| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-16页 |
| 1.1 支原体概述 | 第10页 |
| 1.2 支原体的致病机制 | 第10-11页 |
| 1.3 支原体功能蛋白 | 第11页 |
| 1.4 山羊传染性胸膜肺炎 | 第11-13页 |
| 1.4.1 山羊传染性胸膜肺炎病原 | 第12-13页 |
| 1.4.2 流行病学 | 第13页 |
| 1.4.3 山羊传染性胸膜肺炎的诊断与防治 | 第13页 |
| 1.5 乳酸脱氢酶概述 | 第13-14页 |
| 1.6 乳酸脱氢酶酶学性质 | 第14-16页 |
| 第2章 引言 | 第16-18页 |
| 2.1 研究背景与意义 | 第16页 |
| 2.2 技术路线 | 第16-18页 |
| 第3章 LDH基因的克隆与表达 | 第18-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第18-22页 |
| 3.1.1 菌株及质粒 | 第18页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第19页 |
| 3.1.4 试剂配制 | 第19-22页 |
| 3.2 实验方法 | 第22-31页 |
| 3.2.1 山羊支原体的复壮 | 第22-23页 |
| 3.2.2 山羊支原体丝状亚种标准株PG3基因组DNA的制备 | 第23页 |
| 3.2.3 引物设计合成 | 第23-24页 |
| 3.2.4 第一个点突变 | 第24-28页 |
| 3.2.5 第二、三个点的突变 | 第28-29页 |
| 3.2.6 pGEX-6P-2-LDH在E.coli XL-1中的表达 | 第29-30页 |
| 3.2.7 重组蛋白LDH的酶切纯化 | 第30页 |
| 3.2.8 LDH的大规模制备与纯化 | 第30-31页 |
| 3.3 实验结果 | 第31-35页 |
| 3.3.1 LDH的PCR结果 | 第31-33页 |
| 3.3.2 重组质粒pGEX-6P-2-LDH酶切鉴定 | 第33-34页 |
| 3.3.3 序列测定 | 第34-35页 |
| 3.3.4 LDH蛋白的纯化与表达 | 第35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-38页 |
| 第4章 生物信息学分析 | 第38-44页 |
| 4.1 材料来源 | 第38页 |
| 4.2 方法 | 第38页 |
| 4.3 结果与分析 | 第38-42页 |
| 4.3.1 LDH的理化性质 | 第38页 |
| 4.3.2 LDH信号肽预测 | 第38-39页 |
| 4.3.3 LDH跨膜区预测 | 第39-40页 |
| 4.3.4 LDH二级结构预测 | 第40-41页 |
| 4.3.5 蛋白质的空间结构 | 第41-42页 |
| 4.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第5章 免疫学特性 | 第44-50页 |
| 5.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第44页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第44页 |
| 5.1.3 主要溶液及试剂配制 | 第44-45页 |
| 5.2 实验方法 | 第45-46页 |
| 5.2.1 重组蛋白LDH兔抗血清的制备 | 第45页 |
| 5.2.2 免疫印迹试验(Western blotting) | 第45-46页 |
| 5.3 实验结果 | 第46-47页 |
| 5.3.1 LDH蛋白的免疫效果检测 | 第46-47页 |
| 5.4 讨论 | 第47-50页 |
| 第6章 . 论文总结 | 第50-52页 |
| 6.1 丝状支原体山羊亚种乳酸脱氢酶的克隆表达及纯化 | 第50页 |
| 6.2 丝状支原体山羊亚种乳酸脱氢酶的免疫原性 | 第50页 |
| 6.3 丝状支原体山羊亚种乳酸脱氢酶生物信息学分析 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 附表 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
