| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 第1章 文献综述 | 第18-32页 |
| 1.1 药物体内行为与肝/肾清除 | 第18-24页 |
| 1.1.1 肝脏与药物肝清除 | 第19-21页 |
| 1.1.2 肾脏与药物肾清除 | 第21-23页 |
| 1.1.3 药物代谢动力学与清除率 | 第23-24页 |
| 1.2 体外药物清除率预测的研究进展 | 第24-27页 |
| 1.2.1 用于肝清除率与胆汁清除率预测的体外模型 | 第24-25页 |
| 1.2.2 用于肾清除率预测的体外模型 | 第25-26页 |
| 1.2.3 用于整体清除率预测的体外模型 | 第26页 |
| 1.2.4 体外模型预测清除率及其影响因素 | 第26-27页 |
| 1.3 生物人工肝/肾及其微型化 | 第27-30页 |
| 1.3.1 常见生物人工肝构型及其微型化 | 第28-29页 |
| 1.3.2 常见生物人工肾构型 | 第29-30页 |
| 1.4 课题的主要研究思路 | 第30-32页 |
| 第2章 材料与方法 | 第32-50页 |
| 2.1 动物与细胞株 | 第32页 |
| 2.2 主要试剂与仪器 | 第32-33页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第32页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第32-33页 |
| 2.3 大鼠肝细胞分离与培养 | 第33-34页 |
| 2.3.1 大鼠肝细胞分离 | 第33页 |
| 2.3.2 肝细胞单层贴壁培养 | 第33-34页 |
| 2.3.3 肝细胞三明治培养 | 第34页 |
| 2.3.4 微型生物人工肝制备 | 第34页 |
| 2.3.5 药物对肝细胞的毒性作用 | 第34页 |
| 2.4 体外肝细胞功能分析 | 第34-38页 |
| 2.4.1 细胞活率(MTT法)测定 | 第34-35页 |
| 2.4.2 细胞转运蛋白活性测定 | 第35-36页 |
| 2.4.3 胆汁清除率预测 | 第36-37页 |
| 2.4.4 RT-PCR检测 | 第37-38页 |
| 2.4.5 透射电镜检测 | 第38页 |
| 2.4.6 转运蛋白抑制对药物胞内积累的影响 | 第38页 |
| 2.5 肾细胞分离与培养 | 第38-39页 |
| 2.5.1 大鼠肾近端小管上皮细胞分离 | 第38页 |
| 2.5.2 肾小管细胞单层贴壁培养及传代 | 第38-39页 |
| 2.5.3 微型生物人工肾的制备 | 第39页 |
| 2.6 体外肾小管功能分析 | 第39-42页 |
| 2.6.1 扫描电镜观察 | 第39页 |
| 2.6.2 渗透率检测 | 第39-40页 |
| 2.6.3 细胞生长速率检测 | 第40页 |
| 2.6.4 线粒体活性及谷胱甘肽(GSH)水平测定 | 第40页 |
| 2.6.5 碱性磷酸酶(AP)活性测定 | 第40页 |
| 2.6.6 γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性测定 | 第40-41页 |
| 2.6.7 葡萄糖转运蛋白(GLUT)活性及葡萄糖重吸收速率测定 | 第41-42页 |
| 2.6.8 CYP3A活性测定及其抑制 | 第42页 |
| 2.6.9 Mrp2及Mdrl活性测定 | 第42页 |
| 2.6.10 RT-PCR检测 | 第42页 |
| 2.7 清除率预测 | 第42-48页 |
| 2.7.1 大鼠肝细胞药物处理及取样 | 第42页 |
| 2.7.2 肾小管上皮细胞药物处理及取样 | 第42-43页 |
| 2.7.3 样品检测 | 第43-45页 |
| 2.7.4 数据分析 | 第45-48页 |
| 2.7.5 预测精确度评价 | 第48页 |
| 2.8 统计学分析 | 第48-50页 |
| 第3章 微型生物人工肝的的肝胆转运功能研究 | 第50-60页 |
| 3.1 引言 | 第50页 |
| 3.2 基于肝胆转运功能的微型生物人工肝培养条件优化 | 第50-53页 |
| 3.2.1 胶原浓度优化 | 第51-53页 |
| 3.2.2 培养基添加成分优化 | 第53页 |
| 3.3 转运蛋白活性与基因表达评价 | 第53-59页 |
| 3.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 第4章 微型生物人工肝预测胆汁清除率及肝胆转运相关毒性 | 第60-70页 |
| 4.1 引言 | 第60页 |
| 4.2 微型生物人工肝预测胆汁清除率 | 第60-63页 |
| 4.2.1 用于胆汁清除率预测的细胞培养时间和化合物选择 | 第60页 |
| 4.2.2 肝细胞对体内胆汁清除率的预测 | 第60-63页 |
| 4.3 微型生物人工肝用于肝胆转运相关药物毒性研究 | 第63-68页 |
| 4.3.1 微型生物人工肝用于甲氨蝶呤毒性研究 | 第64-66页 |
| 4.3.2 微型生物人工肝用于红霉素毒性研究 | 第66-68页 |
| 4.4 本章小结 | 第68-70页 |
| 第5章 微型生物人工肾的构建及其功能研究 | 第70-84页 |
| 5.1 引言 | 第70页 |
| 5.2 用于微型生物人工肾的包被基质筛选 | 第70-72页 |
| 5.3 微型生物人工肾内的细胞融合 | 第72-74页 |
| 5.4 体外肾小管细胞的生长及功能评价 | 第74-81页 |
| 5.5 原代大鼠肾小管细胞体内外功能对比 | 第81-82页 |
| 5.6 本章小结 | 第82-84页 |
| 第6章 微型生物人工肝/肾预测药物清除率 | 第84-100页 |
| 6.1 引言 | 第84页 |
| 6.2 微型生物人工肝预测药物肝清除率 | 第84-90页 |
| 6.2.1 微型生物人工肝的药物清除 | 第84-86页 |
| 6.2.2 微型生物人工肝对体内肝清除率的预测 | 第86-90页 |
| 6.3 微型生物人工肾预测肾清除率 | 第90-97页 |
| 6.3.1 微型生物人工肾对主动运输型药物的清除率预测 | 第90-96页 |
| 6.3.2 微型生物人工肾反映药物被动重吸收的能力 | 第96-97页 |
| 6.4 整体清除率预测 | 第97-98页 |
| 6.5 本章小结 | 第98-100页 |
| 第7章 结论与展望 | 第100-102页 |
| 7.1 总结 | 第100页 |
| 7.2 不足之处 | 第100-101页 |
| 7.3 展望 | 第101-102页 |
| 论文主要创新点 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-118页 |
| 攻读学位期间的科研成果 | 第118页 |
