| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一部分 探讨 TIPE2 对白血病细胞生物功能的影响 | 第13-42页 |
| 1.1 前言 | 第13页 |
| 1.2 材料 | 第13-19页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第13-14页 |
| 1.2.2 仪器设备 | 第14-15页 |
| 1.2.3 主要溶剂的配制 | 第15-19页 |
| 1.3 方法 | 第19-32页 |
| 1.3.1 引物设计 | 第19-20页 |
| 1.3.2 感受态的制备 | 第20-21页 |
| 1.3.3 TIPE2 过表达载体的构建 | 第21-24页 |
| 1.3.4 细胞培养及对重组质粒的转染 | 第24-25页 |
| 1.3.5 mRNA 的提取和逆转录反应 | 第25-26页 |
| 1.3.6 组织样本免疫组化步骤 | 第26-27页 |
| 1.3.7 MTT 法测定细胞的生长曲线 | 第27页 |
| 1.3.8 流式细胞仪测细胞周期 | 第27-28页 |
| 1.3.9 流式细胞仪测细胞凋亡 | 第28页 |
| 1.3.10 Transwell 膜检测细胞的迁移 | 第28页 |
| 1.3.11 软琼脂实验测细胞迁移 | 第28-29页 |
| 1.3.12 蛋白质的提取和 BCA 法测定蛋白浓度 | 第29-30页 |
| 1.3.13 免疫印迹杂交法 | 第30-32页 |
| 1.3.14 统计学分析 | 第32页 |
| 1.4 结果 | 第32-39页 |
| 1.4.1 白血病伴随淋巴瘤混合发病的临床组织样本中 TIPE2 的检测 | 第32页 |
| 1.4.2 免疫组化检测白血病伴随淋巴瘤混合发病的临床组织样本中 TIPE2 蛋白的表达水平 | 第32-33页 |
| 1.4.3 TIPE2 基因 CDS 区全长的扩增 | 第33-34页 |
| 1.4.4 TIPE2 基因 CDS 区 PCR 产物与 pCMV-C-Flag 和 pEGFP-N2 载体连接后的验证 | 第34-35页 |
| 1.4.5 TIPE2 基因过表达 PCR 和免疫印迹的验证 | 第35-36页 |
| 1.4.6 TIPE2 基因对 K562 细胞生长的影响 | 第36页 |
| 1.4.7 TIPE2 基因对 K562 细胞周期的影响 | 第36-37页 |
| 1.4.8 TIPE2 基因对 K562 细胞迁移的影响 | 第37-38页 |
| 1.4.9 TIPE2 基因过表达后对 K562 细胞凋亡的影响 | 第38页 |
| 1.4.10 TIPE2 基因过表达后对一些蛋白的影响 | 第38-39页 |
| 1.5 讨论 | 第39-42页 |
| 第二部分 TIPE2 与 PCNP 蛋白间的相互作用关系 | 第42-47页 |
| 2.1 前言 | 第42页 |
| 2.2 材料及试剂 | 第42-43页 |
| 2.2.1 主要材料和试剂 | 第42-43页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第43页 |
| 2.2.3 主要溶液的配制 | 第43页 |
| 2.3 方法 | 第43-45页 |
| 2.3.1 基因沉默功能序列和过表达序列的设计与合成 | 第43页 |
| 2.3.2 PCNP 载体的构建 | 第43页 |
| 2.3.4 细胞的培养及对沉默和过表达重组质粒的转染 | 第43页 |
| 2.3.5 mRNA 的提取及反转录成 cDNA | 第43-44页 |
| 2.3.6 蛋白的提取及 BCA 测蛋白浓度 | 第44页 |
| 2.3.7 免疫共沉淀（Co-IP） | 第44页 |
| 2.3.8 免疫荧光 | 第44-45页 |
| 2.3.9 免疫印迹杂交 | 第45页 |
| 2.3.10 统计学分析方法 | 第45页 |
| 2.4 结果 | 第45-46页 |
| 2.4.1 TIPE2 基因对 PCNP 的表达的影响 | 第45页 |
| 2.4.2 TIPE2 和 PCNP 两种蛋白间的相互作用 | 第45-46页 |
| 2.5 讨论 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 综述 | 第52-62页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 在读期间参加的学术会议及研究成果 | 第64-65页 |
