| 英文缩略词表 | 第8-10页 |
| 中文摘要 | 第10-15页 |
| 英文摘要 | 第15-19页 |
| 1 前言 | 第20-24页 |
| 2 实验材料 | 第24-29页 |
| 2.1 细胞来源 | 第24页 |
| 2.2 动物 | 第24页 |
| 2.3 药物 | 第24页 |
| 2.4 试剂 | 第24-27页 |
| 2.5 仪器与设备 | 第27-29页 |
| 3 实验方法 | 第29-37页 |
| 3.1 细胞的培养 | 第29页 |
| 3.2 细胞冻存 | 第29页 |
| 3.3 细胞的复苏 | 第29页 |
| 3.4 SDS-PAGE电泳 | 第29-30页 |
| 3.5 Western-Blotting实验 | 第30-31页 |
| 3.6 流式细胞术测定细胞膜表面HER2受体表达 | 第31页 |
| 3.7 细胞增殖抑制实验 | 第31页 |
| 3.8 构建HER2高表达的MCF-7细胞株 | 第31-32页 |
| 3.9 曲妥珠单抗耐药的人乳腺癌细胞株BT-474/HR的制备 | 第32-33页 |
| 3.10 构建HER2高表达的4T1-Luci乳腺癌细胞系 | 第33-34页 |
| 3.11 抗体依赖细胞介导的细胞毒性(ADCC)实验 | 第34页 |
| 3.12 体内动物实验 | 第34-35页 |
| 3.13 免疫荧光检测抗体内吞 | 第35-36页 |
| 3.14 流式细胞术检测抗体内吞 | 第36页 |
| 3.15 统计分析 | 第36-37页 |
| 4. 实验结果 | 第37-74页 |
| 4.1 构建HER2高表达的MCF-7/HER2细胞株 | 第37-39页 |
| 4.1.1 Western Blotting鉴定MCF-7/HER2表达 | 第37-38页 |
| 4.1.2 流式细胞术鉴定MCF-7/HER2细胞膜表面HER2表达 | 第38-39页 |
| 4.2 构建曲妥珠单抗耐药的人乳腺癌细胞株BT-474/HR | 第39-43页 |
| 4.2.1 曲妥珠单抗耐药细胞株BT-474/HR的形态学观察 | 第39页 |
| 4.2.2 曲妥珠单抗耐药细胞株BT-474/HR的体外增殖及其对曲妥珠单抗的敏感性测定 | 第39-40页 |
| 4.2.3 曲妥珠单抗耐药细胞株BT-474/HR细胞膜表面的HER2表达 | 第40-41页 |
| 4.2.4 曲妥珠单抗耐药细胞株BT-474/HR中EGFR家族受体表达和下游信号通路变化 | 第41-43页 |
| 4.3 构建小鼠乳腺癌细胞系细胞株4T1-HER2-Luci | 第43-44页 |
| 4.3.1 小鼠乳腺癌细胞系4T1-Luci荧光素酶表达测定 | 第43页 |
| 4.3.2 HER2高表达小鼠乳腺癌细胞系4T1-HER2-Luci的鉴定 | 第43-44页 |
| 4.4 HuA21抗体体外对肿瘤细胞的增殖抑制 | 第44-48页 |
| 4.4.1 HuA21抗体对BT-474乳腺癌细胞的增殖抑制 | 第44-45页 |
| 4.4.2 HuA21抗体对曲妥珠单抗耐药乳腺癌细胞BT-474/HR的增殖抑制 | 第45-46页 |
| 4.4.3 HuA21抗体对SKOV3卵巢癌细胞的增殖抑制 | 第46-47页 |
| 4.4.4 HuA21抗体对OE-19胃癌细胞的增殖抑制 | 第47页 |
| 4.4.5 HuA21抗体对SKBR3乳腺癌细胞的增殖抑制 | 第47-48页 |
| 4.5 HuA21抗体介导的对HER2高表达肿瘤细胞ADCC实验 | 第48-50页 |
| 4.5.1 HuA21抗体对BT-474细胞的ADCC实验 | 第48-49页 |
| 4.5.2 HuA21抗体对SKBR3细胞的ADCC实验 | 第49-50页 |
| 4.6 HuA21抗体体内对肿瘤细胞的增殖抑制 | 第50-63页 |
| 4.6.1 HuA21抗体对BT-474异体移植瘤抗肿瘤活性 | 第50-52页 |
| 4.6.2 HuA21抗体对BT-474/HR异体移植瘤抗肿瘤活性 | 第52-55页 |
| 4.6.3 HuA21抗体对SKOV3异体移植瘤抗肿瘤活性 | 第55-58页 |
| 4.6.4 HuA21抗体对MCF-7/HER2异体移植瘤抗肿瘤活性 | 第58-61页 |
| 4.6.5. HuA21抗体对OE-19异体移植瘤抗肿瘤活性 | 第61-63页 |
| 4.7 HuA21抗体对4T1-HER2-Luci异体移植瘤生长抑制及其抗转移活性 | 第63-66页 |
| 4.8 HuA21抗体对BT-474,BT-474/HR细胞HER2受体及下游信号通路的影响 | 第66-69页 |
| 4.9 HER2高表达细胞对HuA21抗体的结合作用及内吞作用 | 第69-74页 |
| 5 讨论 | 第74-83页 |
| 5.1. 人源化抗体HuA21结构特点 | 第74-75页 |
| 5.2. MCF-7/HER2稳转细胞株及曲妥珠单抗继发耐药细胞株BT-474/HR的特性 | 第75-77页 |
| 5.3. 不同抗HER2人源化抗体抗肿瘤作用机制特点 | 第77-79页 |
| 5.4. 抗HER2人源化抗体HuA21抗肿瘤作用机制特点 | 第79-83页 |
| 6. 结论 | 第83页 |
| 7 下一步工作设想 | 第83-84页 |
| 8 参考文献 | 第84-94页 |
| 附录 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 综述 | 第96-111页 |
| 参考文献 | 第103-111页 |
