| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一部分 :文献综述稻米淀粉合成相关酶及淀粉品质改良研究进展 | 第11-23页 |
| 摘要 | 第11-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 前言 | 第13页 |
| 1.稻米淀粉的结构和组成及淀粉合成相关酶 | 第13-16页 |
| ·稻米淀粉的结构和组成 | 第13页 |
| ·控制稻米淀粉合成的关键酶 | 第13-16页 |
| ·焦磷酸化酶(AGPase) | 第14-15页 |
| ·颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS) | 第15页 |
| ·可溶性淀粉合成酶(SSS) | 第15页 |
| ·淀粉分支酶(SBE) | 第15-16页 |
| ·淀粉脱分支酶(SDBE) | 第16页 |
| 2.Waxy基因分子生物学研究进展 | 第16-18页 |
| ·水稻蜡质基因(Waxy基因)的克隆和序列结构 | 第16-17页 |
| ·Waxy基因转录水平的表达调控 | 第17-18页 |
| ·Waxy基因转录后水平的调控 | 第18页 |
| 3.改良稻米淀粉品质的研究进展 | 第18-21页 |
| ·分子标记辅助选择改良稻米淀粉品质 | 第18-20页 |
| ·单核苷酸多态性标记 | 第19页 |
| ·微卫星标记 | 第19页 |
| ·其它分子标记 | 第19-20页 |
| ·转基因技术改良稻米淀粉品质 | 第20-21页 |
| ·转anti-Waxy基因 | 第20-21页 |
| ·转其它基因 | 第21页 |
| 4.展望 | 第21-23页 |
| 第二部分 :研究论文利用含有双份anti-Waxy基因拷贝的表达载体p13AWY-2改良两系不育系水稻261S品质及培育杂交软米新组合 | 第23-59页 |
| 摘要 | 第23-24页 |
| Abstract | 第24-26页 |
| 前言 | 第26-27页 |
| 一、p13AWY-2表达载体转化两系不育系水稻261S | 第27-31页 |
| 1.试验材料 | 第27-28页 |
| ·供试水稻品种 | 第27页 |
| ·菌株及质粒 | 第27-28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| 2.试验方法 | 第28页 |
| 3.结果与分析 | 第28-31页 |
| ·水稻抗性愈伤组织的诱导 | 第28页 |
| ·水稻抗性愈伤组织的继代培养 | 第28页 |
| ·水稻转化后的共培养 | 第28页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第28-29页 |
| ·抗性愈伤组织的植株再生 | 第29-31页 |
| 二、转基因水稻后代分析 | 第31-49页 |
| 1.试验材料 | 第31页 |
| ·供试水稻材料 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| 2.试验方法 | 第31-37页 |
| ·转基因水稻植株总DNA的PCR分析 | 第31-32页 |
| ·T_0代转基因植株gus基因PCR分析 | 第31-32页 |
| ·转基因植株anti-Waxy基因PCR分析 | 第32页 |
| ·共转化水稻后代种子的GUS活性组织化学分析 | 第32页 |
| ·试剂制备 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32页 |
| ·转基因水稻后代种子糙米外观透明度遗传分析 | 第32页 |
| ·纯合转基因水稻的获得 | 第32页 |
| ·转基因水稻花粉检测 | 第32-33页 |
| ·转基因水稻的RT-PCR分析 | 第33-34页 |
| ·水稻未成熟种子RNA的提取与检测 | 第33页 |
| ·RT-PCR检测Waxy基因的表达 | 第33-34页 |
| ·转基因后代Wx蛋白的SDS-PAGE分析 | 第34-35页 |
| ·Wx蛋白的提取 | 第34-35页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行Wx蛋白分析 | 第35页 |
| ·转基因水稻部分农艺性状、产量性状及外观性状调查 | 第35-36页 |
| ·成熟种子稻米直链淀粉含量的测定 | 第36-37页 |
| ·水稻直链淀粉含量标准曲线的绘制 | 第36页 |
| ·稻米样品直链淀粉含量的测定 | 第36-37页 |
| ·转基因水稻扫描电镜观察 | 第37页 |
| ·转基因水稻糙米粒型分析 | 第37页 |
| 3.结果与分析 | 第37-49页 |
| ·转基因T_0植株的PCR检测 | 第37-38页 |
| ·转基因T_1代种子GUS检测 | 第38页 |
| ·转基因水稻后代植株目的基因PCR分析及糙米透明度观察 | 第38-41页 |
| ·转基因水稻I_2-KI染色结果 | 第41-43页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测分析 | 第43-44页 |
| ·总RNA的检测 | 第43页 |
| ·RT-PCR检测分析 | 第43-44页 |
| ·Wx蛋白的SDS-PAGE分析 | 第44-45页 |
| ·转基因水稻后代植株部分农艺性状、产量性状及外观性状调查 | 第45-46页 |
| ·对照及转基因后代种子的直链淀粉含量测定 | 第46-47页 |
| ·转基因水稻后代种子扫描电镜观察 | 第47-48页 |
| ·转基因水稻后代蜡质糙米和261S对照糙米长、宽和厚度分析 | 第48-49页 |
| 三、利用转基因261S水稻培育香型杂交稻新组合 | 第49-55页 |
| 1.试验材料 | 第49页 |
| ·供试水稻品种 | 第49页 |
| 2.试验方法 | 第49-50页 |
| ·培育"闵优香粳"及新杂交稻组合 | 第49页 |
| ·杂交稻F_1植株目的基因检测 | 第49页 |
| ·杂交稻部分农艺性状及产量性状调查 | 第49-50页 |
| ·杂交稻F_2稻谷糙米透明度分析及蜡质和非蜡质糙米粒长、宽和厚度测量 | 第50页 |
| ·杂交稻F_2稻谷理化指标测定 | 第50页 |
| 3.结果与分析 | 第50-55页 |
| ·F_1植株anti-Waxy基因的PCR分析 | 第50-51页 |
| ·3种杂交稻组合F_1植株大田种植观察及部分性状比较 | 第51-52页 |
| ·杂交稻F_2稻谷糙米外观分析 | 第52-53页 |
| ·由转基因不育系培育杂交稻F_2种子蜡质及非蜡质糙米长、宽和厚度分析 | 第53-54页 |
| ·杂交稻理化指标分析 | 第54-55页 |
| 讨论 | 第55-59页 |
| 1.改良两系不育系水稻261S的意义 | 第55页 |
| 2.利用含有双份anti-Waxy基因拷贝安全性表达载体转化水稻 | 第55-56页 |
| 3.培育具有转基因安全性的清香型"杂交软米" | 第56页 |
| 4.转anti-Waxy基因对稻米粒重及产量的影响 | 第56-57页 |
| 5.转anti-Waxy基因对稻米胚乳细胞淀粉结构及粒重和体积的影响 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 中英文对照 | 第67-73页 |
| 研究生期间发表及撰写的论文和参与的研究项目 | 第73页 |
