| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-21页 |
| 1.1 蒙古牛、水牛概述 | 第10-11页 |
| 1.1.1 蒙古牛特征及分布 | 第10页 |
| 1.1.2 水牛特征及分布 | 第10-11页 |
| 1.2 BTG/TOB家族研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 BTG2研究进展 | 第12-14页 |
| 1.4 启动子研究进展 | 第14-16页 |
| 1.4.1 启动子概述 | 第14页 |
| 1.4.2 启动子的研究意义 | 第14-15页 |
| 1.4.3 启动子调控功能研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 电转染技术 | 第16-17页 |
| 1.6 荧光定量PCR技术 | 第17-19页 |
| 1.6.1 荧光定量PCR原理 | 第18页 |
| 1.6.2 SYBR Green Ⅰ染料监测PCR | 第18-19页 |
| 1.7 凝胶电泳迁移率实验 | 第19-20页 |
| 1.8 研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 实验一 蒙古牛和水牛BTG2启动子的克隆及序列分析 | 第21-38页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 生物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 溶液配制 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要仪器及耗材 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 血液DNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 DNA浓度和纯度的检测 | 第23页 |
| 2.2.3 BTG2启动子的扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.4 BTG2启动子克隆与测序 | 第24-26页 |
| 2.2.5 pBTG2(p)-EGFP瞬时表达载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.3 结果 | 第28-37页 |
| 2.3.1 蒙古牛和水牛血液基因组提取结果 | 第28-29页 |
| 2.3.2 BTG2启动子扩增结果 | 第29-30页 |
| 2.3.3 菌落PCR产物鉴定结果 | 第30-31页 |
| 2.3.4 重组pMD-BTG2(p)限制性酶切鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.5 蒙古牛和水牛BTG2启动子序列分析 | 第32-34页 |
| 2.3.6 pBTG2(p)-EGFP瞬时表达载体构建结果 | 第34-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-38页 |
| 3 实验二 蒙古牛和水牛BTG2启动子功能的初步验证 | 第38-52页 |
| 3.1 材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 生物材料 | 第38页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 3.1.3 溶液配制 | 第38-39页 |
| 3.1.4 主要仪器及耗材 | 第39页 |
| 3.2 方法 | 第39-45页 |
| 3.2.1 瞬时表达载体P(BTG2)-EGFP-SV40 PolyA的转染及诱导表达 | 第39-40页 |
| 3.2.2 荧光定量PCR检测BTG2的表达差异 | 第40-43页 |
| 3.2.3 蒙古牛BTG2启动子269bp EMSA检测 | 第43-45页 |
| 3.3 结果 | 第45-51页 |
| 3.3.1 HeLa细胞电转染结果 | 第45-47页 |
| 3.3.2 荧光定量PCR结果 | 第47-49页 |
| 3.3.3 EMSA分析结果 | 第49-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-52页 |
| 4 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
