摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
中英文对照和缩略词表 | 第14-15页 |
第一章 绪论 | 第15-31页 |
1.1 Cell-in-cell生物学结构的研究 | 第15-23页 |
1.1.1 Cell-in-cell形态学特征和分类 | 第15-16页 |
1.1.2 Cell-in-cell的形成机制及命运 | 第16-18页 |
1.1.3 Cell-in-cell的生物学功能及意义 | 第18-23页 |
1.2 Cell-in-cell的研究方法 | 第23-26页 |
1.2.1 在单个细胞水平cell-in-cell的方法学建立 | 第23-25页 |
1.2.2 在群体水平cell-in-cell的方法学建立 | 第25-26页 |
1.3 Cell-in-cell与单克隆抗体治疗 | 第26-29页 |
1.3.1 单克隆抗体抗肿瘤机制 | 第26-28页 |
1.3.2 单克隆抗体的临床应用 | 第28-29页 |
1.4 本课题的目的意义和研究内容 | 第29-31页 |
1.4.1 目的意义 | 第29-30页 |
1.4.2 研究内容 | 第30-31页 |
第二章 Emperipolesis的流式检测与分选方法学建立 | 第31-49页 |
2.1 前言 | 第31页 |
2.2 材料与方法 | 第31-35页 |
2.2.1 实验材料 | 第31-32页 |
2.2.2 Emperipolesis反应体系的建立 | 第32-33页 |
2.2.3 Emperipolesis人工计数 | 第33页 |
2.2.4 Emperipolesis流式计数与分选 | 第33页 |
2.2.5 Giemsa染色 | 第33-34页 |
2.2.6 活细胞实时观测和缩时电影摄制 | 第34页 |
2.2.7 异质cell-in-cell单个细胞分选及克隆团形成 | 第34页 |
2.2.8 杀伤实验(LDH释放法) | 第34-35页 |
2.3 结果与讨论 | 第35-47页 |
2.3.1 单细胞悬液制备的优化 | 第35-37页 |
2.3.2 运用荧光染色和流式双色分析检测并分选Emperipolesis形成的cell-in-cell结构 | 第37-39页 |
2.3.3 测定流式细胞仪检测异质cell-in-cell细胞群的准确率 | 第39-42页 |
2.3.4 流式检测及人工计数不同效靶细胞通过emperipolesis形成异质cell-in-cell概率 | 第42-43页 |
2.3.5 流式分选的cell-in-cell细胞群的二次cell-in-cell形成及杀伤敏感性 | 第43-44页 |
2.3.6 检测流式分选的cell-in-cell细胞群与EMT转化 | 第44-47页 |
2.4 本章小结 | 第47-49页 |
第三章 异质cell-in-cell的形态及动力学研究 | 第49-72页 |
3.1 前言 | 第49-50页 |
3.2 材料与方法 | 第50-55页 |
3.2.1 实验材料 | 第50页 |
3.2.2 异质cell-in-cell检测 | 第50-51页 |
3.2.3 表面生物素酰化 | 第51页 |
3.2.4 Lyso Tracker和Mito Tracker染色 | 第51页 |
3.2.5 透射电镜标本的制作 | 第51-52页 |
3.2.6 缩时显微摄影time-lapse技术 | 第52页 |
3.2.7 免疫荧光染色 | 第52页 |
3.2.8 Wsetern blot | 第52-53页 |
3.2.9 Transwell方法检测细胞迁移率 | 第53页 |
3.2.10 细胞饥饿实验 | 第53页 |
3.2.11 趋化因子检测 | 第53-54页 |
3.2.12 细胞转染 | 第54页 |
3.2.13 流式细胞术检测样品 | 第54-55页 |
3.3 结果与讨论 | 第55-71页 |
3.3.1 Cell-in-cell形态学研究 | 第55-57页 |
3.3.2 Cell-in-cell有别于细胞吞噬 | 第57-58页 |
3.3.3 效应细胞在cell-in-cell形成中的极化 | 第58-60页 |
3.3.4 细胞骨架重排影响效应细胞在cell-in-cell形成中的极化 | 第60-62页 |
3.3.5 信号通路影响效应细胞极化 | 第62-65页 |
3.3.6 趋化因子影响效应细胞极化 | 第65-71页 |
3.4 本章小结 | 第71-72页 |
第四章 异质cell-in-cell的细胞生物学效应 | 第72-94页 |
4.1 前言 | 第72-75页 |
4.2 材料与方法 | 第75-79页 |
4.2.1 实验材料 | 第75-76页 |
4.2.2 异质cell-in-cell检测 | 第76页 |
4.2.3 效靶细胞死亡计数 | 第76页 |
4.2.4 Lyso Tracker和Mito Tracker染色 | 第76页 |
4.2.5 PEG诱导多倍体形成 | 第76-77页 |
4.2.6 缩时显微摄影time-lapse技术 | 第77页 |
4.2.7 免疫荧光染色 | 第77页 |
4.2.8 囊泡形成的计数 | 第77-78页 |
4.2.9 多倍体分选 | 第78页 |
4.2.10 组织标本的处理及HE染色 | 第78-79页 |
4.2.11 组织切片免疫荧光染色 | 第79页 |
4.3 结果与讨论 | 第79-93页 |
4.3.1 Cell-in-cell与效应细胞胞内分裂 | 第79-80页 |
4.3.2 异质cell-in-cell与靶细胞异倍体形成 | 第80-81页 |
4.3.3 异质cell-in-cell与多倍体靶细胞 | 第81-82页 |
4.3.4 异质cell-in-cell与效靶细胞死亡 | 第82-86页 |
4.3.5 囊泡与异质Cell-in-cel的效靶细胞死亡 | 第86-90页 |
4.3.6 Cell-in-cell与疾病 | 第90-93页 |
4.4 本章小结 | 第93-94页 |
第五章 抗体介导的cell-in-cell效应 | 第94-108页 |
5.1 前言 | 第94-96页 |
5.2 材料与方法 | 第96-98页 |
5.2.1 实验材料 | 第96页 |
5.2.2 PBMC的提纯 | 第96页 |
5.2.3 乳腺癌细胞抗原检测 | 第96-97页 |
5.2.4 PBMC的(Fc-gamma receptors) FcγRⅢ测定 | 第97页 |
5.2.5 ADCC检测 | 第97-98页 |
5.3 结果与讨论 | 第98-106页 |
5.3.1 检测靶细胞Her2 抗原及效应细胞Fc受体的表达 | 第98-99页 |
5.3.2 不同抗体浓度下的ADCC及cell-in-cell效应 | 第99-101页 |
5.3.3 不同作用时间下的ADCC及cell-in-cell效应 | 第101-104页 |
5.3.4 抗体介导的异质cell-in-cell的胞内杀伤和胞内死亡 | 第104-105页 |
5.3.5 囊泡对抗体介导的胞内杀伤和胞内死亡的影响 | 第105-106页 |
5.4 本章小结 | 第106-108页 |
结论与展望 | 第108-112页 |
结论 | 第108-110页 |
创新性成果 | 第110页 |
展望 | 第110-112页 |
参考文献 | 第112-121页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第121-123页 |
致谢 | 第123-125页 |
附件 | 第125页 |