| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-17页 |
| 1.1 心肌梗死 | 第12-13页 |
| 1.2 胸腺素β4 | 第13-14页 |
| 1.3 α肌球蛋白重链启动子 | 第14-15页 |
| 1.4 干细胞治疗心肌梗死 | 第15-16页 |
| 1.5 本文研究目的 | 第16-17页 |
| 第二章 胸腺素β4 真核表达载体的构建及其体外活性鉴定 | 第17-65页 |
| 2.1 前言 | 第17-19页 |
| 2.2 材料 | 第19-22页 |
| 2.2.1 基因载体及细胞 | 第19页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第19-21页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.3 方法 | 第22-41页 |
| 2.3.1 目的基因的扩增 | 第22-23页 |
| 2.3.2 琼脂糖核酸电泳及 DNA 凝胶回收 | 第23-24页 |
| 2.3.3 酶切及酶连 | 第24-27页 |
| 2.3.4 热敏感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| 2.3.5 热敏转化及阳性克隆筛选 | 第28-29页 |
| 2.3.6 质粒抽提及序列测定 | 第29-30页 |
| 2.3.7 细胞培养及脂质体转染 | 第30-33页 |
| 2.3.8 细胞免疫荧光 | 第33-34页 |
| 2.3.9 细胞总蛋白及总 RNA 抽提 | 第34-35页 |
| 2.3.10 Realtime PCR 检测 Tβ4 mRNA 表达水平 | 第35-36页 |
| 2.3.11 Elisa 测定 Tβ4 蛋白含量 | 第36-37页 |
| 2.3.12 Western Blot 检测 Tβ4 蛋白 | 第37-41页 |
| 2.4 结果 | 第41-63页 |
| 2.4.1 重组子 Tβ4 基因序列 | 第41-43页 |
| 2.4.2 重组子转染到真核细胞 | 第43-46页 |
| 2.4.3 Tβ4 mRNA 表达水平 | 第46-50页 |
| 2.4.4 Western Blot 检测 Tβ4 蛋白 | 第50-59页 |
| 2.4.5 Elisa 测定 Tβ4 蛋白 | 第59-60页 |
| 2.4.6 细胞免疫荧光检测 Tβ4 蛋白 | 第60-63页 |
| 2.5 讨论 | 第63-65页 |
| 第三章 α肌球蛋白重链启动子驱动报告载体构建及其应用 | 第65-86页 |
| 3.1 前言 | 第65-67页 |
| 3.2 材料 | 第67-70页 |
| 3.2.1 基因载体、动物及细胞 | 第67页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第67-68页 |
| 3.2.3 主要仪器设备 | 第68-70页 |
| 3.3 方法 | 第70-76页 |
| 3.3.1 启动子 DNA 片段的扩增 | 第70页 |
| 3.3.2 琼脂糖核酸电泳及 DNA 凝胶回收 | 第70页 |
| 3.3.3 酶切及酶连 | 第70-71页 |
| 3.3.4 质粒抽提及序列测定 | 第71页 |
| 3.3.5 新生鼠心肌细胞的分离及培养 | 第71-72页 |
| 3.3.6 BMSCs 的分离及培养 | 第72-73页 |
| 3.3.7 报告载体转染到心肌细胞和 BMSCs | 第73-74页 |
| 3.3.8 BMSCs 向心肌诱导分化 | 第74-75页 |
| 3.3.9 细胞免疫荧光检测心肌特异性 | 第75-76页 |
| 3.4 结果 | 第76-84页 |
| 3.4.1 报告载体鉴定的结果 | 第76-77页 |
| 3.4.2 新生鼠心肌细胞及 BMSCs | 第77-78页 |
| 3.4.3 转染报告载体到心肌细胞及 BMSCs | 第78-80页 |
| 3.4.4 BMSCs 向心肌诱导分化 | 第80-82页 |
| 3.4.5 细胞免疫荧光鉴定心肌特异性 | 第82-84页 |
| 3.5 讨论 | 第84-86页 |
| 第四章 靶肽 MI1 表面修饰骨髓间充质干细胞 | 第86-101页 |
| 4.1 前言 | 第86-88页 |
| 4.2 材料 | 第88-90页 |
| 4.2.1 动物 | 第88页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第88页 |
| 3.2.3 主要仪器设备 | 第88-90页 |
| 4.3 方法 | 第90-93页 |
| 4.3.1 BMSCs 的分离及培养 | 第90页 |
| 4.3.2 BMSCs 的表面修饰 | 第90-91页 |
| 4.3.3 MI1 对 BMSCs 生长的影响 | 第91页 |
| 4.3.4 初步探究 MI1-BMSCs 在梗死心肌区域的分布 | 第91-93页 |
| 4.4 结果 | 第93-100页 |
| 4.4.1 BMSCs | 第93-94页 |
| 4.4.2 BMSCs 的表面修饰 | 第94页 |
| 4.4.3 MI1 对 BMSCs 贴壁的影响 | 第94-96页 |
| 4.4.4 MI1 对 BMSCs 传代的影响 | 第96-99页 |
| 4.4.5 MI1-BMSCs 在梗死心脏中的分布 | 第99-100页 |
| 4.5 讨论 | 第100-101页 |
| 第五章 全文结果汇总 | 第101-102页 |
| 第六章 结论与展望 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-118页 |
| 附录 | 第118-121页 |
| 在学期间发表的论文及科研成果清单 | 第121-122页 |
| 特别鸣谢 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
