| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 本文所用英文缩写词表 | 第15-16页 |
| 第1章 绪论 | 第16-44页 |
| 1.1 肿瘤的危害和常见诊断方法 | 第16-24页 |
| 1.1.1 基于病理学的肿瘤诊断技术 | 第18-20页 |
| 1.1.2 基于影像学的肿瘤诊断技术 | 第20-24页 |
| 1.2 Aptamer及其在肿瘤检测中的应用 | 第24-31页 |
| 1.2.1 Aptamer简介 | 第24-25页 |
| 1.2.2 Aptamer在肿瘤检测研究中的应用 | 第25-31页 |
| 1.3 DNA信号放大技术及其在肿瘤检测研究中的应用 | 第31-42页 |
| 1.3.1 PCR技术及其在肿瘤检测研究中的应用 | 第31-35页 |
| 1.3.2 HCR技术及其在肿瘤检测研究中的应用 | 第35-38页 |
| 1.3.3 RCA技术及其在肿瘤检测研究中的应用 | 第38-42页 |
| 1.4 本文构思 | 第42-44页 |
| 第2章 温度响应性裂开型Aptamer结合PCR技术用于肿瘤细胞的免标记和高灵敏检测研究 | 第44-58页 |
| 2.1 前言 | 第44-45页 |
| 2.2 实验部分 | 第45-49页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第45-47页 |
| 2.2.2 引物的设计及PCR退火温度的考察 | 第47页 |
| 2.2.3 细胞培养与传代 | 第47-48页 |
| 2.2.4 流式分析 | 第48页 |
| 2.2.5 PCR轮数优化 | 第48页 |
| 2.2.6 电泳分析 | 第48页 |
| 2.2.7 细胞检测分析 | 第48-49页 |
| 2.2.8 PCR扩增 | 第49页 |
| 2.2.9 荧光分析 | 第49页 |
| 2.2.10 通用性考察 | 第49页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第49-57页 |
| 2.3.1 实验原理 | 第49-50页 |
| 2.3.2 引物的设计及PCR退火温度的考察 | 第50-51页 |
| 2.3.3 裂开型Aptamer探针的靶向性、特异性及温敏性考察 | 第51-52页 |
| 2.3.4 裂开型Aptamer结合PCR技术用于肿瘤细胞的特异性检测 | 第52-54页 |
| 2.3.5 裂开型Aptamer结合PCR技术用于肿瘤细胞的定量检测 | 第54-55页 |
| 2.3.6 通用性研究 | 第55-57页 |
| 2.4 小结 | 第57-58页 |
| 第3章 靶驱动裂开型Aptamer自组装结合邻近诱导HCR反应用于肿瘤细胞的高灵敏检测研究 | 第58-73页 |
| 3.1 前言 | 第58-59页 |
| 3.2 实验部分 | 第59-63页 |
| 3.2.1 试剂与仪器 | 第59-61页 |
| 3.2.2 电泳分析 | 第61-62页 |
| 3.2.3 荧光分析 | 第62页 |
| 3.2.4 细胞培养与传代 | 第62页 |
| 3.2.5 流式分析 | 第62页 |
| 3.2.6 激光共聚焦荧光成像分析 | 第62-63页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第63-72页 |
| 3.3.1 实验原理 | 第63页 |
| 3.3.2 探针的设计及可行性分析 | 第63-67页 |
| 3.3.3 Split HCR探针的细胞靶向性及特异性考察 | 第67-69页 |
| 3.3.4 裂开型Aptamer结合HCR用于肿瘤细胞的定量检测 | 第69-70页 |
| 3.3.5 裂开型Aptamer结合HCR用于复杂样品中肿瘤细胞的检测 | 第70-72页 |
| 3.4 小结 | 第72-73页 |
| 第4章 裂开型Aptamer结合RCA技术用于温度响应性DNA纳米聚合物的构建及肿瘤细胞的检测与操控研究 | 第73-88页 |
| 4.1 前言 | 第73-74页 |
| 4.2 实验部分 | 第74-78页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第74-76页 |
| 4.2.2 环状DNA合成及RCA反应 | 第76页 |
| 4.2.3 电泳分析 | 第76页 |
| 4.2.4 细胞培养与传代 | 第76-77页 |
| 4.2.5 流式分析 | 第77页 |
| 4.2.6 激光共聚焦荧光成像分析 | 第77页 |
| 4.2.7 基于温敏性nanoensemble探针的肿瘤细胞捕获与释放 | 第77-78页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第78-87页 |
| 4.3.1 实验原理 | 第78-79页 |
| 4.3.2 探针的设计及RCA产物分析 | 第79-80页 |
| 4.3.3 Nanoensemble探针用于肿瘤细胞检测的可行性及相关性能考察 | 第80-84页 |
| 4.3.4 Nanoensemble探针用于血清复杂样品中肿瘤细胞的检测 | 第84-85页 |
| 4.3.5 Nanoensemble探针用于肿瘤细胞的捕获及温控释放 | 第85-87页 |
| 4.4 小结 | 第87-88页 |
| 第5章 激活式裂开型Aptamer探针结合DNA链置换技术用于肿瘤细胞的实时快速检测和活体成像研究 | 第88-104页 |
| 5.1 前言 | 第88-89页 |
| 5.2 实验部分 | 第89-92页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第89-91页 |
| 5.2.2 荧光分析 | 第91页 |
| 5.2.3 细胞培养与传代 | 第91页 |
| 5.2.4 流式分析 | 第91-92页 |
| 5.2.5 激光共聚焦荧光成像分析 | 第92页 |
| 5.2.6 荷瘤裸鼠模型的建立 | 第92页 |
| 5.2.7 活体荧光成像分析 | 第92页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第92-103页 |
| 5.3.1 实验原理 | 第92-93页 |
| 5.3.2 探针的设计及可行性分析 | 第93-95页 |
| 5.3.3 Split-ZY11-SD探针用于肿瘤细胞检测的条件优化 | 第95-96页 |
| 5.3.4 Split-ZY11-SD探针用于肿瘤细胞的特异性检测 | 第96-97页 |
| 5.3.5 Split-ZY11-SD探针用于肿瘤细胞的定量分析 | 第97-98页 |
| 5.3.6 Split-ZY11-SD探针用于肿瘤细胞的实时分析成像 | 第98-100页 |
| 5.3.7 Split-ZY11-SD探针用于复杂样品中肿瘤细胞的检测 | 第100页 |
| 5.3.8 Split-ZY11-SD探针用于活体肿瘤成像分析 | 第100-103页 |
| 5.4 小结 | 第103-104页 |
| 结论 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-123页 |
| 附录 攻读博士学位期间所发表和拟发表的学术论文 | 第123-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
