摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
缩写词 | 第7-11页 |
前言 | 第11-21页 |
·逆境胁迫对植物的伤害 | 第11页 |
·ABA 与逆境胁迫 | 第11-14页 |
·植物干旱应答反应及与 ABA 的关系 | 第12-13页 |
·脱落酸与其他胁迫 | 第13-14页 |
·ABA 在生长发育中的作用 | 第14-15页 |
·ABA 受体及信号转导的研究 | 第15-17页 |
·ABA 与其它激素的互作 | 第17-18页 |
·细胞色素 P450 超家族与激素代谢 | 第18页 |
·化学诱导型启动子 XVE 系统原理及特点 | 第18-19页 |
·立题依据 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-35页 |
·实验仪器 | 第21页 |
·实验材料、载体和菌株 | 第21-22页 |
·材料 | 第21页 |
·菌株与质粒载体 | 第21-22页 |
·实验试剂 | 第22页 |
·常用溶液及培养基的配制 | 第22-23页 |
·常用溶液的配制 | 第22页 |
·常用培养基的配制 | 第22-23页 |
·拟南芥 DNA 抽提液 | 第23页 |
·拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达溶液 | 第23页 |
·抗生素的配制 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-31页 |
·拟南芥种植方法 | 第23-24页 |
·拟南芥杂交方法 | 第24页 |
·拟南芥基因组 DNA 提取方法 | 第24页 |
·Trizol 法提取拟南芥总 RNA | 第24页 |
·反转录制备拟南芥 cDNA | 第24-25页 |
·目的基因片段的扩增 | 第25-26页 |
·酶切产物的回收与纯化 | 第26-27页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第27页 |
·酶切产物的连接 | 第27-28页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第28-29页 |
·重组质粒的鉴定 | 第29页 |
·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第29-30页 |
·PEG 介导拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达方法 | 第30页 |
·共聚焦显微镜观察 GFP 与叶绿体自发荧光共定位 | 第30-31页 |
·β-葡糖苷酸酶(GUS)的组织化学染色 | 第31页 |
·拟南芥潜在转基因植物的筛选 | 第31页 |
·TAIL-PCR 技术 | 第31-35页 |
·TAIL-PCR 原理 | 第31-33页 |
·TAIL-PCR 的反应条件和引物设计 | 第33-34页 |
·产物分析 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-55页 |
·突变体的获得 | 第35-36页 |
·利用 TAIL-PCR 方法克隆拟南芥 GAR16 基因 | 第36-39页 |
·突变体 gar16 的 T-DNA 插入鉴定及 TAIL-PCR | 第36-37页 |
·TAIL-PCR 产物测序及序列比对 | 第37-38页 |
·T-DNA 插入侧翼序列位置验证 | 第38-39页 |
·T-DNA 插入对基因 GAR16 表达的影响 | 第39页 |
·突变体 gar16 的表型分析 | 第39-49页 |
·ABA 对突变体 gar16 和 WT 萌发及子叶生长的影响 | 第40-42页 |
·甘露醇、NaCl、PAC 和 SA 等对 gar16 和 WT 萌发及子叶生长的影响 | 第42-44页 |
·ABA 对突变体 gar16 和 WT 根伸长的影响 | 第44-46页 |
·H2O2对突变体 gar16 和 WT 根伸长的影响 | 第46-47页 |
·其他胁迫处理对突变体 gar16 和 WT 根伸长的影响 | 第47-49页 |
·GAR16 对相关基因表达的影响 | 第49页 |
·GAR16 与多种胁迫应答 | 第49-50页 |
·GAR16 的组织定位 | 第50-52页 |
·相关载体的构建及转基因植株的筛选 | 第50-51页 |
·GUS 染色及 RT-PCR 方法分析 GAR16 的组织表达情况 | 第51-52页 |
·GAR16 的亚细胞定位 | 第52-55页 |
·相关的载体构建 | 第52页 |
·GAR16 蛋白亚细胞定位分析 | 第52-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
致谢 | 第65-66页 |