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Galectin-1和Galectin-3调控猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的相关研究

内容摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第13-22页
    1.1 PRRSV的分子生物学第13-17页
        1.1.1 病毒分类及理化性质第14页
        1.1.2 病毒基因组结构第14-15页
        1.1.3 病毒入侵及基因组复制第15-17页
    1.2 PRRSV编码蛋白第17-19页
        1.2.1 病毒结构蛋白第17页
        1.2.2 病毒非结构蛋白第17-19页
    1.3 宿主蛋白与PRRSV蛋白相互作用的研究第19-20页
    1.4 研究目的和意义第20-22页
第二章 PRRSV Nsp11、 Nsp12与宿主相互作用蛋白的筛选与鉴定第22-33页
    2.1 材料与方法第22-25页
        2.1.1 病毒与细胞第22-23页
        2.1.2 主要试剂第23页
        2.1.3 主要方法第23-25页
    2.2 结果第25-29页
        2.2.1 病毒诱饵质粒的转化、毒性和自激活检测第25-26页
        2.2.2 候选蛋白筛选第26-28页
        2.2.3 回复杂交验证第28页
        2.2.4 Co-IP验证第28-29页
    2.3 讨论第29-33页
第三章 Galectin-3抑制PRRSV复制的相关研究第33-47页
    3.1 材料与方法第33-37页
        3.1.1 病毒与细胞第33页
        3.1.2 试剂与仪器第33-34页
        3.1.3 真核质粒的转染第34-35页
        3.1.4 多步生长曲线第35页
        3.1.5 间接免疫荧光(IFA)第35页
        3.1.6 SDS-PAGE和WB第35-36页
        3.1.7 基因敲除细胞系的构建第36-37页
        3.1.8 统计学分析第37页
    3.2 结果第37-44页
        3.2.1 Nsp12与Galectin-3的细胞共定位第37-38页
        3.2.2 PRRSV感染对内源Galectin-3表达的影响第38-39页
        3.2.3 过表达Galetin-3显著抑制PRRSV复制第39-40页
        3.2.4 过表达Galetin-3显著抑制病毒N蛋白表达第40-41页
        3.2.5 Galectin-3对不同基因型和不同毒力的PRRSV毒株均有抑制作用第41-42页
        3.2.6 Galectin-3基因敲除MARC-145细胞系的鉴定第42-43页
        3.2.7 Galectin-3基因敲除显著促进PRRSV复制和N蛋白表达第43-44页
    3.3 讨论第44-47页
第四章 Galectin-1抑制PRRSV复制的相关研究第47-61页
    4.1 材料与方法第47-50页
        4.1.1 病毒与细胞第47页
        4.1.2 试剂与仪器第47页
        4.1.3 真核质粒的转染第47-48页
        4.1.4 多步生长曲线第48页
        4.1.5 IFA第48页
        4.1.6 SDS-PAGE和WB第48页
        4.1.7 细胞总RNA的分离提取及反转录第48页
        4.1.8 相对荧光定量检测第48-49页
        4.1.9 统计学分析第49-50页
    4.2 结果第50-59页
        4.2.1 Nsp11与Galectin-1的细胞共定位第50-51页
        4.2.2 过表达Galetin-1强烈抑制PRRSV复制第51-52页
        4.2.3 过表达Galetin-1显著抑制病毒蛋白表达第52-53页
        4.2.4 Galectin-1具有广谱抗PRRSV作用第53-54页
        4.2.5 Galectin-1可上调干扰素刺激基因表达第54-55页
        4.2.6 重组Galectin-1蛋白可显著抑制PRRSV第55页
        4.2.7 过表达Galectin-1对EAV复制的影响第55-56页
        4.2.8 过表达Galectin-1对PRV JS-2012复制的影响第56-57页
        4.2.9 过表达Galectin-1对PEDV SH6复制的影响第57-58页
        4.2.10 过表达Galectin-1对JEV HEN0701复制的影响第58-59页
        4.2.11 过表达Galectin-1对CSFV石门株复制的影响第59页
    4.3 讨论第59-61页
第五章 全文结论第61-62页
致谢第62-63页
参考文献第63-72页
附录第72-74页

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