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鸭坦布苏病毒FSD1株的生物学特性研究及基因组序列分析

符号说明第4-5页
氨基酸的简写符号第5-9页
中文摘要第9-10页
Abstract第10页
1.前言第12-27页
    1.1 背景第12页
    1.2 发展与分布第12页
    1.3 病毒病原学第12-17页
        1.3.1 形态和理化特征第13页
        1.3.2 生物学特征第13页
        1.3.3 培养特性第13页
        1.3.4 黄病毒基因组结构与功能第13-16页
        1.3.5 坦布苏病毒进化分析第16-17页
    1.4 流行病学第17-18页
    1.5 临床症状及病理特征第18-19页
        1.5.1 临床症状第18-19页
        1.5.2 病理变化第19页
    1.6 诊断方法第19-23页
        1.6.1 病毒分离第19-20页
        1.6.2 电镜检测第20-21页
        1.6.3 主要血清学诊断方法第21页
        1.6.4 分子生物学诊断技术第21-23页
    1.7 防控措施第23-24页
    1.8 亟待解决的问题及展望第24-25页
        1.8.1 致病性的研究第24页
        1.8.2 发病原因及发病机制探讨第24-25页
        1.8.3 药物及其疫苗的开发第25页
    1.9 研究的目的与意义第25-27页
2 材料与方法第27-39页
    2.1 材料第27-28页
        2.1.1 病料来源第27页
        2.1.2 实验动物第27页
        2.1.3 菌种及载体第27页
        2.1.4 培养基及相关试剂的配制第27页
        2.1.5 主要试剂及溶液的配制第27-28页
        2.1.6 其他主要分子生物学试剂及溶液第28页
        2.1.7 主要仪器设备第28页
    2.2 方法第28-39页
        2.2.1 病毒分离第28-29页
        2.2.2 病毒分离株的生物学特性分析第29-31页
        2.2.3 雏鸭回归试验第31页
        2.2.4 病毒的电镜观察第31页
        2.2.5 病毒 RNA 的提取第31页
        2.2.6 利用随机引物进行扩增第31-32页
        2.2.7 全基因组引物设计与合成第32-33页
        2.2.8 RT-PCR第33-34页
        2.2.9 阳性 PCR 产物的回收与纯化第34页
        2.2.10 PCR 产物与 pMD20-T 载体的连接第34-35页
        2.2.11 感受态细胞的制备第35页
        2.2.12 连接产物的转化第35页
        2.2.13 转化菌的筛选与鉴定第35-36页
        2.2.14 序列的测定和分析第36页
        2.2.15 FSD1 毒株 E 蛋白二级结构及 B 细胞抗原表位的预测第36-37页
        2.2.16 FSD1 毒株 E 蛋白结构分析第37页
        2.2.17 FSD1 糖基化位点和半胱氨酸 C 位点的分析第37页
        2.2.18 FSD1 与 TMUV 其他国内分离株遗传进化分析第37-38页
        2.2.19 FSD1 与其它黄病毒分离株遗传进化分析第38-39页
3 结果与分析第39-50页
    3.1 病毒分离第39页
    3.2 病毒的生物学特性分析第39-40页
        3.2.1 血凝性第39页
        3.2.2 理化特性第39-40页
        3.2.3 分离毒株核酸类型鉴定第40页
    3.3 分离毒株对不同宿主的适应性第40-41页
        3.3.1 鸭胚和鸡胚第40-41页
        3.3.2 鸭胚成纤维细胞(DEF)和鸡胚成纤维细胞(CEF)第41页
    3.4 病毒分离物毒价的测定第41页
        3.4.1 鸡胚和鸭胚半数致死量(CELD50、DELD50)的测定第41页
        3.4.2 细胞培养半数感染量(TCID50)的测定第41页
    3.5 雏鸭回归试验第41-42页
    3.6 电镜观察第42-43页
    3.7 随机引物的初步鉴定结果第43页
    3.8 FSD1 基因组的总体特征第43-44页
    3.9 FSD1毒株的系统进化分析第44-45页
    3.10 FSD1毒株糖基化位点和半胱氨酸C位点分析第45-46页
    3.11 E蛋白的二级结构和抗原表位预测第46页
    3.12 FSD1 毒株 E 蛋白结构分析第46-47页
    3.13 FSD1与其它黄病毒的基因组同源性比较分析第47-48页
    3.14 新发鸭TMUV基因遗传关系分析第48-50页
4 讨论第50-54页
    4.1 鸭坦布苏病毒的出现和发病情况第50页
    4.2 新发鸭坦布苏病发病原因、检测方法、疫苗研制等第50-51页
    4.3 病毒的分离和理化特性第51-52页
    4.4 病毒的序列特性和遗传进化分析第52-54页
5 结论第54-55页
6 参考文献第55-61页
致谢第61页

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