摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩写词(ABBREVIATIONS) | 第10-11页 |
1 绪论 | 第11-21页 |
1.1 菊花育种 | 第11-12页 |
1.2 表观遗传学与DNA甲基化 | 第12-15页 |
1.2.1 表观遗传学 | 第12页 |
1.2.2 DNA甲基化 | 第12-14页 |
1.2.3 DNA甲基化与植物花期 | 第14页 |
1.2.4 DNA甲基化研究方法 | 第14-15页 |
1.3 RNAI干扰 | 第15-17页 |
1.3.1 RNAi作用机制 | 第15页 |
1.3.2 RNAi沉默信号与在植物中的传递 | 第15-16页 |
1.3.3 RNAi技术在植物中的应用 | 第16-17页 |
1.4 FT-LIKES基因与植物花期 | 第17-18页 |
1.5 研究的目的、意义以及主要内容 | 第18-21页 |
2 材料与方法 | 第21-35页 |
2.1 实验仪器 | 第21页 |
2.2 实验材料 | 第21-22页 |
2.3 实验药品、试剂及试剂的配制 | 第22-23页 |
2.4 实验方法 | 第23-33页 |
2.4.1 菊花嫁接方法 | 第23页 |
2.4.2 菊花表型的观察及成花进程统计方法 | 第23页 |
2.4.3 菊花RNA的提取 | 第23-24页 |
2.4.4 cDNA第一条链反转录 | 第24-25页 |
2.4.5 实时荧光定量PCR实验流程 | 第25-27页 |
2.4.6 HPLC实验流程 | 第27页 |
2.4.7 MSAP技术检测菊花基因组CCGG位点甲基化变化实验流程 | 第27-32页 |
2.4.8 菊花转座子甲基化变化 | 第32-33页 |
2.5 数据分析方法 | 第33-35页 |
3 结果与分析 | 第35-51页 |
3.1 RNAI干涉CMMET1基因对菊花形态的影响 | 第35-39页 |
3.1.1 菊花转基因植株株高的变化 | 第35页 |
3.1.2 菊花叶形的变化 | 第35-37页 |
3.1.3 RNAi干涉菊花MET1基因对菊花成花的影响 | 第37-39页 |
3.2 RNAI干涉CMMET1对菊花砧木及接穗CMMET1基因表达的影响 | 第39-41页 |
3.2.1 RNA质量检测 | 第39页 |
3.2.2 CmMET1基因相对表达分析 | 第39-41页 |
3.3 CMMET1表达量下调对菊花砧木及接穗相关甲基转移酶基因表达的影响 | 第41-42页 |
3.4 菊花开花基因FT-LIKES表达量变化分析 | 第42-43页 |
3.5 菊花转基因植株及嫁接处理后不同品种DNA甲基化变化 | 第43-51页 |
3.5.1 转基因植株及嫁接处理后菊花DNA甲基化变化的HPLC分析 | 第43-45页 |
3.5.2 转基因植株及嫁接处理后菊花DNA甲基化变化的MSAP分析 | 第45-48页 |
3.5.3 菊花反转录转座子DNA甲基化变化分析(iPBS-MSAP) | 第48-51页 |
4 讨论 | 第51-55页 |
4.1 RNAI处理后菊花甲基化相关基因表达量之间关系分析 | 第51-52页 |
4.2 CMMET1基因表达量下调对DNA甲基化水平的影响 | 第52页 |
4.3 DNA甲基化与菊花花期的关系 | 第52-53页 |
4.4 RNAI转基因材料与嫁接材料的应用 | 第53-55页 |
5 结论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
附录 | 第66-67页 |