| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-18页 |
| 第一章 家畜基因打靶的研究进展 | 第9-13页 |
| ·基因打靶的原理 | 第9-10页 |
| ·同源重组的原理 | 第9页 |
| ·基因打靶载体的构建 | 第9-10页 |
| ·基因打靶技术结合体细胞克隆技术在家畜研究中的应用 | 第10-12页 |
| ·体细胞克隆技术 | 第10-11页 |
| ·家畜基因打靶 | 第11-12页 |
| ·展望 | 第12-13页 |
| 第二章 MYOSTATIN 基因概述 | 第13-18页 |
| ·MYOSTATIN 基因及蛋白的结构特点 | 第13页 |
| ·MYOSTATIN 基因的染色体定位 | 第13页 |
| ·MYOSTATIN 基因的表达部位 | 第13-14页 |
| ·MYOSTATIN 蛋白作用机制 | 第14页 |
| ·MYOSTATIN 基因生物学功能 | 第14-16页 |
| ·对肌肉组织生长的影响 | 第14-15页 |
| ·对脂肪组织沉积的影响 | 第15页 |
| ·对疾病的影响 | 第15-16页 |
| ·MYOSTATIN 基因在畜牧业生产中的应用 | 第16-17页 |
| ·培育“双肌”牛 | 第16页 |
| ·培育双肌臀猪 | 第16-17页 |
| ·在其他方面的应用 | 第17页 |
| ·展望 | 第17-18页 |
| 第二部分 实验部分 | 第18-43页 |
| 第三章 定点突变MYOSTATIN基因打靶载体PA2T-MSTN4.0 和PA2T-MSTN3.0 的构建 | 第18-27页 |
| ·材料和方法 | 第18-24页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·载体构建 | 第19-24页 |
| ·结果 | 第24-26页 |
| ·同源臂的PCR 扩增 | 第24页 |
| ·同源臂测序及定点突变结果 | 第24-25页 |
| ·构建PA2T-MSTN4.0 和PA2T-MSTN3.0 打靶载体 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26页 |
| ·小结 | 第26-27页 |
| 第四章 细胞转染方法的优化 | 第27-34页 |
| ·材料与方法 | 第27-29页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-29页 |
| ·结果 | 第29-33页 |
| ·原代细胞培养 | 第29-30页 |
| ·胎儿成纤维细胞生长曲线 | 第30页 |
| ·质粒大提及浓度测定 | 第30页 |
| ·电转参数的优化 | 第30-32页 |
| ·脂质体转染法转染效率的观察 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第五章 转基因细胞的筛选及鉴定 | 第34-43页 |
| ·材料与方法 | 第34-38页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·结果 | 第38-41页 |
| ·药物筛选浓度的测定 | 第38页 |
| ·药物抗性细胞的获得及PCR 检测 | 第38-40页 |
| ·中靶细胞克隆的SOUTHERN BLOTING 鉴定 | 第40-41页 |
| ·药物抗性细胞中MYOSTATIN 基因突变位点的测序结果 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 全文结论 | 第43-44页 |
| 本研究创新点 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 附录 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 个人简介 | 第55页 |
