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全组织免疫荧光3D成像方法的建立和镉对雌性胎鼠生殖细胞发生的影响

中文摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
缩略语表第12-13页
第一部分 文献综述第13-23页
    第一章 镉的概述第13-16页
        1. 镉的现状第13页
        2. 镉污染危害第13-16页
            2.1 镉对生殖系统的危害第14页
            2.2 镉对胚胎发育的影响第14-16页
    第二章 生殖细胞消退机制及研究方法建立第16-19页
        1. 生殖细胞的研究进展第16-17页
            1.1 生殖细胞概述第16页
            1.2 生殖细胞消退机制研究进展第16-17页
        2. 生殖细胞研究方法建立第17-19页
    第三章 DNA甲基化研究进展第19-23页
        1. 胚胎发育中DNA甲基化进程第19-20页
        2. DNA甲基化转移酶概况第20-21页
        3. 基因印迹第21-22页
        4. LINE1基因第22-23页
第二部分 试验研究第23-52页
    第一章 全组织免疫荧光3D成像方法的建立第23-30页
        1. 材料与方法第23-24页
            1.1 主要试剂和仪器第23页
            1.2 样品的采集第23页
            1.3 全组织免疫荧光第23-24页
            1.4 透明化处理第24页
            1.5 激光共聚焦显微镜扫描第24页
            1.6 免疫组织染色和拍照第24页
        2. 结果第24-28页
            2.1 胎鼠卵巢切片第24-25页
            2.2 透明方法的确立第25-26页
            2.3 软件分析卵巢生殖细胞第26-28页
        3.讨论第28-30页
    第二章 镉对胎鼠卵巢生殖细胞数目的影响第30-34页
        1. 材料与方法第30-31页
            1.1 主要试剂和仪器第30页
            1.2 全组织免疫荧光第30页
            1.3 透明化处理第30页
            1.4 激光共聚焦显微镜扫描第30-31页
        2. 结果第31-32页
        3. 讨论第32-34页
    第三章 镉对雌性胎鼠卵巢DNA甲基化及相关基因表达的影响第34-52页
        1. 材料与方法第34-41页
            1.1 实验动物第34页
            1.2 主要试剂和仪器第34页
            1.3 样品采集第34页
            1.4 RNA的提取第34-35页
            1.5 RNA反转录第35页
            1.6 PCR第35-36页
            1.7 基因组DNA的提取第36页
            1.8 全基因组DNA甲基化的测定第36-37页
            1.9 偏重亚硫酸氢盐处理第37页
            1.10 PCR扩增目的基因第37-39页
            1.11 电泳胶纯化回收第39-40页
            1.12 克隆测序分析第40-41页
            1.13 酶切分析第41页
        2. 结果第41-50页
            2.1 镉对基因组DNA甲基化的影响第41-42页
            2.2 镉对H19基因DNA甲基化的影响第42-43页
            2.3 镉对Peg3基因DNA甲基化的影响第43-46页
            2.4 镉对LINE1基因DNA甲基化的影响第46-48页
            2.5 镉对性腺发育过程中DNMTs和MTs基因表达水平的影响第48-50页
        3.讨论第50-52页
全文结论第52-53页
参考文献第53-64页
致谢第64-65页

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