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内生真菌稻镰状瓶霉基因敲除体系的构建及六个细胞自噬基因的功能分析

致谢第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-10页
第一章 文献综述第13-40页
    1.1 内生真菌第13-20页
        1.1.1 真菌的生存策略第13页
        1.1.2 植物与真菌的共生体系第13-14页
        1.1.3 植物内生真菌的概念第14页
        1.1.4 植物内生真菌的分类第14-16页
        1.1.5 内生真菌的生物学功能第16-17页
        1.1.6 暗色有隔内生真菌第17-19页
        1.1.7 暗色有隔内生真菌Harpophora oryzae第19-20页
    1.2 细胞自噬第20-38页
        1.2.1 细胞自噬概况第20页
        1.2.2 细胞自噬发现的历史第20-21页
        1.2.3 细胞自噬的类型第21-23页
        1.2.4 宏自噬的过程与特征第23-24页
        1.2.5 自噬体的形成第24-25页
        1.2.6 自噬体形成的分子机制第25-34页
        1.2.7 膜泡与液泡融合第34页
        1.2.8 细胞自噬的调控第34-36页
        1.2.9 细胞自噬的研究现状第36-38页
    1.3 本研究的目的及内容第38-40页
第二章 丝状真菌中自噬相关基因的生物信息学分析第40-67页
    2.1 材料与方法第40-41页
        2.1.1 同源基因的比对第40页
        2.1.2 进化分析第40-41页
    2.2 结果与分析第41-65页
        2.2.1 15种真菌中自噬相关基因同源比对结果第41-49页
        2.2.2 H.oryzae中的自噬相关基因第49-51页
        2.2.3 17种真菌进化关系第51-53页
        2.2.4 17种真菌中自噬相关基因的进化关系分析第53-65页
    2.3 本章讨论第65-67页
第三章 基因敲除体系的构建第67-89页
    3.1 材料与方法第67-77页
        3.1.1 实验菌株及培养条件第67-69页
        3.1.2 聚合酶链式反应(PCR)第69页
        3.1.3 质粒提取第69-70页
        3.1.4 DNA操作第70页
        3.1.5 遗传转化第70-72页
        3.1.6 稻镰状瓶霉RNA及基因组DNA的提取第72-74页
        3.1.7 稻镰状瓶霉基因组DNA Southern杂交第74-77页
    3.2 结果与分析第77-88页
        3.2.1 农杆菌介导的遗传转化体系构建第77-82页
        3.2.2 目的基因的敲除第82-88页
    3.3 本章讨论第88-89页
第四章 自噬相关基因的功能分析第89-122页
    4.1 材料与方法第89-93页
        4.1.1 试验菌株及培养条件第89-90页
        4.1.2 突变体表型分析第90-91页
        4.1.3 稻镰状瓶霉细胞结构观察第91页
        4.1.4 水稻根部与稻镰状瓶霉的共培养第91-93页
    4.2 结果与分析第93-119页
        4.2.1 H.oryzae细胞自噬基因的鉴定与敲除第93-94页
        4.2.2 基因同源性分析第94-95页
        4.2.3 基因缺失导致细胞自噬过程阻断第95-102页
        4.2.4 突变体菌落形态第102页
        4.2.5 突变体对饥饿敏感第102-104页
        4.2.6 突变体孢子形态、产孢量和孢子萌发率第104-105页
        4.2.7 基因缺失不影响对不同碳源的利用第105-107页
        4.2.8 突变体对H_2O_2的敏感性增强第107-109页
        4.2.9 突变体对不同pH的反应不明显第109-110页
        4.2.10 突变体对高渗离子的反应第110-112页
        4.2.11 突变体对不同浓度Ca~(2+)离子的敏感性第112-113页
        4.2.12 稻镰状瓶霉中自噬泛素系统蛋白互作验证第113-115页
        4.2.13 突变体对水稻生长的影响和在水稻根部的定殖情况第115-119页
    4.3 本章讨论第119-122页
第五章 全文总结及展望第122-125页
    5.1 结论第122-123页
    5.2 后续研究工作第123-125页
参考文献第125-138页
附录第138-141页

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