |
| 3.4 甘蔗CesA家族表达谱分析 | 第23-24页 |
| 4 讨论 | 第24-26页 |
| 第二章 甘蔗组织培养及关键SsCesAs启动子功能研究 | 第26-41页 |
| 1 实验材料 | 第26-28页 |
| 1.1 植物材料 | 第26页 |
| 1.2 菌株及载体 | 第26页 |
| 1.3 常用仪器及试剂 | 第26-27页 |
| 1.4 培养基 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.1 甘蔗组织培养 | 第28页 |
| 2.2 质粒扩增及提取 | 第28-29页 |
| 2.3 DNA提取 | 第29-30页 |
| 2.4 启动子引物设计及PCR扩增 | 第30-31页 |
| 2.5 PCR产物纯化回收 | 第31-32页 |
| 2.6 载体构建 | 第32-33页 |
| 2.7 大肠杆菌感受态的转化 | 第33页 |
| 2.8 农杆菌感受态的电转 | 第33-34页 |
| 2.9 农杆菌侵染甘蔗及转基因愈伤的获得 | 第34页 |
| 2.10 GUS染色观察 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-39页 |
| 3.1 割手密SES-208愈伤的获得 | 第35页 |
| 3.2 愈伤的分化 | 第35-36页 |
| 3.3 启动子的克隆 | 第36-37页 |
| 3.4 载体的构建 | 第37-38页 |
| 3.5 构建载体的验证 | 第38页 |
| 3.6 GUS染色结果 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 三个纤维素合成酶基因在拟南芥中的功能验证 | 第41-58页 |
| 1 实验材料 | 第41页 |
| 1.1 植物材料 | 第41页 |
| 1.2 菌株及载体 | 第41页 |
| 2 实验方法 | 第41-49页 |
| 2.1 质粒提取 | 第41-42页 |
| 2.2 RNA提取及反转录 | 第42-44页 |
| 2.3 引物设计及PCR扩增 | 第44-46页 |
| 2.4 PCR产物纯化回收 | 第46页 |
| 2.5 载体构建 | 第46页 |
| 2.6 大肠杆菌感受态的转化 | 第46页 |
| 2.7 农杆菌感受态的电转 | 第46-47页 |
| 2.8 拟南芥的转化 | 第47页 |
| 2.9 转基因拟南芥筛选 | 第47页 |
| 2.10 荧光定量PCR | 第47-48页 |
| 2.11 冷冻切片及观察 | 第48-49页 |
| 3 结果分析 | 第49-56页 |
| 3.1 目的基因CesAs的克隆 | 第49-51页 |
| 3.2 载体的构建 | 第51页 |
| 3.3 构建载体的验证 | 第51-52页 |
| 3.4 转基因拟南芥纯合体的获得 | 第52-53页 |
| 3.5 荧光定量PCR结果分析 | 第53-54页 |
| 3.6 冷冻切片结果分析 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 三个纤维素合成酶基因在水稻中的功能验证 | 第58-70页 |
| 1 实验材料 | 第58页 |
| 1.1 植物材料 | 第58页 |
| 1.2 菌株及载体 | 第58页 |
| 2 实验方法 | 第58-63页 |
| 2.1 质粒提取 | 第58-59页 |
| 2.2 引物设计及PCR扩增 | 第59-60页 |
| 2.3 PCR产物纯化回收 | 第60页 |
| 2.4 In-Fusion无缝克隆法构建载体 | 第60-61页 |
| 2.5 大肠杆菌感受态的转化 | 第61页 |
| 2.6 农杆菌感受态的电转 | 第61页 |
| 2.7 转基因水稻获得 | 第61页 |
| 2.8 荧光定量PCR | 第61-62页 |
| 2.9 冷冻切片及观察 | 第62页 |
| 2.10 纤维素含量测定 | 第62-63页 |
| 3 结果分析 | 第63-69页 |
| 3.1 载体的构建及验证 | 第63-64页 |
| 3.2 转基因拟南芥纯合体的获得 | 第64-65页 |
| 3.3 荧光定量PCR结果分析 | 第65-66页 |
| 3.4 冷冻切片结果分析 | 第66-68页 |
| 3.5 纤维素含量 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-70页 |
| 总结与展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 攻读硕士学位期间参与的科研项目及主要成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |