| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 引言和文献综述 | 第11-24页 |
| 1.1 果蝇心脏及相关Wnt信号调控 | 第11-14页 |
| 1.1.1 利用果蝇模型研究心脏发育 | 第12页 |
| 1.1.2 利用果蝇模型研究成体心脏功能 | 第12-13页 |
| 1.1.3 Wnt信号与心脏功能 | 第13-14页 |
| 1.2 pygo是Wnt信号途径的新成员 | 第14-15页 |
| 1.3 pygo与果蝇心脏功能 | 第15-16页 |
| 1.3.1 pygo对心脏发育具有调控作用 | 第15页 |
| 1.3.2 pygo调控成体心脏生理功能和心脏衰老 | 第15-16页 |
| 1.4 pygo调控成体心脏功能可能的机制 | 第16-18页 |
| 1.4.1 pygo在成体心脏中的功能独立于经典Wnt信号 | 第16-17页 |
| 1.4.2 pygo在成体心脏功能中的调控可能依赖于TCF类似因子 | 第17页 |
| 1.4.3 pygo可能直接越过lgs调控TCF靶基因而独立于经典Wnt信号 | 第17-18页 |
| 1.5 pygo分子机制探讨 | 第18-21页 |
| 1.5.1 pygo依赖Wnt信号的分子机制 | 第18-19页 |
| 1.5.2 pygo独立于Wnt信号的分子机制 | 第19-20页 |
| 1.5.3 pygo与表观遗传学修饰相关，扮演染色质阅读器的作用 | 第20-21页 |
| 1.6 染色质免疫共沉淀高通量测序（Ch IP-Seq） | 第21-22页 |
| 1.7 本文的研究目标和研究意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-34页 |
| 2.1 材料、试剂与设备 | 第24-28页 |
| 2.1.1 所用生物信息学工具 | 第24页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.3 引物、抗体、主要试剂及溶液配制 | 第25-28页 |
| 2.1.4 果蝇品系 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-34页 |
| 2.2.1 果蝇品系培养和杂交 | 第28-29页 |
| 2.2.2 果蝇成体心脏解剖及心管取材 | 第29-30页 |
| 2.2.3 果蝇活体心脏拍摄和数据分析 | 第30页 |
| 2.2.4 果蝇胚胎免疫荧光染色 | 第30-31页 |
| 2.2.5 染色质免疫共沉淀（ChIP）实验 | 第31-32页 |
| 2.2.6 高通量测序（Ch IP-Seq）分析 | 第32-34页 |
| 3 实验结果及其分析 | 第34-54页 |
| 3.1 pygo基因的生物信息学分析结果 | 第34页 |
| 3.2 pygo在果蝇成体心脏中的功能验证 | 第34-35页 |
| 3.3 过表达标签品系的构建及HA抗体有效性检测 | 第35-36页 |
| 3.4 果蝇心脏组织染色质免疫共沉淀（ChIP）实验改进及有效性检测 | 第36-39页 |
| 3.5 高通量测序峰值分析 | 第39-45页 |
| 3.6 高通量测序GO分析 | 第45-50页 |
| 3.7 高通量测序信号通路分析 | 第50-51页 |
| 3.8 pygo相互作用候选基因 | 第51-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 5 其他工作 | 第57-62页 |
| 5.1 Talen打靶 | 第57页 |
| 5.2 Cas9打靶 | 第57-61页 |
| 5.2.1 合成片段退火 | 第57-58页 |
| 5.2.2 进行cas9打靶质粒的构建 | 第58-60页 |
| 5.2.3 目的片段的扩增，及转录 | 第60-61页 |
| 5.2.4 显微注射及基因型鉴定 | 第61页 |
| 5.3 质粒构建 | 第61-62页 |
| 结语 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 附录 | 第68-89页 |
| 附录 1 | 第68-69页 |
| 附录 2 | 第69-88页 |
| 附录 3 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
