| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第16-20页 |
| 1.1 间质干细胞与肿瘤 | 第16-17页 |
| 1.1.1 间质干细胞的生物学特性 | 第16页 |
| 1.1.2 肿瘤组织来源的 MSC | 第16-17页 |
| 1.1.3 MSC与肿瘤 | 第17页 |
| 1.2 YAP与肿瘤 | 第17-20页 |
| 1.2.1 YAP及其相关信号通路 | 第17-18页 |
| 1.2.2 YAP与肿瘤 | 第18-20页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第20-24页 |
| 2.1 研究目的 | 第20页 |
| 2.2 研究方法 | 第20-21页 |
| 2.3 实验设计方案 | 第21-23页 |
| 2.4 研究意义 | 第23-24页 |
| 第三章 YAP敲减对GC-MSC增殖、迁移、侵袭及干性调节的影响 | 第24-39页 |
| 3.1 材料 | 第24-27页 |
| 3.1.1 标本的采集 | 第24页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第24-26页 |
| 3.1.3 主要仪器及相关耗材 | 第26-27页 |
| 3.1.4 细胞株 | 第27页 |
| 3.2 方法 | 第27-32页 |
| 3.2.1 BM-MSC的分离培养 | 第27页 |
| 3.2.2 GC-MSC的分离培养 | 第27-28页 |
| 3.2.3 慢病毒敲减GC-MSC中YAP分子 | 第28页 |
| 3.2.4 细胞蛋白的提取 | 第28-29页 |
| 3.2.5 Western blot | 第29页 |
| 3.2.6 细胞免疫荧光 | 第29-30页 |
| 3.2.7 mRNA的提取 | 第30页 |
| 3.2.8 mRNA逆转录 | 第30页 |
| 3.2.9 实时荧光定量PCR | 第30-31页 |
| 3.2.10 平板克隆实验 | 第31页 |
| 3.2.11 Transwell迁移实验 | 第31-32页 |
| 3.2.12 Transwell侵袭实验 | 第32页 |
| 3.2.13 统计学分析 | 第32页 |
| 3.3 结果 | 第32-37页 |
| 3.3.1 GC-MSC 较 BM-MSC 中 YAP 表达明显增高 | 第32-33页 |
| 3.3.2 YAP-shRNA 的干扰有效降低 GC-MSC 中 YAP 的表达 | 第33-34页 |
| 3.3.3 YAP的敲减抑制GC-MSC的增殖 | 第34-35页 |
| 3.3.4 YAP的敲减抑制GC-MSC迁移 | 第35页 |
| 3.3.5 YAP的敲减抑制GC-MSC侵袭 | 第35-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 GC-MSC中YAP的敲减对胃癌细胞生物学特性的影响 | 第39-50页 |
| 4.1 材料 | 第39-40页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第39页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第39-40页 |
| 4.1.3 主要仪器及相关耗材 | 第40页 |
| 4.2 方法 | 第40-41页 |
| 4.2.1 GC-MSC 培养上清（GC-MSC-CM）收集 | 第40页 |
| 4.2.2 SGC-7901 不同处理及上清的收集 | 第40页 |
| 4.2.3 平板克隆实验 | 第40页 |
| 4.2.4 细胞免疫荧光 | 第40页 |
| 4.2.5 实时荧光定量PCR | 第40页 |
| 4.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第40-41页 |
| 4.2.7 Western blot | 第41页 |
| 4.2.8 血管形成实验 | 第41页 |
| 4.3 结果 | 第41-48页 |
| 4.3.1 YAP敲减的GC-MSC抑制SGC-7901 增殖 | 第41-42页 |
| 4.3.2 YAP敲减的GC-MSC对SGC-7901 的凋亡没有影响 | 第42-43页 |
| 4.3.3 YAP敲减的GC-MSC抑制SGC-7901 的迁移和侵袭 | 第43-44页 |
| 4.3.4 YAP敲减的GC-MSC抑制SGC-7901 EMT的发生 | 第44-45页 |
| 4.3.5 YAP敲减的GC-MSC抑制SGC-7901 中血管形成相关因子的表达 | 第45-46页 |
| 4.3.6 YAP敲减的GC-MSC抑制内皮细胞EA.hy926血管形成 | 第46页 |
| 4.3.7 YAP敲减的GC-MSC抑制内皮细胞EA.hy926迁移 | 第46-47页 |
| 4.3.8 YAP敲减的GC-MSC抑制SGC-7901 中 β-catenin信号通路的活化 | 第47-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 YAP敲减的GC-MSC抑制肿瘤细胞体内成瘤 | 第50-56页 |
| 5.1 材料 | 第50-51页 |
| 5.1.1 细胞 | 第50页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第50-51页 |
| 5.1.3 主要仪器及相关耗材 | 第51页 |
| 5.1.4 实验动物 | 第51页 |
| 5.2 方法 | 第51-53页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第51页 |
| 5.2.2 裸鼠皮下致瘤模型 | 第51页 |
| 5.2.3 肿瘤组织病理分析 | 第51-52页 |
| 5.2.4 免疫组织化学染色 | 第52页 |
| 5.2.5 组织免疫荧光染色 | 第52-53页 |
| 5.2.6 统计学分析 | 第53页 |
| 5.3 结果 | 第53-55页 |
| 5.3.1 YAP敲减的GC-MSC抑制胃癌细胞体内生长 | 第53页 |
| 5.3.2 YAP敲减的GC-MSC抑制体内瘤组织Ki67、E-cadherin、Vimentin、CD31与 β-catenin的表达 | 第53-55页 |
| 5.4 讨论 | 第55-56页 |
| 第六章 结论与展望 | 第56-57页 |
| 6.1 结论 | 第56页 |
| 6.2 展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的科研成果及参加的学术会议 | 第66-67页 |
