| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 1. 前言 | 第12-32页 |
| 1.1 卵母细胞成熟 | 第12-13页 |
| 1.1.1 卵母细胞的胞质成熟和核成熟 | 第12-13页 |
| 1.1.2 卵母细胞体外成熟 | 第13页 |
| 1.2 影响卵母细胞体外成熟的因素 | 第13-16页 |
| 1.2.1 体外成熟培养液 | 第13-14页 |
| 1.2.2 卵丘细胞 | 第14-15页 |
| 1.2.3 氧化应激 | 第15-16页 |
| 1.3 卵母细胞体外成熟质量的判定 | 第16-17页 |
| 1.3.1 成熟卵母细胞的形态学检测 | 第16页 |
| 1.3.2 卵母细胞胞质中谷胱甘肽水平 | 第16-17页 |
| 1.3.3 体外胚胎发育 | 第17页 |
| 1.4 提高体外成熟卵母细胞质量的方法 | 第17-19页 |
| 1.4.1 添加胱氨酸/半胱胺 | 第17-19页 |
| 1.4.2 添加外源性卵分泌生长因子 | 第19页 |
| 1.5 细胞自体吞噬 | 第19-31页 |
| 1.5.1 自体吞噬发生的相关分子机制 | 第20-22页 |
| 1.5.2 自体吞噬的相关调控机制 | 第22-26页 |
| 1.5.3 自体吞噬与氧化应激 | 第26-27页 |
| 1.5.4 自体吞噬与细胞凋亡 | 第27-31页 |
| 1.6 本文主要研究内容 | 第31-32页 |
| 2. 材料与方法 | 第32-40页 |
| 2.1 主要试剂及其配制方法 | 第32-34页 |
| 2.2 实验动物及超排处理 | 第34页 |
| 2.3 小鼠卵母细胞的收集 | 第34页 |
| 2.4 裸卵制备 | 第34页 |
| 2.5 小鼠卵母细胞的体外成熟培养 | 第34页 |
| 2.6 SrCl_2激活处理与卵母细胞激活的判定 | 第34-35页 |
| 2.7 小鼠卵母细胞胚胎培养 | 第35页 |
| 2.8 LC3免疫荧光染色及定量分析 | 第35页 |
| 2.9 卵母细胞内ROS水平的检测 | 第35-36页 |
| 2.10 GSH水平检测 | 第36页 |
| 2.11 实时定量PCR | 第36-39页 |
| 2.11.1 卵丘细胞的获取及保存 | 第36页 |
| 2.11.2 RNA提取的前处理 | 第36页 |
| 2.11.3 总RNA提取 | 第36-37页 |
| 2.11.4 反转录 | 第37页 |
| 2.11.5 荧光定量检测mRNA含量的变化 | 第37-39页 |
| 2.12 数据统计 | 第39-40页 |
| 3. 结果与分析 | 第40-51页 |
| 3.1 不同体外成熟条件对小鼠卵母细胞发育能力的影响 | 第40-41页 |
| 3.2 不同体外成熟培养体系下卵母细胞的自噬表达 | 第41-42页 |
| 3.3 体外成熟期间添加 3-MA对小鼠卵母细胞发育能力的影响 | 第42-43页 |
| 3.4 体外成熟期间添加RAPA对小鼠卵母细胞发育能力的影响 | 第43-45页 |
| 3.5 体外成熟期间添加RAPA和 3-MA对小鼠卵母细胞自噬表达量的影响 | 第45-46页 |
| 3.6 体外成熟期间添加RAPA和 3-MA对小鼠卵母细胞ROS水平的影响 | 第46-47页 |
| 3.7 体外成熟期间添加RAPA和 3-MA对小鼠卵母细胞谷胱甘肽水平的影响 | 第47-49页 |
| 3.8 体外成熟期间添加RAPA和 3-MA对小鼠卵丘细胞凋亡的影响 | 第49-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-54页 |
| 5. 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第69页 |
