摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第10-28页 |
1.1 基于适体治疗技术的发展及适体筛选技术的研究进展 | 第10-24页 |
1.1.1 基于适体的治疗技术的研究进展 | 第11-16页 |
1.1.2 Cell-SELEX筛选技术 | 第16-24页 |
1.1.3 结论 | 第24页 |
1.2 本课题的来源、研究思路与主要研究内容 | 第24-28页 |
1.2.1 课题的来源 | 第24-25页 |
1.2.2 课题的意义 | 第25-26页 |
1.2.3 本课题的研究思路与主要研究内容 | 第26-28页 |
第2章 抗人精子适体的制备 | 第28-62页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第28-30页 |
2.1.1 实验材料 | 第28-30页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第30页 |
2.2 实验方法 | 第30-49页 |
2.2.1 主要试剂的配制 | 第30-32页 |
2.2.2 应用cell-SELEX技术筛选抗人精子细胞适体 | 第32-36页 |
2.2.3 PCR扩增条件的优化 | 第36-38页 |
2.2.4 精子蛋白的提取和浓度测定 | 第38-40页 |
2.2.5 用于Dot blotting和Eastern blotting检测的适体分子的制备 | 第40-42页 |
2.2.6 Dot blotting检测适体富集程度 | 第42-43页 |
2.2.7 Eastern blotting检测适体富集程度 | 第43-46页 |
2.2.8 DNA分子克隆和测序 | 第46-49页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第49-59页 |
2.3.1 PCR扩增产物的电泳图分析 | 第49-51页 |
2.3.2 模板量、循环数、退火温度对PCR扩增的影响 | 第51-53页 |
2.3.3 精子细胞全蛋白考马斯亮蓝染结果 | 第53-54页 |
2.3.4 次级文库对人精子细胞蛋白的特异性结合能力的分析 | 第54-57页 |
2.3.5 适体分子的克隆与测序 | 第57-59页 |
2.4 本章小结 | 第59-62页 |
第3章 适体分子特异性的检测 | 第62-76页 |
3.1 实验材料与仪器 | 第62-64页 |
3.1.1 实验材料 | 第62-63页 |
3.1.2 主要实验仪器 | 第63-64页 |
3.2 实验方法 | 第64-73页 |
3.2.0 主要试剂的配制 | 第64-65页 |
3.2.1 用于Dot blotting和Eastern blotting检测的适体分子的制备 | 第65-67页 |
3.2.2 Dot blotting检测适体分子对人精子蛋白的特异性 | 第67-68页 |
3.2.3 Eastern blotting检测适体分子对人精子线性蛋白的特异性 | 第68-71页 |
3.2.4 荧光检测方法检测适体分子对人精子细胞的特异性 | 第71-73页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第73-75页 |
3.3.1 Dot blotting检测适体分子特异性的结果分析 | 第73页 |
3.3.2 Eastern blotting检测适体分子特异性的结果分析 | 第73-74页 |
3.3.3 荧光检测法检测适体分子特异性的结果分析 | 第74-75页 |
3.4 本章小结 | 第75-76页 |
第4章 适体分子体外抑精运动能力的检测 | 第76-88页 |
4.1 实验材料与仪器 | 第76-79页 |
4.1.1 实验材料 | 第76-78页 |
4.1.2 主要实验仪器 | 第78-79页 |
4.2 实验方法 | 第79-80页 |
4.3 实验结果与讨论 | 第80-86页 |
4.3.1 1 号-6 号适体分子和引物序列抑精运动能力的评估 | 第81-83页 |
4.3.2 7 号-13号适体分子抑精运动能力的评估 | 第83-85页 |
4.3.3 14号-20号适体分子抑精运动能力的评估 | 第85-86页 |
4.4 本章小结 | 第86-88页 |
第5章 结论 | 第88-90页 |
5.1 总结 | 第88-89页 |
5.2 展望 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-98页 |
致谢 | 第98-100页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文和研究成果 | 第100页 |