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异质cell-in-cell结构的生物学特征及效应研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
中英文对照和缩略词表第14-15页
第一章 绪论第15-31页
    1.1 Cell-in-cell生物学结构的研究第15-23页
        1.1.1 Cell-in-cell形态学特征和分类第15-16页
        1.1.2 Cell-in-cell的形成机制及命运第16-18页
        1.1.3 Cell-in-cell的生物学功能及意义第18-23页
    1.2 Cell-in-cell的研究方法第23-26页
        1.2.1 在单个细胞水平cell-in-cell的方法学建立第23-25页
        1.2.2 在群体水平cell-in-cell的方法学建立第25-26页
    1.3 Cell-in-cell与单克隆抗体治疗第26-29页
        1.3.1 单克隆抗体抗肿瘤机制第26-28页
        1.3.2 单克隆抗体的临床应用第28-29页
    1.4 本课题的目的意义和研究内容第29-31页
        1.4.1 目的意义第29-30页
        1.4.2 研究内容第30-31页
第二章 Emperipolesis的流式检测与分选方法学建立第31-49页
    2.1 前言第31页
    2.2 材料与方法第31-35页
        2.2.1 实验材料第31-32页
        2.2.2 Emperipolesis反应体系的建立第32-33页
        2.2.3 Emperipolesis人工计数第33页
        2.2.4 Emperipolesis流式计数与分选第33页
        2.2.5 Giemsa染色第33-34页
        2.2.6 活细胞实时观测和缩时电影摄制第34页
        2.2.7 异质cell-in-cell单个细胞分选及克隆团形成第34页
        2.2.8 杀伤实验(LDH释放法)第34-35页
    2.3 结果与讨论第35-47页
        2.3.1 单细胞悬液制备的优化第35-37页
        2.3.2 运用荧光染色和流式双色分析检测并分选Emperipolesis形成的cell-in-cell结构第37-39页
        2.3.3 测定流式细胞仪检测异质cell-in-cell细胞群的准确率第39-42页
        2.3.4 流式检测及人工计数不同效靶细胞通过emperipolesis形成异质cell-in-cell概率第42-43页
        2.3.5 流式分选的cell-in-cell细胞群的二次cell-in-cell形成及杀伤敏感性第43-44页
        2.3.6 检测流式分选的cell-in-cell细胞群与EMT转化第44-47页
    2.4 本章小结第47-49页
第三章 异质cell-in-cell的形态及动力学研究第49-72页
    3.1 前言第49-50页
    3.2 材料与方法第50-55页
        3.2.1 实验材料第50页
        3.2.2 异质cell-in-cell检测第50-51页
        3.2.3 表面生物素酰化第51页
        3.2.4 Lyso Tracker和Mito Tracker染色第51页
        3.2.5 透射电镜标本的制作第51-52页
        3.2.6 缩时显微摄影time-lapse技术第52页
        3.2.7 免疫荧光染色第52页
        3.2.8 Wsetern blot第52-53页
        3.2.9 Transwell方法检测细胞迁移率第53页
        3.2.10 细胞饥饿实验第53页
        3.2.11 趋化因子检测第53-54页
        3.2.12 细胞转染第54页
        3.2.13 流式细胞术检测样品第54-55页
    3.3 结果与讨论第55-71页
        3.3.1 Cell-in-cell形态学研究第55-57页
        3.3.2 Cell-in-cell有别于细胞吞噬第57-58页
        3.3.3 效应细胞在cell-in-cell形成中的极化第58-60页
        3.3.4 细胞骨架重排影响效应细胞在cell-in-cell形成中的极化第60-62页
        3.3.5 信号通路影响效应细胞极化第62-65页
        3.3.6 趋化因子影响效应细胞极化第65-71页
    3.4 本章小结第71-72页
第四章 异质cell-in-cell的细胞生物学效应第72-94页
    4.1 前言第72-75页
    4.2 材料与方法第75-79页
        4.2.1 实验材料第75-76页
        4.2.2 异质cell-in-cell检测第76页
        4.2.3 效靶细胞死亡计数第76页
        4.2.4 Lyso Tracker和Mito Tracker染色第76页
        4.2.5 PEG诱导多倍体形成第76-77页
        4.2.6 缩时显微摄影time-lapse技术第77页
        4.2.7 免疫荧光染色第77页
        4.2.8 囊泡形成的计数第77-78页
        4.2.9 多倍体分选第78页
        4.2.10 组织标本的处理及HE染色第78-79页
        4.2.11 组织切片免疫荧光染色第79页
    4.3 结果与讨论第79-93页
        4.3.1 Cell-in-cell与效应细胞胞内分裂第79-80页
        4.3.2 异质cell-in-cell与靶细胞异倍体形成第80-81页
        4.3.3 异质cell-in-cell与多倍体靶细胞第81-82页
        4.3.4 异质cell-in-cell与效靶细胞死亡第82-86页
        4.3.5 囊泡与异质Cell-in-cel的效靶细胞死亡第86-90页
        4.3.6 Cell-in-cell与疾病第90-93页
    4.4 本章小结第93-94页
第五章 抗体介导的cell-in-cell效应第94-108页
    5.1 前言第94-96页
    5.2 材料与方法第96-98页
        5.2.1 实验材料第96页
        5.2.2 PBMC的提纯第96页
        5.2.3 乳腺癌细胞抗原检测第96-97页
        5.2.4 PBMC的(Fc-gamma receptors) FcγRⅢ测定第97页
        5.2.5 ADCC检测第97-98页
    5.3 结果与讨论第98-106页
        5.3.1 检测靶细胞Her2 抗原及效应细胞Fc受体的表达第98-99页
        5.3.2 不同抗体浓度下的ADCC及cell-in-cell效应第99-101页
        5.3.3 不同作用时间下的ADCC及cell-in-cell效应第101-104页
        5.3.4 抗体介导的异质cell-in-cell的胞内杀伤和胞内死亡第104-105页
        5.3.5 囊泡对抗体介导的胞内杀伤和胞内死亡的影响第105-106页
    5.4 本章小结第106-108页
结论与展望第108-112页
    结论第108-110页
    创新性成果第110页
    展望第110-112页
参考文献第112-121页
攻读博士学位期间取得的研究成果第121-123页
致谢第123-125页
附件第125页

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