摘要 | 第10-11页 |
ABSTRACT | 第11-12页 |
第1章 绪论 | 第13-17页 |
引言 | 第13页 |
1.1 凝乳酶简介 | 第13-14页 |
1.2 凝乳酶产生菌 | 第14-15页 |
1.3 发酵凝乳酶工艺的优化 | 第15页 |
1.4 展望 | 第15-16页 |
1.5 本课题的立题依据和研究主要内容 | 第16-17页 |
1.5.1 立题依据 | 第16页 |
1.5.2 研究的主要内容 | 第16-17页 |
第2章 凝乳酶高产菌株诱变条件的选择 | 第17-26页 |
引言 | 第17页 |
2.1 材料与方法 | 第17-20页 |
2.1.1 菌种 | 第17页 |
2.1.2 培养基 | 第17-18页 |
2.1.3 实验仪器 | 第18页 |
2.1.4 实验试剂 | 第18-19页 |
2.1.5 实验方法 | 第19-20页 |
2.1.5.1 单孢子悬液的制备方法 | 第19页 |
2.1.5.2 凝乳酶活力(MCA)测定方法 | 第19页 |
2.1.5.3 出发菌株纯化 | 第19页 |
2.1.5.4 孢子形成时间的确定 | 第19-20页 |
2.1.5.5 诱变剂的选择 | 第20页 |
2.1.5.6 硫酸二乙酯(DES)诱变剂量的确定 | 第20页 |
2.1.5.7 紫外线(UV)照射时间的确定 | 第20页 |
2.2 结果与讨论 | 第20-25页 |
2.2.1 出发菌株的确定 | 第20-21页 |
2.2.2 孢子形成的时间 | 第21-22页 |
2.2.3 诱变剂量的选择 | 第22-25页 |
2.2.3.1 硫酸二乙酯(DES)处理时间的确定 | 第22-23页 |
2.2.3.2 紫外线(UV)照射时间的确定 | 第23-25页 |
2.3 本章小结 | 第25-26页 |
第3章 凝乳酶高产菌株的诱变处理及筛选 | 第26-36页 |
引言 | 第26页 |
3.1 材料与方法 | 第26-29页 |
3.1.1 菌种 | 第26页 |
3.1.2 培养基 | 第26页 |
3.1.3 实验仪器 | 第26-27页 |
3.1.4 实验试剂 | 第27-28页 |
3.1.5 实验方法 | 第28-29页 |
3.1.5.1 DES 诱变 | 第28页 |
3.1.5.2 UV 诱变 | 第28页 |
3.1.5.3 先UV 后DES 诱变 | 第28页 |
3.1.5.4 先DES 后UV 诱变 | 第28页 |
3.1.5.5 初筛方法 | 第28-29页 |
3.1.5.6 复筛方法 | 第29页 |
3.1.5.7 凝乳酶活力(MCA)测定方法 | 第29页 |
3.2 结果与分析 | 第29-35页 |
3.2.1 初筛方法的选择 | 第29-30页 |
3.2.2 凝乳酶高产菌株的初筛 | 第30-34页 |
3.2.2.1 硫酸二乙酯(DES)诱变初筛 | 第30-31页 |
3.2.2.2 紫外线(UV)诱变初筛 | 第31-32页 |
3.2.2.3 先UV 后DES 诱变初筛 | 第32-33页 |
3.2.2.4 先DES 后UV 诱变初筛 | 第33-34页 |
3.2.3 凝乳酶高产菌株的复筛 | 第34-35页 |
3.3 本章小结 | 第35-36页 |
第4章 遗传稳定性试验与发酵产酶品质的分析 | 第36-43页 |
引言 | 第36页 |
4.1 材料与方法 | 第36-38页 |
4.1.1 菌种 | 第36页 |
4.1.2 培养基 | 第36页 |
4.1.3 实验仪器 | 第36页 |
4.1.4 实验试剂 | 第36-37页 |
4.1.5 实验方法 | 第37-38页 |
4.1.5.1 遗传稳定性试验 | 第37-38页 |
4.1.5.2 凝乳酶酶活(MCA)测定方法 | 第38页 |
4.1.5.3 蛋白水解活性(PA)的测定 | 第38页 |
4.1.5.4 变异菌株发酵液颜色的比较 | 第38页 |
4.2 结果与讨论 | 第38-42页 |
4.2.1 变异菌株遗传稳定性试验 | 第38-40页 |
4.2.2 蛋白酶活力测定标准曲线 | 第40页 |
4.2.3 不同菌株发酵产酶品质的研究 | 第40-41页 |
4.2.4 变异菌株发酵液颜色的变化 | 第41-42页 |
4.3 本章小结 | 第42-43页 |
第5章 影响凝乳酶高产菌株发酵产酶条件的因素研究 | 第43-58页 |
引言 | 第43页 |
5.1 材料与方法 | 第43-46页 |
5.1.1 菌种 | 第43页 |
5.1.2 培养基 | 第43页 |
5.1.3 实验仪器 | 第43-44页 |
5.1.4 实验试剂 | 第44-45页 |
5.1.5 试验方法 | 第45-46页 |
5.1.5.1 发酵产酶品质的分析 | 第45页 |
5.1.5.2 培养基组分调整的方法 | 第45页 |
5.1.5.3 培养条件调整的方法 | 第45页 |
5.1.5.4 葡萄糖标准曲线的制作及发酵液残糖的测定 | 第45-46页 |
5.2 结果与讨论 | 第46-57页 |
5.2.1 碳、氮源及其浓度对发酵产酶的影响 | 第46-49页 |
5.2.1.1 不同碳源及葡萄糖浓度对产酶的影响 | 第46-47页 |
5.2.1.2 不同氮源对及蛋白胨浓度对产酶的影响 | 第47-48页 |
5.2.1.3 酵母膏浓度对产酶的影响 | 第48-49页 |
5.2.2 金属离子、乳化剂及其浓度对发酵产酶的影响 | 第49-52页 |
5.2.2.1 金属离子与表面活化剂的选择 | 第49-50页 |
5.2.2.2 CaCl_2 浓度对产酶的影响 | 第50-51页 |
5.2.2.3 MnSO_4 浓度对产酶的影响 | 第51页 |
5.2.2.4 吐温-80 浓度对产酶的影响 | 第51-52页 |
5.2.3 培养条件对发酵产酶的影响 | 第52-57页 |
5.2.3.1 起始pH 对产酶的影响 | 第52-53页 |
5.2.3.2 装液量对产酶的影响 | 第53-54页 |
5.2.3.3 接种量对产酶的影响 | 第54页 |
5.2.3.4 培养温度对产酶的影响 | 第54-55页 |
5.2.3.5 转速对产酶的影响 | 第55页 |
5.2.3.6 培养时间对产酶的影响 | 第55-56页 |
5.2.3.7 葡萄糖标准曲线的绘制及发酵液残糖分析 | 第56-57页 |
5.3 本章小结 | 第57-58页 |
第6章 凝乳酶高产菌株发酵产酶条件的响应面法优化 | 第58-73页 |
引言 | 第58页 |
6.1 材料与方法 | 第58-61页 |
6.1.1 菌种 | 第58页 |
6.1.2 培养基 | 第58页 |
6.1.3 实验仪器 | 第58-59页 |
6.1.4 实验试剂 | 第59页 |
6.1.5 试验方法 | 第59-61页 |
6.1.5.1 凝乳酶酶活(MCA)测定方法 | 第59页 |
6.1.5.2 Plackett-Burman 法筛选产酶显著因子 | 第59-60页 |
6.1.5.3 Box-Behnken 法研究显著因子交互作用与最优产酶条件 | 第60页 |
6.1.5.4 标准溶液的配制方法 | 第60页 |
6.1.5.5 最优发酵产酶条件的验证 | 第60-61页 |
6.2 结果与讨论 | 第61-71页 |
6.2.1 筛选对产酶影响的显著因子 | 第61-63页 |
6.2.1.1 Plackett-Burman 试验的因素与水平 | 第61页 |
6.2.1.2 Plackett-Burman 试验设计与结果 | 第61-62页 |
6.2.1.3 Plackett-Burman 试验的结果分析 | 第62-63页 |
6.2.2 显著因子间交互作用的研究及产酶条件优化 | 第63-71页 |
6.2.2.1 Box-Behnken 试验的因素与水平 | 第63页 |
6.2.2.2 Box-Behnken 试验设计与结果 | 第63-64页 |
6.2.2.3 Box-Behnken 试验的结果分析 | 第64-68页 |
6.2.2.4 Box-Behnken 试验优化的产酶条件 | 第68-70页 |
6.2.2.5 验证试验 | 第70-71页 |
6.3 本章小结 | 第71-73页 |
第7章 全文结论与展望 | 第73-75页 |
7.1 全文总结 | 第73-74页 |
7.2 展望 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
在学期间主要科研成果 | 第80页 |