| 致谢 | 第6-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 1 文献综述：十字花科作物的农杆菌转化的研究进展 | 第15-25页 |
| 1.1 十字花科植物的农杆菌转化 | 第15-19页 |
| 1.1.1 农杆菌转化机制 | 第15-16页 |
| 1.1.2 叶盘转化法 | 第16-17页 |
| 1.1.3 农杆菌介导的原位转化法 | 第17-19页 |
| 1.1.3.1 种子转化法 | 第17-18页 |
| 1.1.3.2 分生组织转化 | 第18页 |
| 1.1.3.3 花器官转化 | 第18-19页 |
| 1.2 原位转化机理与影响真空渗入转化的因素 | 第19-25页 |
| 1.2.1 原位转化机理 | 第19-20页 |
| 1.2.1.1 转化目标 | 第19-20页 |
| 1.2.1.2 转化时间 | 第20页 |
| 1.2.2 影响原位转化的因素 | 第20-25页 |
| 1.2.2.1 温度 | 第20-21页 |
| 1.2.2.2 农杆菌菌株和植物基因型 | 第21页 |
| 1.2.2.3 农杆菌OD_(600)和转化介质 | 第21-22页 |
| 1.2.2.4 植株发育时期 | 第22页 |
| 1.2.2.5 渗入处理 | 第22-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-31页 |
| 2.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.2 供试菌株及质粒 | 第25页 |
| 2.3 培养基与溶液配制 | 第25-26页 |
| 2.4 药品与试剂 | 第26页 |
| 2.5 仪器与设备 | 第26页 |
| 2.6 菜心不同发育时期的处理 | 第26页 |
| 2.7 不同压强与渗入时间的处理 | 第26-27页 |
| 2.8 农杆菌不同菌液浓度的真空渗入处理 | 第27页 |
| 2.9 不同浓度表面活性剂Silwet L-77的处理 | 第27页 |
| 2.10 不同蔗糖浓度的处理 | 第27页 |
| 2.11 不同因素的正交设计 | 第27页 |
| 2.12 菌液准备与真空渗入转化处理 | 第27-28页 |
| 2.13 后期管理与种子收获 | 第28页 |
| 2.14 潮霉素(Hyg)最佳致死浓度的确定与转基因菜心T_1代种子的抗性筛选 | 第28-29页 |
| 2.15 转化株鉴定 | 第29页 |
| 2.16 数据处理与分析 | 第29-31页 |
| 3 结果 | 第31-47页 |
| 3.1 载体的构建与真空渗入处理转基因苗的PCR检测 | 第31-32页 |
| 3.1.1 载体的构建 | 第31页 |
| 3.1.2 真空渗入处理转基因苗的PCR检测 | 第31-32页 |
| 3.2 菜心不同发育时期转化效果的比较 | 第32-34页 |
| 3.3 农杆菌OD_(600)对转化效果的影响 | 第34-36页 |
| 3.4 压强与时间对转化效果的影响 | 第36-38页 |
| 3.4.1 压强与时间对转化率的影响 | 第36-38页 |
| 3.4.2 花序浸蘸法处理菜心 | 第38页 |
| 3.5 不同浓度表面活性剂Silwet L-77对转化效果的影响 | 第38-39页 |
| 3.6 蔗糖浓度对转化效果的影响 | 第39-41页 |
| 3.7 最佳转化体系的确定 | 第41-43页 |
| 3.8 潮霉素致死浓度的确定和对转基因菜心T_1代种子的筛选 | 第43页 |
| 3.9 花序中不同部位的花蕾的转化效果比较 | 第43页 |
| 3.10 种子转化率与植株转化率的关系 | 第43-45页 |
| 3.11 不同杂交方式的转化率比较 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-53页 |
| 4.1 菜心发育时期对转化率的影响 | 第47页 |
| 4.2 菌液浓度对转化率的影响 | 第47-48页 |
| 4.3 压强与时间对转化事件的影响 | 第48页 |
| 4.4 表面活性剂Silwet L-77对转化率的影响 | 第48页 |
| 4.5 蔗糖在真空渗入菜心中的作用 | 第48-49页 |
| 4.6 转化部位与转化时间 | 第49页 |
| 4.7 花序浸蘸法转化菜心的可行性 | 第49页 |
| 4.8 转基因后代的筛选 | 第49-50页 |
| 4.9 提高农杆菌真空渗入转化率的措施 | 第50-51页 |
| 4.10 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
