| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-23页 |
| 1. 硒与健康及肿瘤防治 | 第10-13页 |
| 1.1. 硒与人体健康 | 第10-12页 |
| 1.1.1. 硒化物的种类 | 第10-11页 |
| 1.1.2. 摄食硒与疾病 | 第11页 |
| 1.1.3. 硒蛋白 | 第11-12页 |
| 1.2. 硒与肿瘤 | 第12-13页 |
| 1.2.1. 硒与肿瘤预防 | 第12页 |
| 1.2.2. 硒与癌症治疗 | 第12页 |
| 1.2.3. 亚硒酸钠与癌症治疗 | 第12-13页 |
| 2. 结直肠癌 | 第13-16页 |
| 2.1. 结直肠癌的发病机制 | 第14-15页 |
| 2.1.1. 结直肠癌的发病阶段 | 第14页 |
| 2.1.2. 结直肠癌的分子病理学 | 第14-15页 |
| 2.2. 结直肠癌的转移 | 第15-16页 |
| 2.3. 结直肠癌的治疗 | 第16页 |
| 3. 细胞凋亡 | 第16-18页 |
| 3.1. 细胞凋亡外源途径 | 第16-17页 |
| 3.2. 细胞凋亡内源途径 | 第17-18页 |
| 4. RIP1整合细胞应激 | 第18-21页 |
| 4.1. RIP1调节细胞生存与凋亡 | 第18-19页 |
| 4.1.1. 泛素化的类型及功能 | 第18页 |
| 4.1.2. RIP1泛素化修饰 | 第18-19页 |
| 4.2. RIP1与坏死 | 第19-20页 |
| 4.3. RIP1应答细胞内源信号 | 第20-21页 |
| 5. 前期研究基础 | 第21页 |
| 6. 本研究的主要意义和工作内容 | 第21-23页 |
| 6.1. 亚硒酸钠激活Caspase8诱导内源及外源凋亡通路 | 第21页 |
| 6.2. cIAP可以作为亚硒酸钠联合治疗的潜在靶点 | 第21页 |
| 6.3. 泛素化调控肿瘤凋亡 | 第21-23页 |
| 材料和方法 | 第23-53页 |
| 1. 实验材料 | 第23-29页 |
| 1.1. 实验细胞 | 第23页 |
| 1.2. 质粒与菌株 | 第23页 |
| 1.3. 试剂 | 第23-24页 |
| 1.4. 抗体 | 第24-25页 |
| 1.5. PCR引物 | 第25-26页 |
| 1.6. 靶基因siRNA合成 | 第26页 |
| 1.7. 主要溶液的配制 | 第26-28页 |
| 1.8. 主要仪器 | 第28-29页 |
| 2. 实验方法 | 第29-53页 |
| 2.1. 细胞的培养、冻存及复苏 | 第29-30页 |
| 2.2. 蛋白样品的制备 | 第30-32页 |
| 2.3. 免疫共沉淀 | 第32-33页 |
| 2.4. Western Blot | 第33-34页 |
| 2.5. Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术凋亡检测 | 第34-35页 |
| 2.6. 质粒转染 | 第35-36页 |
| 2.7. RNAi方法干扰细胞 | 第36-37页 |
| 2.8 免疫荧光 | 第37-38页 |
| 2.9 染色质免疫共沉淀 | 第38-44页 |
| 2.10. 细菌转化与质粒提取 | 第44-45页 |
| 2.11. RNA提取及基因表达分析 | 第45-47页 |
| 2.12. HCT116结直肠癌异位移植瘤裸鼠模型的建立 | 第47-49页 |
| 2.13. 肿瘤组织及脏器组织的石蜡块制备及切片 | 第49页 |
| 2.14. 苏木素-伊红染色 | 第49-50页 |
| 2.15. TUNEL检测细胞凋亡 | 第50-51页 |
| 2.16. 免疫组织化学技术 | 第51-52页 |
| 2.17. 统计分析 | 第52-53页 |
| 实验结果 | 第53-75页 |
| 1. 亚硒酸钠激活Caspase-8相关的内源及外源凋亡通路 | 第53-58页 |
| 1.1 亚硒酸钠诱导Caspase-8依赖的凋亡 | 第53-55页 |
| 1.2 亚硒酸钢作用下激活的Caspase-8切割Bid引发线粒体凋亡通路 | 第55-58页 |
| 2. Lys63型多聚泛素化修饰与硒诱导的细胞凋亡 | 第58-63页 |
| 2.1 亚硒酸钠诱导Caspase-8激活源于RIP1上Lys63型多聚泛素链被移除 | 第58-61页 |
| 2.2 亚硒酸钠抑制结直肠癌细胞RIP1/IKK/NF-κB/cFlip通路 | 第61-63页 |
| 3. 亚硒酸钠诱导RIP1去泛素化的调控机制 | 第63-71页 |
| 3.1 clAP在硒诱导结直肠癌细胞凋亡中的作用 | 第63-67页 |
| 3.2 CYLD在姻诱导结肠癌细胞调亡中的作用 | 第67-69页 |
| 3.3 亚硒酸钠负调控LEF1对CYLD的转录抑制 | 第69-71页 |
| 4. 结直肠癌异位移植瘤模型中亚硒酸钠诱导LEF1/CYLD/clAPs/caspase-8通路依赖的凋亡 | 第71-75页 |
| 4.1 结直肠癌异位移植瘤裸鼠模型的建立 | 第71-72页 |
| 4.2 硒在体外对LEF1/CYLD/clAPs/caspase-8的调控 | 第72-75页 |
| 讨论 | 第75-80页 |
| 1. 泛素化的调控与细胞凋亡 | 第75-76页 |
| 2. 亚硒酸钠诱导结直肠癌细胞凋亡的执行与坏死的规避 | 第76-77页 |
| 3. IAP与亚硒酸钠联合治疗的应用前景 | 第77-79页 |
| 4. 研究展望 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-91页 |
| 文献综述 | 第91-108页 |
| 参考文献 | 第101-108页 |
| 缩略词表 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 研究生在读期间发表论文情况 | 第111-113页 |
