摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-27页 |
1. 南极苔藓 | 第11页 |
2. 植物GATA转录因子的研究进展 | 第11-16页 |
2.1 GATA转录因子的起源 | 第13页 |
2.2 GATA转录因子的分布与结构 | 第13-15页 |
2.2.1 GATA转录因子的分类 | 第13-14页 |
2.2.2 GATA转录因子的结构 | 第14-15页 |
2.3 GATA转录因子的功能 | 第15-16页 |
3. 植物根系的发生与发育 | 第16-23页 |
3.1 根系的形态结构 | 第16-17页 |
3.2 根系的生理功能 | 第17-18页 |
3.3 植物根系的发生与建成 | 第18-20页 |
3.3.1 植物根系的建成 | 第18-20页 |
3.4 根生长发育过程中环境因子的影响 | 第20-23页 |
3.4.1 光照因子 | 第20页 |
3.4.2 植物生长调节因子 | 第20-23页 |
4. 植物根部的生长素与向地性的关系 | 第23-25页 |
5. 立题依据与研究内容 | 第25-27页 |
第二章 研究工作 | 第27-41页 |
一、实验材料 | 第27-32页 |
1. 材料的选取及处理的条件 | 第27-29页 |
1.1 植物材料及生长条件 | 第27页 |
1.2 苔藓胁迫的处理条件与发育期的选择 | 第27-28页 |
1.3 拟南芥发育时期的选择与胁迫的处理条件 | 第28-29页 |
2. 菌株和载体质粒 | 第29页 |
2.1 菌株 | 第29页 |
2.2 载体 | 第29页 |
3. 药品试剂、试剂盒、溶液及培养基配制 | 第29-32页 |
3.1 药品试剂 | 第29-30页 |
3.2 所用试剂盒 | 第30页 |
3.3 培养基及溶液的配制 | 第30-32页 |
二、实验方法 | 第32-41页 |
1. 南极丝瓜藓PnGATA1基因cDNA全长的克隆与序列分析 | 第32-34页 |
1.1 南极丝瓜藓PnGATA1的克隆 | 第32-33页 |
1.2 PCR产物电泳检测及回收 | 第33页 |
1.3 连接克隆载体 | 第33页 |
1.4 CaCl_2法制备大肠杆菌的感受态细胞 | 第33页 |
1.5 热激法转化大肠杆菌 | 第33页 |
1.6 重组克隆的阳性克隆子筛选 | 第33页 |
1.7 重组质粒的测序 | 第33页 |
1.8 基因全长cDNA的获得 | 第33页 |
1.9 序列分析 | 第33-34页 |
2. 基因表达模式分析 | 第34页 |
2.1 南极丝瓜藓PnGATA1基因表达模式分析 | 第34页 |
2.2 拟南芥相关的Marker基因表达模式分析 | 第34页 |
3. 转录因子体外活性分析 | 第34-37页 |
3.1 目的基因的扩增及载体构建 | 第34-35页 |
3.2 制备酵母感受态及小量法转化酵母感受态 | 第35-36页 |
3.3 阳性克隆鉴定及转录因子活性分析 | 第36-37页 |
4. 基因亚细胞定位实验 | 第37-38页 |
4.1 瞬时表达载体的构建 | 第37-38页 |
4.2 不含内毒素大提的瞬时表达载体质粒的提取 | 第38页 |
4.3 拟南芥原生质体制备及PEG介导的原生质体转化 | 第38页 |
5. 拟南芥过表达转基因株系的获得 | 第38-41页 |
5.1 过表达载体的构建 | 第38-39页 |
5.2 农杆菌感受态的制备 | 第39页 |
5.3 农杆菌的转化及阳性克隆的筛选和鉴定 | 第39页 |
5.4 拟南芥的生长及转化 | 第39页 |
5.5 转基因拟南芥阳性苗的筛选和纯系的鉴定 | 第39页 |
5.6 拟南芥表型分析实验 | 第39-40页 |
5.7 拟南芥相关的Marker基因表达模式研究 | 第40-41页 |
第三章 结果和分析 | 第41-63页 |
1. PnGATA1在南极丝瓜藓转录组中的表达变化 | 第41页 |
2. 非生物胁迫与激素处理条件下PnGATA1的表达模式 | 第41-42页 |
3. PnGATA1的克隆与序列分析 | 第42-45页 |
4. PnGATA1的体外转录激活分析 | 第45-46页 |
5. PnGATA1亚细胞定位 | 第46-48页 |
6. 拟南芥PnGATA1过表达株系的获得 | 第48-50页 |
6.1 拟南芥过表达载体的构建 | 第48页 |
6.2 拟南芥过表达株系的获取 | 第48-49页 |
6.3 转基因拟南芥阳性植株的鉴定 | 第49-50页 |
7. PnGATA1对转基因拟南芥生长发育的影响 | 第50-63页 |
7.1 PnGATA1对种子萌发的影响 | 第50-54页 |
7.2 不同光质下,PnGATA1对下胚轴伸长的影响 | 第54-55页 |
7.3 PnGATA1引起的叶生长发育抑制 | 第55-56页 |
7.4 PnGATA1引起根的生长抑制 | 第56-57页 |
7.5 PnGATA1导致根向地性减弱 | 第57-59页 |
7.6 PnGATA1通过生长素信号途径影响根生长 | 第59-61页 |
7.7 PnGATA1引起根尖结构异常 | 第61-63页 |
第四章 讨论与总结 | 第63-65页 |
展望 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |
硕士期间发表文章 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
附表 | 第74页 |