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凝乳酶高产菌株的诱变选育及其发酵产酶条件的响应面法优化

摘要第10-11页
ABSTRACT第11-12页
第1章 绪论第13-17页
    引言第13页
    1.1 凝乳酶简介第13-14页
    1.2 凝乳酶产生菌第14-15页
    1.3 发酵凝乳酶工艺的优化第15页
    1.4 展望第15-16页
    1.5 本课题的立题依据和研究主要内容第16-17页
        1.5.1 立题依据第16页
        1.5.2 研究的主要内容第16-17页
第2章 凝乳酶高产菌株诱变条件的选择第17-26页
    引言第17页
    2.1 材料与方法第17-20页
        2.1.1 菌种第17页
        2.1.2 培养基第17-18页
        2.1.3 实验仪器第18页
        2.1.4 实验试剂第18-19页
        2.1.5 实验方法第19-20页
            2.1.5.1 单孢子悬液的制备方法第19页
            2.1.5.2 凝乳酶活力(MCA)测定方法第19页
            2.1.5.3 出发菌株纯化第19页
            2.1.5.4 孢子形成时间的确定第19-20页
            2.1.5.5 诱变剂的选择第20页
            2.1.5.6 硫酸二乙酯(DES)诱变剂量的确定第20页
            2.1.5.7 紫外线(UV)照射时间的确定第20页
    2.2 结果与讨论第20-25页
        2.2.1 出发菌株的确定第20-21页
        2.2.2 孢子形成的时间第21-22页
        2.2.3 诱变剂量的选择第22-25页
            2.2.3.1 硫酸二乙酯(DES)处理时间的确定第22-23页
            2.2.3.2 紫外线(UV)照射时间的确定第23-25页
    2.3 本章小结第25-26页
第3章 凝乳酶高产菌株的诱变处理及筛选第26-36页
    引言第26页
    3.1 材料与方法第26-29页
        3.1.1 菌种第26页
        3.1.2 培养基第26页
        3.1.3 实验仪器第26-27页
        3.1.4 实验试剂第27-28页
        3.1.5 实验方法第28-29页
            3.1.5.1 DES 诱变第28页
            3.1.5.2 UV 诱变第28页
            3.1.5.3 先UV 后DES 诱变第28页
            3.1.5.4 先DES 后UV 诱变第28页
            3.1.5.5 初筛方法第28-29页
            3.1.5.6 复筛方法第29页
            3.1.5.7 凝乳酶活力(MCA)测定方法第29页
    3.2 结果与分析第29-35页
        3.2.1 初筛方法的选择第29-30页
        3.2.2 凝乳酶高产菌株的初筛第30-34页
            3.2.2.1 硫酸二乙酯(DES)诱变初筛第30-31页
            3.2.2.2 紫外线(UV)诱变初筛第31-32页
            3.2.2.3 先UV 后DES 诱变初筛第32-33页
            3.2.2.4 先DES 后UV 诱变初筛第33-34页
        3.2.3 凝乳酶高产菌株的复筛第34-35页
    3.3 本章小结第35-36页
第4章 遗传稳定性试验与发酵产酶品质的分析第36-43页
    引言第36页
    4.1 材料与方法第36-38页
        4.1.1 菌种第36页
        4.1.2 培养基第36页
        4.1.3 实验仪器第36页
        4.1.4 实验试剂第36-37页
        4.1.5 实验方法第37-38页
            4.1.5.1 遗传稳定性试验第37-38页
            4.1.5.2 凝乳酶酶活(MCA)测定方法第38页
            4.1.5.3 蛋白水解活性(PA)的测定第38页
            4.1.5.4 变异菌株发酵液颜色的比较第38页
    4.2 结果与讨论第38-42页
        4.2.1 变异菌株遗传稳定性试验第38-40页
        4.2.2 蛋白酶活力测定标准曲线第40页
        4.2.3 不同菌株发酵产酶品质的研究第40-41页
        4.2.4 变异菌株发酵液颜色的变化第41-42页
    4.3 本章小结第42-43页
第5章 影响凝乳酶高产菌株发酵产酶条件的因素研究第43-58页
    引言第43页
    5.1 材料与方法第43-46页
        5.1.1 菌种第43页
        5.1.2 培养基第43页
        5.1.3 实验仪器第43-44页
        5.1.4 实验试剂第44-45页
        5.1.5 试验方法第45-46页
            5.1.5.1 发酵产酶品质的分析第45页
            5.1.5.2 培养基组分调整的方法第45页
            5.1.5.3 培养条件调整的方法第45页
            5.1.5.4 葡萄糖标准曲线的制作及发酵液残糖的测定第45-46页
    5.2 结果与讨论第46-57页
        5.2.1 碳、氮源及其浓度对发酵产酶的影响第46-49页
            5.2.1.1 不同碳源及葡萄糖浓度对产酶的影响第46-47页
            5.2.1.2 不同氮源对及蛋白胨浓度对产酶的影响第47-48页
            5.2.1.3 酵母膏浓度对产酶的影响第48-49页
        5.2.2 金属离子、乳化剂及其浓度对发酵产酶的影响第49-52页
            5.2.2.1 金属离子与表面活化剂的选择第49-50页
            5.2.2.2 CaCl_2 浓度对产酶的影响第50-51页
            5.2.2.3 MnSO_4 浓度对产酶的影响第51页
            5.2.2.4 吐温-80 浓度对产酶的影响第51-52页
        5.2.3 培养条件对发酵产酶的影响第52-57页
            5.2.3.1 起始pH 对产酶的影响第52-53页
            5.2.3.2 装液量对产酶的影响第53-54页
            5.2.3.3 接种量对产酶的影响第54页
            5.2.3.4 培养温度对产酶的影响第54-55页
            5.2.3.5 转速对产酶的影响第55页
            5.2.3.6 培养时间对产酶的影响第55-56页
            5.2.3.7 葡萄糖标准曲线的绘制及发酵液残糖分析第56-57页
    5.3 本章小结第57-58页
第6章 凝乳酶高产菌株发酵产酶条件的响应面法优化第58-73页
    引言第58页
    6.1 材料与方法第58-61页
        6.1.1 菌种第58页
        6.1.2 培养基第58页
        6.1.3 实验仪器第58-59页
        6.1.4 实验试剂第59页
        6.1.5 试验方法第59-61页
            6.1.5.1 凝乳酶酶活(MCA)测定方法第59页
            6.1.5.2 Plackett-Burman 法筛选产酶显著因子第59-60页
            6.1.5.3 Box-Behnken 法研究显著因子交互作用与最优产酶条件第60页
            6.1.5.4 标准溶液的配制方法第60页
            6.1.5.5 最优发酵产酶条件的验证第60-61页
    6.2 结果与讨论第61-71页
        6.2.1 筛选对产酶影响的显著因子第61-63页
            6.2.1.1 Plackett-Burman 试验的因素与水平第61页
            6.2.1.2 Plackett-Burman 试验设计与结果第61-62页
            6.2.1.3 Plackett-Burman 试验的结果分析第62-63页
        6.2.2 显著因子间交互作用的研究及产酶条件优化第63-71页
            6.2.2.1 Box-Behnken 试验的因素与水平第63页
            6.2.2.2 Box-Behnken 试验设计与结果第63-64页
            6.2.2.3 Box-Behnken 试验的结果分析第64-68页
            6.2.2.4 Box-Behnken 试验优化的产酶条件第68-70页
            6.2.2.5 验证试验第70-71页
    6.3 本章小结第71-73页
第7章 全文结论与展望第73-75页
    7.1 全文总结第73-74页
    7.2 展望第74-75页
参考文献第75-79页
致谢第79-80页
在学期间主要科研成果第80页

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