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猪肌肉生长抑制素基因启动子区不同单倍型遗传效应的研究

英文缩略词第1-11页
中文摘要第11-12页
英文摘要第12-14页
1 引言第14-41页
   ·Myostatin 基因的研究进展第14-35页
     ·Myostatin 基因的发现第14-15页
     ·Myostatin 基因的定位和结构第15页
     ·Myostatin 基因的表达第15-17页
     ·Myostatin 表达改变的生理学影响第17-20页
     ·Myostatin 表达改变的生理病理学影响第20-23页
     ·活体外myostatin 通路和效应的特征第23-26页
     ·Myostatin 表达的调节和信号通路第26-32页
     ·Myostatin 的自然突变第32-35页
   ·定点突变方法概述第35-40页
     ·重叠延伸PCR第35-36页
     ·大引物PCR第36-38页
     ·QuikChange II 定点突变法第38-40页
   ·目的与意义第40-41页
2 材料与方法第41-60页
   ·试验材料第41-46页
     ·试验动物和样品采集第41页
     ·主要仪器第41-42页
     ·酶和试剂第42-43页
     ·主要数据库及生物软件第43页
     ·培养基、缓冲液与常用试剂的配制第43-46页
   ·试验方法第46-60页
     ·试验中用到的所有引物序列第46-47页
     ·猪myostatin 基因启动子区pGL3-A, B, C 3 种单倍型载体的构建第47-50页
       ·猪myostatin 基因5′调控区单倍型模板的筛选第47页
       ·Myostatin 基因启动子区的PCR 扩增与回收第47-48页
       ·pGL3-A, B, C 3 种单倍型载体的克隆转化测序第48-50页
     ·猪myostatin 基因启动子区pGL3-D~H 5 种单倍型载体的获得第50-51页
       ·突变链的合成反应第50-51页
       ·DpnI 消化扩增产物第51页
       ·转化XL-Blue 超级感受态细胞第51页
       ·重组质粒的鉴定和测序第51页
     ·猪myostatin 基因启动子区8 种单倍型载体的去内毒素处理第51-54页
     ·细胞转染及荧光素酶活性的测定第54-55页
       ·小鼠C2C12 细胞的培养第54页
       ·用构建的8 种单倍型载体转染小鼠C2C12 细胞第54-55页
       ·双荧光素酶活性的测定第55页
     ·Myostatin 和MyHCs 基因的定量第55-59页
       ·全同胞鲁莱黑猪的基因型检测第55-57页
       ·猪脂肪组织总RNA 的提取第57-58页
       ·反转录获得cDNA第58页
       ·荧光定量PCR第58-59页
     ·组织学分析第59页
       ·切片的制作第59页
       ·肌纤维直径和密度的测量第59页
     ·统计分析第59-60页
3 结果与分析第60-68页
   ·Myostatin 基因启动子区的PCR 扩增与回收第60页
   ·猪myostatin 基因启动子区8 种单倍型载体的鉴定结果第60-61页
   ·猪myostatin 基因启动子区不同单倍型启动效率的比较第61-62页
   ·BC 和CC 型猪骨骼肌中myostatin 表达量的比较第62-64页
     ·全同胞鲁莱黑猪基因型检测结果第62-63页
     ·BC 和CC 型猪myostatin 表达量的比较第63-64页
   ·BC 和CC 型猪骨骼肌中MyHCs 表达量的比较第64-66页
   ·Myostatin 启动子区不同基因型对骨骼肌纤维直径和密度的影响第66-68页
4 讨论第68-72页
   ·Myostatin 基因启动子区多态与生产性状关系的研究第68-69页
     ·Myostatin 基因启动子区多态的研究第68页
     ·Myostatin 启动子区单倍型的鉴定和分析第68-69页
     ·Myostatin 启动子区多态与生产性状关系的研究第69页
   ·Myostatin 启动子区不同单倍型对转录的影响第69-70页
     ·单倍型分析的优点及应用第69-70页
     ·Myostatin 启动子区不同单倍型对转录的影响第70页
   ·Myostatin 启动子区多态对转录因子结合的影响第70-71页
   ·Myostatin 启动子区不同单倍型对骨骼肌性状的影响第71-72页
5 结论第72-73页
参考文献第73-84页
致谢第84-85页
攻读学位期间发表论文情况第85页

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