| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-30页 |
| 1.1 乳腺的发育和泌乳过程 | 第15-16页 |
| 1.2 乳脂代谢的调控 | 第16-23页 |
| 1.2.1 从头合成相关的重要基因 | 第16-17页 |
| 1.2.2 摄取、转运相关重要基因 | 第17页 |
| 1.2.3 甘油三酯、脂滴形成和分泌相关重要基因 | 第17-18页 |
| 1.2.4 重要转录因子 | 第18-19页 |
| 1.2.5 信号通路与脂代谢 | 第19-23页 |
| 1.2.5.1 PI3K/Akt/mTOR信号通路 | 第20-21页 |
| 1.2.5.2 AMPK通路 | 第21-23页 |
| 1.3 t10c12-CLA对代谢的调控 | 第23-27页 |
| 1.3.1 t10c12-CLA与乳脂代谢 | 第25页 |
| 1.3.2 t10c12-CLA与其他组织器官的脂代谢 | 第25-26页 |
| 1.3.3 t10c12-CLA与细胞生长的关系 | 第26页 |
| 1.3.4 t10c12-CLA与细胞信号通路 | 第26-27页 |
| 1.4 转录组测序技术 | 第27-28页 |
| 1.4.1 转录组测序技术简介 | 第27页 |
| 1.4.2 RNA-seq的操作流程 | 第27-28页 |
| 1.4.3 测序技术在山羊上的应用 | 第28页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第28-30页 |
| 第二章 t10c12-CLA对奶山羊泌乳性能的影响 | 第30-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第30-33页 |
| 2.1.1 试验地点及试验动物管理 | 第30页 |
| 2.1.2 日粮及主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 2.1.4 试验方案 | 第31-32页 |
| 2.1.5 奶样采集和乳成分分析 | 第32页 |
| 2.1.6 脂肪酸测定分析 | 第32页 |
| 2.1.7 数据分析 | 第32-33页 |
| 2.2 结果 | 第33-36页 |
| 2.2.1 LE-CLA对奶山羊泌乳指标的影响 | 第33-34页 |
| 2.2.2 LE-CLA对羊奶脂肪酸组成的影响 | 第34-36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-37页 |
| 2.3.1 LE-CLA对奶山羊泌乳指标的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.2 LE-CLA对羊奶脂肪酸组成的影响 | 第37页 |
| 2.4 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 t10c12-CLA对山羊乳腺上皮细胞生长的影响 | 第38-47页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-41页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第39页 |
| 3.1.3 细胞培养和样品处理 | 第39页 |
| 3.1.4 细胞活力的测定 | 第39-40页 |
| 3.1.5 细胞的hoechst33342染色 | 第40页 |
| 3.1.6 蛋白提取和westernblot | 第40页 |
| 3.1.7 RNA提取和RT-qPCR | 第40-41页 |
| 3.1.8 细胞划痕试验 | 第41页 |
| 3.1.9 数据分析 | 第41页 |
| 3.2 结果 | 第41-44页 |
| 3.2.1 t10c12-CLA对GMECs增殖的影响 | 第41-42页 |
| 3.2.2 t10c12-CLA对GMECs凋亡的影响 | 第42-43页 |
| 3.2.3 t10c12-CLA对GMECs迁移的影响 | 第43-44页 |
| 3.3 讨论 | 第44-46页 |
| 3.3.1 t10c12-CLA不同处理浓度和时间对GMECs增殖、凋亡的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.2 t10c12-CLA对GMECs迁移的影响 | 第45-46页 |
| 3.4 小结 | 第46-47页 |
| 第四章 t10c12-CLA处理GMECs的RNA测序与生物信息学分析 | 第47-62页 |
| 4.1 材料与方法 | 第47-49页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第47页 |
| 4.1.2 主要仪器及设备 | 第47页 |
| 4.1.3 细胞培养及试验处理 | 第47页 |
| 4.1.4 RNA样品的制备 | 第47页 |
| 4.1.5 cDNA文库构建 | 第47-48页 |
| 4.1.6 序列比对和组装 | 第48页 |
| 4.1.7 基因表达水平分析 | 第48页 |
| 4.1.8 差异表达分析 | 第48页 |
| 4.1.9 GO和KEGG的富集分析 | 第48页 |
| 4.1.10 RT-qPCR验证 | 第48-49页 |
| 4.1.11 数据分析 | 第49页 |
| 4.2 结果 | 第49-59页 |
| 4.2.1 GMECs中表达转录本的识别 | 第49-50页 |
| 4.2.2 基因表达水平的分析 | 第50-52页 |
| 4.2.3 基因的差异表达分析 | 第52-53页 |
| 4.2.4 差异基因的GO分析 | 第53页 |
| 4.2.5 差异基因的KEGG分析 | 第53页 |
| 4.2.6 RNA-seq与RT-qPCR的相关性分析及主要差异基因的变化趋势 | 第53-59页 |
| 4.3 讨论 | 第59-61页 |
| 4.3.1 转录本的识别和基因表达水平的分析 | 第60页 |
| 4.3.2 差异基因分析 | 第60页 |
| 4.3.3 RNA-seq结果的验证 | 第60-61页 |
| 4.4 小结 | 第61-62页 |
| 第五章 t10c12-CLA影响GMECs脂代谢相关基因的表达及转录调控研究 | 第62-76页 |
| 5.1 材料与方法 | 第62-66页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第62页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第62-63页 |
| 5.1.3 细胞培养及试验处理 | 第63页 |
| 5.1.4 油红O染色 | 第63页 |
| 5.1.5 细胞内脂肪酸成分的测定 | 第63-64页 |
| 5.1.6 RNA提取和RT-qPCR | 第64页 |
| 5.1.7 蛋白提取和westernblot | 第64页 |
| 5.1.8 免疫荧光染色 | 第64-65页 |
| 5.1.9 荧光素酶活性测定 | 第65页 |
| 5.1.10 数据分析 | 第65-66页 |
| 5.2 结果 | 第66-72页 |
| 5.2.1 t10c12-CLA对GMECs脂质积累的影响 | 第66页 |
| 5.2.2 t10c12-CLA对GMECs脂肪酸成分的影响 | 第66-67页 |
| 5.2.3 t10c12-CLA对GMECs脂质合成代谢重要基因表达量的影响 | 第67-69页 |
| 5.2.4 t10c12-CLA对SREBP1和SCD1蛋白表达水平的影响 | 第69页 |
| 5.2.5 t10c12-CLA对SCD1基因启动子活性的影响 | 第69-72页 |
| 5.3 讨论 | 第72-75页 |
| 5.3.1 t10c12-CLA对脂肪酸合成基因表达和脂质积累的影响 | 第72-73页 |
| 5.3.2 t10c12-CLA对脂肪酸分解基因表达的影响 | 第73页 |
| 5.3.3 t10c12-CLA对SREBF1和SCD1基因转录调控的研究 | 第73-75页 |
| 5.4 小结 | 第75-76页 |
| 第六章 t10c12-CLA通过AMPK和mTOR通路调控GMECs脂代谢的分子途径研究. | 第76-84页 |
| 6.1 材料与方法 | 第76-77页 |
| 6.1.1 试验材料 | 第76页 |
| 6.1.2 主要仪器设备 | 第76页 |
| 6.1.3 细胞培养及试验处理 | 第76-77页 |
| 6.1.4 RNA提取和RT-qPCR | 第77页 |
| 6.1.5 蛋白提取和westernblot | 第77页 |
| 6.1.6 数据分析 | 第77页 |
| 6.2 结果 | 第77-81页 |
| 6.2.1 Akt通路与乳脂代谢的关系 | 第77-78页 |
| 6.2.2 t10c12-CLA对Akt/mTOR通路的影响 | 第78-79页 |
| 6.2.3 t10c12-CLA通过调节AMPK通路改变脂肪酸基因表达 | 第79-80页 |
| 6.2.4 Rapamycin、Dorsomorphin和t10c12-CLA联合处理对脂肪酸代谢基因表达的调控 | 第80-81页 |
| 6.2.5 t10c12-CLA调控山羊乳腺脂代谢的模式图 | 第81页 |
| 6.3 讨论 | 第81-82页 |
| 6.3.1 t10c12-CLA对Akt-mTOR通路的调控 | 第81-82页 |
| 6.3.2 t10c12-CLA对AMPK通路的调控 | 第82页 |
| 6.4 小结 | 第82-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 创新点 | 第85-86页 |
| 存在问题及展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-103页 |
| 附录 | 第103-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 个人简介 | 第110页 |
