摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
英文缩略词表 | 第10-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-27页 |
1 鸡马立克氏病概述 | 第11-13页 |
1.1 鸡马立克氏病及马立克氏病病毒研究进展 | 第11-12页 |
1.2 马立克氏病病毒致瘤蛋白Meq研究进展 | 第12-13页 |
2 DNA损伤应答概述 | 第13-17页 |
2.1 DNA损伤应答研究进展 | 第13-15页 |
2.2 ATM概述 | 第15-16页 |
2.3 Chk2概述 | 第16-17页 |
3 致瘤病毒与DNA损伤应答关系 | 第17-18页 |
4 研究目的与意义 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-27页 |
第二篇 研究内容 | 第27-81页 |
第一章 马立克氏病病毒致瘤蛋白Meq单克隆抗体制备 | 第27-49页 |
1 材料和方法 | 第28-36页 |
1.1 试验材料 | 第28-30页 |
1.2 试验方法 | 第30-36页 |
2 实验结果 | 第36-46页 |
2.1 meq基因的PCR扩增 | 第36页 |
2.2 Meq重组真核表达质粒的酶切鉴定 | 第36页 |
2.3 meq1-507和meq814-1020片段的PCR扩增 | 第36页 |
2.4 Meq169和MeqC重组原核表达质粒的鉴定 | 第36页 |
2.5 重组表达质粒pCold-TF-Meq169的诱导表达及可溶性分析 | 第36-37页 |
2.6 重组表达质粒pGEX-4T-1-MeqC的诱导表达 | 第37页 |
2.7 Meq169多抗血清的间接免疫荧光(IFA)检测 | 第37页 |
2.8 Meq169多抗血清的免疫印迹(WB)检测结果 | 第37-41页 |
2.9 利用Meq169单抗检测Md5和CVI988感染 | 第41页 |
2.10 Meq169单抗WB检测结果 | 第41-42页 |
2.11 Meq169及MeqC氨基酸序列分析 | 第42页 |
2.12 MeqC多抗血清的IFA检测 | 第42页 |
2.13 MeqC多抗血清的WB检测结果 | 第42页 |
2.14 筛选获得10株分泌MeqC抗体的阳性杂交瘤细胞株 | 第42-45页 |
2.15 MeqC单抗的IFA检测 | 第45页 |
2.16 MeqC单抗的WB检测 | 第45-46页 |
3 讨论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-49页 |
第二章 鸡ATM单克隆抗体的制备 | 第49-61页 |
1 材料和方法 | 第49-52页 |
1.1 试验材料 | 第49-50页 |
1.2 试验方法 | 第50-52页 |
2 实验结果 | 第52-58页 |
2.1 目的片段的PCR扩增 | 第52-53页 |
2.2 鸡ATMC重组表达质粒的PCR鉴定 | 第53页 |
2.3 鸡ATMC的诱导表达 | 第53-55页 |
2.4 鸡ATMC多抗血清的间接免疫荧光(IFA)检测 | 第55-56页 |
2.5 鸡ATMC多抗血清的免疫印迹(WB)检测 | 第56页 |
2.6 筛选获得12株阳性杂交瘤细胞株 | 第56页 |
2.7 鸡ATMC单抗的IFA检测结果 | 第56页 |
2.8 鸡ATMC单抗的WB检测结果 | 第56-58页 |
3 讨论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-61页 |
第三章 鸡Chk2单克隆抗体的制备 | 第61-81页 |
1 材料和方法 | 第62-66页 |
1.1 试验材料 | 第62页 |
1.2 试验方法 | 第62-66页 |
2 实验结果 | 第66-76页 |
2.1 目的基因的PCR扩增 | 第66页 |
2.2 鸡Chk2重组真核表达质粒的酶切鉴定及测序 | 第66页 |
2.3 鸡Chk2重组原核表达质粒的酶切鉴定及测序 | 第66-68页 |
2.4 鸡Chk2的原核诱导表达 | 第68页 |
2.5 鸡Chk2原核表达诱导条件的筛选 | 第68页 |
2.6 原核表达产物的可溶性分析 | 第68-70页 |
2.7 多抗血清的间接免疫荧光(IFA)检测 | 第70-71页 |
2.8 多抗血清的免疫印迹(WB)检测 | 第71页 |
2.9 筛选获得9株阳性杂交瘤细胞株 | 第71-72页 |
2.10 单抗亚型鉴定 | 第72-73页 |
2.11 杂交瘤细胞的克隆化 | 第73页 |
2.12 单抗腹水的制备 | 第73页 |
2.13 鸡Chk2单抗的IFA检测结果 | 第73-75页 |
2.14 鸡Chk2单抗的WB检测结果 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-81页 |
全文总结 | 第81-83页 |
致谢 | 第83-85页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第85页 |