| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 缩写表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-28页 |
| 1.1 植物在热处理时生理生化变化研究 | 第16-18页 |
| 1.1.1 植物光合相应高温胁迫 | 第16-17页 |
| 1.1.2 高温胁迫对膜系统影响 | 第17页 |
| 1.1.3 抗氧化系统在高温胁迫下的反应 | 第17页 |
| 1.1.4 高温胁迫对渗透物质的影响 | 第17-18页 |
| 1.1.5 高温胁迫对果树的影响 | 第18页 |
| 1.2 植物体内的热激蛋白 | 第18-26页 |
| 1.2.1 热激蛋白(Heat shock protein,HSP) | 第18-21页 |
| 1.2.2 sHSP类基因 | 第21-25页 |
| 1.2.3 小分子热激蛋白转基因工程研究 | 第25-26页 |
| 1.3 本论文研究的目的意义 | 第26页 |
| 1.4 本论文研究内容 | 第26-28页 |
| 第二章 高温胁迫对杧果幼苗生理生化的影响 | 第28-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第28-29页 |
| 2.1.1 材料处理 | 第28页 |
| 2.1.2 测定方法 | 第28页 |
| 2.1.3 数据统计和计算制图 | 第28-29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-33页 |
| 2.2.1 高温胁迫下杧果形态观察 | 第29页 |
| 2.2.2 高温胁迫对两个杧果品种幼苗叶片细胞膜的影响 | 第29-30页 |
| 2.2.3 高度胁迫对两个杧果品种幼苗叶片中保护酶活性的影响 | 第30-31页 |
| 2.2.4 高温胁迫对两个杧果品种幼苗叶片渗透调节物质的影响 | 第31-32页 |
| 2.2.5 高温胁迫对两个杧果品种幼苗叶片中叶绿素含量的影响 | 第32-33页 |
| 2.2.6 高温胁迫对两个杧果品种幼苗叶片相对含水量的影响 | 第33页 |
| 2.3 讨论 | 第33-36页 |
| 2.3.1 高温对杧果幼苗叶片细胞膜的影响 | 第33-34页 |
| 2.3.2 高温对杧果保护酶的影响 | 第34-35页 |
| 2.3.3 高温对杧果幼苗叶片渗透调节物质的影响 | 第35页 |
| 2.3.4 高温对杜果幼苗叶片叶绿素含量的影响 | 第35-36页 |
| 2.3.5 高温处理对杧果含水量的影响 | 第36页 |
| 2.4 小结 | 第36-38页 |
| 第三章 杧果MiHSP17.6、MiHSP17.7、MiHSP23.2基因的克隆及表达分析 | 第38-65页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第39-44页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第39页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第39页 |
| 3.1.3 材料处理 | 第39-40页 |
| 3.1.4 杧果总RNA提取和cDNA合成 | 第40页 |
| 3.1.5 引物设计 | 第40-41页 |
| 3.1.6 目的基因全长克隆 | 第41-43页 |
| 3.1.7 实时荧光定量PCR | 第43-44页 |
| 3.1.8 生物信息学解析 | 第44页 |
| 3.2 结果与分析 | 第44-62页 |
| 3.2.1 杧果总RNA提取与cDNA合成 | 第44-45页 |
| 3.2.2 MiHSP17.6、MiHSP17.7、MiHSP23.2基因克隆及测序 | 第45-48页 |
| 3.2.3 MiHSP17.6、MiHSP17.7、MiHSP23.2基因生物信息学分析 | 第48-49页 |
| 3.2.4 MiHSP17.6、MiHSP17.7、MiHSP23.2系统进化分析 | 第49-51页 |
| 3.2.5 MiHSP17.6、MiHSP17.7、MiHSP23.2基因同源进化树分析 | 第51-54页 |
| 3.2.6 MiHSP17.6、MiHSP17.7、MiHSP23.2基因在不同组织中的表达 | 第54-55页 |
| 3.2.7 MiHSP17.6、MiHSPl7.7、MiHSP23.2基因表达 | 第55-59页 |
| 3.2.8 MiHSP17.6、MiHSPl7.7、MiHSP23.2在信号刺激物质下的表达 | 第59-62页 |
| 3.3 讨论 | 第62-64页 |
| 3.4 小结 | 第64-65页 |
| 第四章 杧果MiHSP17.6、MiHSP17.7蛋白原核表达与功能分析 | 第65-75页 |
| 4.1 材料与方法 | 第65-68页 |
| 4.1.1 材料 | 第65页 |
| 4.1.2 主要药品与试剂 | 第65页 |
| 4.1.3 MiHSP17.6、MiHSP17.7基因全长获得 | 第65-66页 |
| 4.1.4 PCR产物的回收纯化 | 第66页 |
| 4.1.5 连接体系与转化 | 第66页 |
| 4.1.6 菌液检测 | 第66-67页 |
| 4.1.7 重组载体构建过程 | 第67页 |
| 4.1.8 基因的蛋白表达 | 第67页 |
| 4.1.9 蛋的纯化与Western Blot | 第67页 |
| 4.1.10 转化子对非生物胁迫的抗性 | 第67-68页 |
| 4.2 结果与分析 | 第68-73页 |
| 4.2.1 MiHSP17.6与MiHSP17.7基因片段的扩增 | 第68-69页 |
| 4.2.2 原核表达载体的构建 | 第69-70页 |
| 4.2.3 重组蛋白纯化与蛋白印迹分析 | 第70-71页 |
| 4.2.4 重组转化子对低温、高温的耐受性 | 第71-72页 |
| 4.2.5 重组转化子对NaCL和PEG的耐受性 | 第72-73页 |
| 4.3 本章讨论 | 第73-74页 |
| 4.4 小结 | 第74-75页 |
| 第五章 杧果MiHSP17.6、MiHSP17.7、MiHSP23.2基因转化拟南芥及其功能验证 | 第75-109页 |
| 5.1 材料与方法 | 第75-84页 |
| 5.1.1 材料 | 第75页 |
| 5.1.2 主要试剂及仪器 | 第75-76页 |
| 5.1.3 表达载体构建 | 第76页 |
| 5.1.4 转基因拟南芥 | 第76-80页 |
| 5.1.5 转基因植株鉴定 | 第80-81页 |
| 5.1.6 转基因拟南芥逆境胁迫处理 | 第81-83页 |
| 5.1.7 逆境胁迫下转基因拟南芥植株的表达(实时荧光定量) | 第83页 |
| 5.1.8 温度胁迫下转基因拟南芥叶片中生理生化指标测定 | 第83页 |
| 5.1.9 数据分析 | 第83-84页 |
| 5.2 结果与分析 | 第84-104页 |
| 5.2.1 杧果MiHSP17.6、MiHSP17.7、MiHSP23基因表达载体构建 | 第84页 |
| 5.2.2 杧果MiHSP17.6、MiHSP17.7、MiHSP23转化拟南芥 | 第84-85页 |
| 5.2.3 转基因拟南芥鉴定 | 第85-87页 |
| 5.2.4 T3代转基因植株表型观察 | 第87-88页 |
| 5.2.5 高温胁迫下转基因拟南芥表达模式、生长表型和生理生化指标的变化 | 第88-95页 |
| 5.2.6 低温胁迫下转基因拟南芥表达模式、生长表型和生理指标变化 | 第95-97页 |
| 5.2.7 盐胁迫对转基因拟南芥不同生长阶段的影响 | 第97-102页 |
| 5.2.8 干旱胁迫对基因拟南芥株系生长的影响 | 第102-104页 |
| 5.3 讨论 | 第104-107页 |
| 5.3.1 转sHSP基因植株增强在高温胁迫时的抗性 | 第104-105页 |
| 5.3.2 过表达三个sHSP基因增强拟南芥耐冷性 | 第105页 |
| 5.3.3 过表达三个sHSP基因增强拟南芥抗盐性 | 第105-107页 |
| 5.3.4 过表达三个sHSP基因增强拟南芥耐干旱性 | 第107页 |
| 5.4 小结 | 第107-109页 |
| 第六章 全文结论、创新点与展望 | 第109-111页 |
| 6.1 全文结论 | 第109-110页 |
| 6.2 创新点 | 第110页 |
| 6.3 展望 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-125页 |
| 攻读博士期间发表的相关学术论文 | 第125页 |
