| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 符号表 | 第17-18页 |
| 缩略语表 | 第18-20页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-44页 |
| 1.1 引言 | 第20-21页 |
| 1.2 生物分离过程中的层析技术 | 第21-23页 |
| 1.2.1 离子交换层析 | 第21-22页 |
| 1.2.2 亲和层析 | 第22页 |
| 1.2.3 疏水相互作用层析 | 第22-23页 |
| 1.2.4 凝胶过滤层析 | 第23页 |
| 1.3 混合模式层析 | 第23-31页 |
| 1.3.1 混合模式层析原理 | 第23-24页 |
| 1.3.2 混合模式层析的种类 | 第24-26页 |
| 1.3.3 混合模式功能配基 | 第26-29页 |
| 1.3.4 混合模式层析的应用 | 第29-31页 |
| 1.4 多组分蛋白吸附 | 第31-34页 |
| 1.4.1 多组分吸附平衡模型 | 第31-33页 |
| 1.4.2 多组分蛋白质吸附的研究进展 | 第33-34页 |
| 1.5 层析介质内的蛋白传质行为研究 | 第34-37页 |
| 1.5.1 宏观方法 | 第34-36页 |
| 1.5.2 微观方法 | 第36-37页 |
| 1.6 共聚焦激光扫描显微镜技术 | 第37-42页 |
| 1.6.1 简介 | 第37页 |
| 1.6.2 工作原理 | 第37-39页 |
| 1.6.3 CLSM的应用 | 第39-42页 |
| 1.6.4 CLSM用于蛋白吸附研究的局限性 | 第42页 |
| 1.7 本论文的研究思路 | 第42-44页 |
| 第二章 Nuvia cPrime介质的蛋白吸附性能 | 第44-64页 |
| 2.1 引言 | 第44页 |
| 2.2 材料与方法 | 第44-46页 |
| 2.2.1 仪器与试剂 | 第44-45页 |
| 2.2.2 吸附等温线测定 | 第45-46页 |
| 2.2.3 层析柱中吸附行为 | 第46页 |
| 2.2.4 层析柱中解吸行为 | 第46页 |
| 2.2.5 Zeta电位测定 | 第46页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第46-62页 |
| 2.3.1 蛋白的Zeta电位 | 第46-47页 |
| 2.3.2 pH对bIgG和BSA静态吸附的影响 | 第47-50页 |
| 2.3.3 盐浓度对bIgG和BSA静态吸附的影响 | 第50-55页 |
| 2.3.4 层析柱中吸附行为 | 第55-59页 |
| 2.3.5 层析柱中洗脱行为 | 第59-62页 |
| 2.4 本章小结 | 第62-64页 |
| 第三章 Nuvia cPrime介质对混合蛋白的吸附性能 | 第64-86页 |
| 3.1 引言 | 第64页 |
| 3.2 吸附理论模型 | 第64-67页 |
| 3.2.1 单组分静态吸附模型 | 第65页 |
| 3.2.2 双组分竞争性吸附模型 | 第65-66页 |
| 3.2.3 双组分吸附的预测 | 第66-67页 |
| 3.2.4 误差分析 | 第67页 |
| 3.2.5 吸附动力学模型 | 第67页 |
| 3.3 材料与方法 | 第67-69页 |
| 3.3.1 试剂与仪器 | 第67-68页 |
| 3.3.2 蛋白质定量分析 | 第68页 |
| 3.3.3 吸附等温线测定 | 第68页 |
| 3.3.4 吸附动力学曲线测定 | 第68页 |
| 3.3.5 Zeta电位测定 | 第68-69页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第69-85页 |
| 3.4.1 蛋白的Zeta电位 | 第69页 |
| 3.4.2 混合蛋白浓度的定量分析 | 第69-71页 |
| 3.4.3 单一组分吸附 | 第71-74页 |
| 3.4.4 双组分吸附 | 第74-81页 |
| 3.4.5 单一和混合蛋白的吸附动力学 | 第81-85页 |
| 3.5 本章小结 | 第85-86页 |
| 第四章 混合模式介质KB-ABI制备及蛋白吸附性能 | 第86-110页 |
| 4.1 引言 | 第86页 |
| 4.2 材料与方法 | 第86-89页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第86-87页 |
| 4.2.2 介质制备 | 第87-88页 |
| 4.2.3 活化密度测定 | 第88页 |
| 4.2.4 配基密度测定 | 第88页 |
| 4.2.5 吸附等温线测定 | 第88-89页 |
| 4.2.6 吸附动力学曲线测定 | 第89页 |
| 4.2.7 层析柱中吸附行为 | 第89页 |
| 4.2.8 蛋白质定量分析 | 第89页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第89-109页 |
| 4.3.1 KB-ABI介质制备 | 第89-91页 |
| 4.3.2 单组分蛋白的静态吸附 | 第91-97页 |
| 4.3.3 双组分蛋白的静态吸附 | 第97-103页 |
| 4.3.4 吸附动力学曲线 | 第103-107页 |
| 4.3.5 柱吸附行为 | 第107-109页 |
| 4.4 本章小结 | 第109-110页 |
| 第五章 混合模式层析分离免疫球蛋白G和抗体 | 第110-124页 |
| 5.1 引言 | 第110页 |
| 5.2 材料与方法 | 第110-113页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第110-111页 |
| 5.2.2 IgG/BSA混合蛋白中分离IgG | 第111页 |
| 5.2.3 CHO细胞培养液中分离mAb | 第111页 |
| 5.2.4 Protein A亲和层析 | 第111-112页 |
| 5.2.5 蛋白定量分析 | 第112页 |
| 5.2.6 蛋白电泳分析 | 第112页 |
| 5.2.7 CHO宿主细胞蛋白测定 | 第112-113页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第113-122页 |
| 5.3.1 Nuvia cPrime介质层析分离性能 | 第113-116页 |
| 5.3.2 KB-ABI介质的层析分离性能 | 第116-121页 |
| 5.3.3 CHO宿主细胞蛋白分析 | 第121-122页 |
| 5.4 本章小结 | 第122-124页 |
| 第六章 介质内蛋白质吸附过程的CLSM分析 | 第124-156页 |
| 6.1 引言 | 第124页 |
| 6.2 材料及方法 | 第124-127页 |
| 6.2.1 试剂与仪器 | 第124-125页 |
| 6.2.2 蛋白质的荧光标记 | 第125页 |
| 6.2.3 荧光蛋白的分离纯化 | 第125-126页 |
| 6.2.4 标记蛋白的吸附 | 第126页 |
| 6.2.5 标记蛋白的解吸 | 第126-127页 |
| 6.2.6 蛋白的次序吸附 | 第127页 |
| 6.2.7 CLSM观测 | 第127页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第127-154页 |
| 6.3.1 荧光标记对蛋白吸附行的影响 | 第127-129页 |
| 6.3.2 Nuvia cPrime介质吸附的CLSM分析 | 第129-138页 |
| 6.3.3 KB-ABI介质吸附的CLSM分析 | 第138-143页 |
| 6.3.4 CLSM分析和宏观吸附的关联 | 第143-149页 |
| 6.3.5 蛋白解吸的CLSM分析 | 第149-153页 |
| 6.3.6 蛋白顺序吸附的CLSM分析 | 第153-154页 |
| 6.4 本章小结 | 第154-156页 |
| 第七章 结论与展望 | 第156-160页 |
| 7.1 结论 | 第156-158页 |
| 7.2 建议与展望 | 第158-160页 |
| 参考文献 | 第160-172页 |
| 攻读博士学位期间的研究成果 | 第172-173页 |
| 作者简介 | 第173页 |
