| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语/符号说明 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-21页 |
| 研究现状、成果 | 第12-20页 |
| 研究目的、方法 | 第20-21页 |
| 一、验证VHL-HIF-HRGs通路及HIF对786-0细胞成瘤的重要性 | 第21-27页 |
| 1.1 对象和方法 | 第21-23页 |
| 1.1.1 实验对象 | 第21页 |
| 1.1.2 实验方法 | 第21-23页 |
| 1.1.2.1 细胞系的制备 | 第21-22页 |
| 1.1.2.2 氯化钴(COCl_2)和去铁胺(DFO)模拟低氧环境 | 第22页 |
| 1.1.2.3 Western Blot检测细胞蛋白表达情况 | 第22页 |
| 1.1.2.4 动物模型的制备及应用 | 第22-23页 |
| 1.2 结果 | 第23-25页 |
| 1.2.1 WB验证VHL-HIF-HRGs调节通路 | 第23页 |
| 1.2.2 HIF对VHL-/-786-O成瘤至关重要 | 第23-25页 |
| 1.3 讨论 | 第25-26页 |
| 1.4 小结 | 第26-27页 |
| 二、mRNA水平验证786-0细胞中HIF-2α诱导的基因 | 第27-37页 |
| 2.1 对象和方法 | 第28-30页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第28页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第28-30页 |
| 2.1.2.1 提取细胞的RNA | 第28页 |
| 2.1.2.2 cDNA第一链合成 | 第28-29页 |
| 2.1.2.3 qPCR检测HIF靶基因mRNA在肾透明细胞癌中的表达情况 | 第29-30页 |
| 2.2 结果 | 第30-33页 |
| 2.3 讨论 | 第33-36页 |
| 2.4 小结 | 第36-37页 |
| 三、沉默特定HIF下游靶基因对VHL-/-肾细胞癌细胞系786-0体内成瘤能力的影响及其可能机制 | 第37-58页 |
| 3.1 对象和方法 | 第37-40页 |
| 3.1.1 实验对象 | 第37页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第37-40页 |
| 3.1.2.1 细胞系的制备 | 第37-39页 |
| 3.1.2.2 Western Blot检测细胞蛋白表达情况 | 第39页 |
| 3.1.2.3 ELISA检测VEGF的表达水平 | 第39页 |
| 3.1.2.4 RNA提取,逆转录及RT-PCR(QPCR) | 第39页 |
| 3.1.2.5 动物模型的制备及应用 | 第39页 |
| 3.1.2.6 XTT体外增殖实验 | 第39-40页 |
| 3.1.2.7 免疫共沉淀 | 第40页 |
| 3.2 结果 | 第40-49页 |
| 3.2.1 抑制HIF下游基因表达的786-0体外增殖实验 | 第40-42页 |
| 3.2.2 抑制HIF下游基因的786-0体内实验 | 第42-49页 |
| 3.2.2.1 抑制VEGF和CCND1的表达能够抑制VHL-/-肾细胞癌细胞成瘤 | 第42-44页 |
| 3.2.2.2 抑制ANGPTL4,EGLN3和ENO2的表达对VHL-/-肾细胞癌细胞成瘤无显著影响 | 第44-46页 |
| 3.2.2.3 抑制Glut-1,IGFBP3的表达促进VHL-/-肾细胞癌细胞成瘤 | 第46-48页 |
| 3.2.2.4 抑制IGF1R的表达能够抑制VHL-/-肾细胞癌细胞成瘤 | 第48-49页 |
| 3.3 讨论 | 第49-57页 |
| 3.3.1 干扰HRGs对786-0细胞体外增殖没有影响 | 第49页 |
| 3.3.2 VEGF对786-0细胞成瘤能力的影响 | 第49-51页 |
| 3.3.3 CCND1对786-0细胞成瘤能力的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.4 ANGPTL4,EGLN3,ENO2对786-0细胞成瘤能力的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.5 VHL-HIF通路与Glut-1 | 第53-55页 |
| 3.3.6 沉默IGFBP3及IGF1R对786-0细胞成瘤的影响及其机制 | 第55-56页 |
| 3.3.7 HIF-HRGs调节肾细胞癌生长示意图 | 第56-57页 |
| 3.4 小结 | 第57-58页 |
| 全文结论 | 第58-59页 |
| 论文创新点 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-79页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-81页 |
| 综述 肾细胞癌治疗进展综述 | 第81-115页 |
| 综述参考文献 | 第108-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
